影响细胞因子分泌的方法及应用技术

本发明专利技术属于生物医学领域，具体涉及光照在影响细胞因子分泌中的应用。具体地，本发明专利技术提供了全光谱LED光在促进眼周细胞分泌细胞因子中的应用，所述细胞因子包括CNTF、PEDF、多巴胺。胺。胺。

【技术实现步骤摘要】
影响细胞因子分泌的方法及应用


[0001]本专利技术属于生物医学领域，具体涉及光照在影响细胞因子分泌中的应用。

技术介绍

[0002]视网膜是眼球壁的最内一层，位于脉络膜的内侧，由一层色素细胞及多层神经细胞组成，可接受光线的刺激，为眼内感光成像的地方。
[0003]视网膜色素上皮(retinal pigmented epithelium，RPE)细胞是位于神经视网膜和脉络膜之间的单层多边形细胞，RPE细胞在眼的发育和视觉功能中发挥着重要作用，例如：维持血
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视网膜屏障、分泌多种生长因子、参与视循环代谢、吞噬视细胞脱落的外节盘膜等。因此，维持RPE细胞的完整性对正常的视网膜功能至关重要。视网膜病变多与RPE细胞的萎缩或细胞因子分泌功能异常有关。无论是体外培养的原代RPE还是多能干细胞诱导而来的RPE，都存在细胞因子分泌不足的问题。本专利技术的旨在提供促进RPE细胞分泌细胞因子的方法，并将处理后的RPE细胞移植治疗眼科及神经系统相关疾病。
[0004]虽然制备RPE细胞的来源不同，但其最终治疗方式都是将体外获得的外源RPE细胞植入患者视网膜黄斑区，以替代或补充患者萎缩受损的自身RPE细胞，恢复RPE细胞的生理功能，改善患者视力。外源RPE细胞治疗视网膜变性的机制包括：植入的外源RPE细胞能够分泌多种细胞因子，如转化生长因子(TGF)
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β、胰岛素样生长因子(IGF)
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1、睫毛神经营养因子(CNTF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、色素上皮衍生因子(PEDF)等，部分细胞因子进入宿主残存的感光细胞，发挥保护作用。同时RPE细胞可以分泌多巴胺，因此也可以达到改善神经系统疾病的目的。
[0005]目前已有技术主要是通过电转、脂质体或者病毒等方式基因改造RPE细胞，引入外源细胞因子相关基因，强制性表达RPE相关细胞因子，从而达到促进RPE的目的；但是基因改造的方式，改变了RPE的遗传信息，限制了RPE细胞在临床上的使用。

