特异性结合MAGE-A的抗原结合蛋白制造技术

本发明专利技术涉及特异性结合色素瘤相关抗原A(MAGE

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】特异性结合MAGE
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A的抗原结合蛋白
[0001]本专利技术涉及特异性结合色素瘤相关抗原A(MAGE
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A)蛋白来源抗原的抗原结合蛋白。本专利技术特别提出了与MAGE
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A抗原肽特异性结合的抗原结合蛋白，所述MAGE
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A抗原肽包含SEQ ID NO:1或由SEQ ID NO:1组成且与主要组织相容性(MHC)蛋白形成复合体。特别地，本专利技术的抗原结合蛋白含有与所述MAGE
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A肽/MHC复合体特异性结合的新型改造T细胞受体(TCR)的互补决定区(CDR)。本专利技术的抗原结合蛋白可用于诊断、治疗和预防表达MAGE
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A的癌性疾病。还提出了编码本专利技术抗原结合蛋白的核酸、包含这些核酸的载体、表达抗原结合蛋白的重组细胞以及包含本专利技术抗原结合蛋白的药物组合物。
[0002]专利技术背景
[0003]氨基酸序列“KVLEHVVRV”(SEQ ID NO:1)的MAGE
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A肿瘤抗原(也称为MAG
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>003肽)是MAG本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.种抗原结合蛋白，其与MAGE
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A抗原肽特异性结合，所述MAGE
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A抗原肽包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列“KVLEHVVRV”或由其组成，其中所述抗原肽与主要组织相容性复合体(MHC)蛋白形成复合体，所述抗原结合蛋白包含a)包含第一可变结构域的第一条多肽链，所述第一可变结构域包含三个互补决定区(CDR)CDRa1、CDRa2和CDRa3，其中：
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CDRa1包含氨基酸序列“X1SSSTY”SEQ ID NO:72或由其组成，其中X1为任何氨基酸，或与SEQ ID NO:72不同的氨基酸序列，不同点为：至少有一个氨基酸取代基，
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CDRa2包含氨基酸序列“IX1SX2X3DX4”SEQ ID NO:73或由其组成，其中X1至X4为任何氨基酸，
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CDRa3包含氨基酸序列“CAEX1X2SX3SKIIF”SEQ ID NO:77或由其组成，其中X1至X3为任何氨基酸，前提是：如果CDRa1包含氨基酸序列SEQ ID NO:5或由其组成并且CDRa2包含氨基酸序列SEQ ID NO:6或由其组成，则CDRa3不包含“CAEYSSASKIIF”(SEQ ID NO:7)也不是由其组成，优选前提是：CDRa3不包含“CAEYSSASKIIF”(SEQ ID NO:7)也不是由其组成，(b)包含第二可变结构域的第二条多肽链，所述第二可变结构域包含三个CDR
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CDRb1、CDRb2和CDRb3，其中：
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CDRb1包含氨基酸序列“X1GHDY”SEQ ID NO:78或由其组成，其中X1为任何氨基酸，或与SEQ ID NO:78不同的氨基酸序列，不同点为：至少有一个氨基酸取代基，
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CDRb2包含氨基酸序列“FX1X2X3X4P”SEQ ID NO:79或由其组成，其中X1至X4为任何氨基酸，
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CDRb3包含氨基酸序列“CASRAX1TGELFF”SEQ ID NO:82或由其组成，其中X1为任何氨基酸，或与SEQ ID NO:82不同的氨基酸序列，不同点为：至少有一个氨基酸取代基。2.根据权利要求1中所述的抗原结合蛋白，其中所述抗原结合蛋白与所述抗原肽的SEQ ID NO:1氨基酸序列“KVLEHVVRV”特异性结合，并且其中所述抗原肽与MHC蛋白形成复合体，其中，优选为MHC蛋白为人白细胞抗原(HLA)蛋白，优选为HLA
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A*02。3.根据权利要求1或2所述的抗原结合蛋白，其中，所述抗原结合蛋白与表位特异性结合，所述表位包含SEQ ID NO:1的MAGE
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A抗原肽的至少三个氨基酸位置或由其组成，优选为至少三个氨基酸位置选自由SEQ ID NO:1氨基酸序列的氨基酸位置1、5、7和8或1、3、5和7组成的组。4.根据权利要求1至3任一项所述的抗原结合蛋白，其中，所述抗原结合蛋白与所述MAGE
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A抗原肽与HLA
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A*02之复合体结合，所述MAGE
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A抗原肽包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列或由其组成，其K
D
≤100μM、≤50μM、≤30μM、≤25μM、≤1μM、≤500nM、≤100nM、≤50nM、≤10nM，优选为50pM至100μM、50pM至10μM、50pM至1μM，更优选为50pM至500nM、50pM至100nM、50pM至50nM和50pM至10nM。5.根据权利要求1至4任一项所述的抗原结合蛋白，其中，所述抗原结合蛋白对MAGE
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A/MHC复合体提呈细胞的EC
50
值小于100nM、小于50nM、小于10nM、小于900pM、小于500pM、小于300pM、小于200pM、小于150pM、小于100pM、小于50pM、小于20pM、小于10pM，例如0.1nM至20nM，例如0.5nM至15nM、0.8nM至12nM、0.8nM至10nM、0.8nM至10nM、0.8nM至10nM或例如1pM至150pM、1至100pM、1至50pM、1至20pM、1至20pM。6.根据权利要求1至5任一项所述的抗原结合蛋白，其中，当选自由RABGAP1L
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001、
AXIN1
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001、ANO5
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001、TPX2
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001、SYNE3
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001、MIA3
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001、HERC4
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001、PSME2
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001、HEATR5A
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001、CNOT1
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003、TEP1
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003、PITPNM3
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001、INTS4