技术实现思路

[0006]为解决以上技术问题，本专利技术提供了通过光照刺激促进RPE细胞分泌细胞因子的技术方案；通过光照刺激细胞因子的分泌，不需要改变RPE细胞遗传信息，具有极高的临床使用价值。
[0007]方法
[0008]一方面，本专利技术提供了一种促进眼周细胞分泌CNTF(睫毛神经营养因子)、利用眼周细胞生产CNTF的方法，所述方法包括使用以下光照处理(也可称为“照射”)细胞：
[0009]1)全光谱LED光、
[0010]2)全光谱LED光+红光。
[0011]另一方面，本专利技术提供了一种促进眼周细胞分泌PEDF(色素上皮衍生因子)、利用眼周细胞生产PEDF的方法，所述方法包括使用以下光照处理细胞：
[0012]1)全光谱LED光、
[0013]2)红光、
[0014]3)全光谱LED光+红光。
[0015]另一方面，本专利技术提供了一种促进眼周细胞分泌多巴胺、利用眼周细胞生产多巴胺的方法，所述方法包括使用以下光照处理细胞：
[0016]1)荧光、
[0017]2)LED光(普通LED光)、
[0018]3)全光谱LED光、
[0019]4)红光、
[0020]5)全光谱LED光+红光。
[0021]优选地，本专利技术所述全光谱LED光可以是任何光照强度的，例如100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、1600、1700、1800、1900、2000(或100
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2000)Lux，如本专利技术具体实施例所使用的全光谱LED光的光照强度是500、1500Lux。
[0022]另一方面，本专利技术提供了一种抑制眼周细胞分泌CNTF的方法，所述方法包括使用红光处理眼周细胞。
[0023]另一方面，本专利技术提供了一种提高眼周细胞的细胞因子分泌量的方法，所述方法包括提高光照强度；
[0024]优选地，所述方法包括提高全光谱LED光的光照强度，例如从500Lux提高到1500Lux；
[0025]更具体的，是在体外培养眼周细胞的情况下，提高全光谱LED光的光照强度。
[0026]优选地，所述细胞因子包括转化生长因子(TGF)
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β、胰岛素样生长因子(IGF)
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1、睫毛神经营养因子(CNTF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、色素上皮衍生因子(PEDF)、多巴胺等。
[0027]优选地，上述方法是在体外培养细胞中进行的。
[0028]优选地，本专利技术所述各种光照可以是持续光照或间断光照，具体地例如每日连续/间断光照10min、20min、30min、40min、50min、60min(即1小时)、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、1小0小时、11小时、12小时、13小时、14小时、15小时、16小时、17小时、18小时、19小时、20小时、21小时、22小时、23小时、24小时。
[0029]优选地，本专利技术所述全光谱LED光+红光的处理方式是：每日给与全光谱光和红光照射；优选地，所述红光照射是多次间断给与；更优选地，红光照射时间共60分钟。
[0030]优选地，本专利技术所述眼周细胞是视网膜细胞(或称“组成视网膜的细胞”)。
[0031]本专利技术中，术语“视网膜”即视网膜视部，其为一层柔软而透明的膜，紧贴在脉络膜内面，有感受光刺激的作用。视网膜主要由色素上皮细胞、视细胞(感光细胞)、双极细胞、节细胞、水平细胞、无长突细胞、网间细胞和Muller细胞等组成。这些细胞及其突起排列有序，可据此将视网膜自外向内分为10层。
①
色素上皮层：由单层色素上皮细胞(亦称为“视网膜色素上皮细胞”，即retinal pigment epithelial cells，RPE)构成；
②
视杆视锥层：由视杆细胞和视锥细胞的外突构成；
③
外界膜：由Muller细胞的外突末端连接而成；
④
外核层：由视杆细胞和视锥细胞的细胞体组成；
⑤
外网层：由视杆细胞和视锥细胞的内突及双极细胞的树突构成；
⑥
内核层：由双极细胞、水平细胞、无长突细胞和Muller细胞的胞体构成；
⑦
内网层：由双极细胞的轴突和无长突细胞及节细胞的树突构成；
⑧
节细胞层：由节细胞的胞体
组成；
⑨
神经纤维层：由节细胞的轴突组成；
⑩
内界膜：为M
ü
ller细胞的内突末端连接而成。
[0032]本专利技术所述视锥细胞、视杆细胞可统称为“感光细胞”，所述“感光细胞”还可称为视细胞、感受细胞或光感受器。
[0033]优选地，本专利技术所述视网膜色素上皮细胞(retinal pigment 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种促进眼周细胞分泌睫毛神经营养因子、利用眼周细胞生产睫毛神经营养因子的方法，所述方法包括使用以下光照处理细胞：1)全光谱LED光、2)全光谱LED光+红光；优选地，所述全光谱LED光的光照强度是100
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2000Lux；优选地，所述全光谱LED光的光照强度是500
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1500Lux。2.一种促进眼周细胞分泌色素上皮衍生因子、利用眼周细胞生产色素上皮衍生因子的方法，所述方法包括使用以下光照处理细胞：1)全光谱LED光、2)红光、3)全光谱LED光+红光；优选地，所述全光谱LED光的光照强度是100
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2000Lux；优选地，所述全光谱LED光的光照强度是500
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1500Lux。3.一种促进眼周细胞分泌多巴胺、利用眼周细胞生产多巴胺的方法，所述方法包括使用以下光照处理细胞：1)荧光、2)普通LED光、3)全光谱LED光、4)红光、5)全光谱LED光+红光；优选地，所述全光谱LED光的光照强度是100
‑
2000Lux；优选地，所述全光谱LED光的光照强度是500
‑
1500Lux。4.一种抑制眼周细胞分泌CNTF的方法，所述方法包括使用红光处理细胞。5.一种提高眼周细胞的细胞因子分泌量的方法，所述方法包括提高光照强度；优选地，所述方法包括提高全光谱LED光的光照强度；优选地，是在体外培养眼周细胞的情况下，提高全光谱LED光的光照强度；更优选地，光照强度从500Lux提高到1500Lux。6.如权利要求1
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5任意所述的方法，其特征在于，所述眼周细胞是视网膜细胞；所述视网膜细胞包括：色素上皮细胞、感光细胞、双极细胞、节细胞、水平细胞、无长突细胞、网间细胞和Muller细胞；所述感光细胞包括视锥细胞、视杆细胞；优选地，所述眼周细胞是色素上皮细胞；优选地，所述色素上皮细胞是由干细胞分化而来；优选地，所述干细胞是多能干细胞；优选地，所述多能干细胞包括ESC、iPSC...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴理达，顾雨春，
申请(专利权)人：北京呈诺医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：