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002、SAMH
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001、PPP1CA
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006、RPL
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007、SETD1A
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001、NOMAP
‑1‑
0320、NOMAP
‑1‑
1223和ODC
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001，优选为HEATR5A
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001和CNOT1
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003组成的列表中的肽与MHC蛋白形成复合体，优选与HLA
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A*02形成复合体时，所述抗原结合蛋白不与所述肽显著结合。7.根据权利要求1至6任一项所述的抗原结合蛋白，其中，抗原结合蛋白为抗体或其片段，或双特异性抗体或其片段，或T细胞受体(TCR)或其片段，或双特异性T细胞受体(TCR)或其片段。8.根据权利要求1至7任一项所述的抗原结合蛋白，其中，第一多肽和第二多肽被共价或非共价连接在一起。9.根据权利要求8所述的抗原结合蛋白，其中，所述抗原结合蛋白为单链TCR(scTCR)或单链双特异性抗体。10.根据权利要求1至9任一项所述的抗原结合蛋白，其中，所述第一可变结构域还包含选自由FR1
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a、FR2
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a、FR3
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a和FR4
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a组成组中的一个或多个框架区，其中
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FR1
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a包含SEQ ID NO:83氨基酸序列或与SEQ ID NO:83具有至少85％、至少90％或至少95％同一性的氨基酸序列或由其组成，
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FR2
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a包含SEQ ID NO:84氨基酸序列或与SEQ ID NO:84具有至少85％、至少90％或至少95％同一性的氨基酸序列或由其组成，
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FR3
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a包含SEQ ID NO:85氨基酸序列或与SEQ ID NO:85具有至少85％、至少90％或至少95％同一性的氨基酸序列或由其组成，
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FR4
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a包含SEQ ID NO:86氨基酸序列或与SEQ ID NO:86具有至少85％、至少90％或至少95％同一性的氨基酸序列或由其组成，和所述第二可变结构域还包含选自由FR1
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b、FR2
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b、FR3
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b和FR4
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b组成组中的一个或多个框架区，并且其中
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FR1
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b包含SEQ ID NO:87氨基酸序列或与SEQ ID NO:87具有至少85％、至少90％或至少95％同一性的氨基酸序列或由其组成，
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FR2
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b包含SEQ ID NO:88氨基酸序列或与SEQ ID NO:88具有至少85％、至少90％或至少95％同一性的氨基酸序列或由其组成，
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FR3
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b包含SEQ ID NO:89氨基酸序列或与SEQ ID NO:89具有至少85％、至少90％或至少95％同一性的氨基酸序列或由其组成，或
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FR4
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b包含SEQ ID NO:90氨基酸序列或与SEQ ID NO:90具有至少85％、至少90％或至少95％同一性的氨基酸序列或由其组成。11.根据权利要求10所述的抗原结合蛋白，其中，框架区包含至少一个选自包含以下的氨基酸取代基组中的氨基酸取代基：
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FR1
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a中第19位置处的氨基酸取代基，其中所述氨基酸取代基优选为S19A、S19V，更优选为S19V，
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FR2
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a中第48和/或第50位置处的氨基酸取代基，其中所述第48位置处的氨基酸取代基优选为A48K，所述第50位置处的氨基酸取代基优选为L50P，
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FR2
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b中第46、47和/或54位置处的氨基酸取代基，其中所述第46、47和54位置处的氨
基酸取代基分别优选为M46P、M47G和I54F，其中，当上面定义的CDRb3氨基酸序列在第109位置处包含氨基酸109D时，优选第54位置处的所述氨基酸为I54F，
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FR3
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b中第66位置处的氨基酸取代基，其中所述第66位置处的氨基酸取代基分别优选为I66C，其中，当上面定义的CDRb2氨基酸序列在第57位置处包含氨基酸57C时，优选第66位置处的所述氨基酸为66C，其中取代基的位置根据IMGT命名法给出。12.根据权利要求11所述的抗原结合蛋白，其中，所述第一可变结构域还包含选自由FR1
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a、FR2
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a、FR3
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a和FR4
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a组成组中的一个或多个框架区，其中
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FR1
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a包含SEQ ID NO:91氨基酸序列或与SEQ ID NO:91具有至少85％同一性的氨基酸序列或由其组成，其中优选为与SEQ ID NO:91具有至少85％同一...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：伊玛提克斯生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：