一种识别HPV抗原的TCR制造技术

本发明专利技术提供一种T细胞受体，其能够与HPV16 E6抗原短肽复合物TIHDIILECV

【技术实现步骤摘要】
一种识别HPV抗原的TCR


[0001]本专利技术涉及生物
，更具体地涉及能够识别衍生自HPV16 E6蛋白多肽的T细胞受体(T cell receptor,TCR)及其制备和用途。

技术介绍

[0002]仅仅有两种类型的分子能够以特异性的方式识别抗原。其中一种是免疫球蛋白或抗体；另一种是T细胞受体(TCR)。TCR是由α链/β链或者γ链/δ链以异二聚体形式存在的细胞膜表面的糖蛋白，在人类中，TCR中95％的T细胞由α链和β链组成，分别由TRA和TRB编码。TCR对pMHC(抗原肽-主要组织相容性复合体)的识别涉及到两种结合：TCR与MHC分子的结合以及TCR与多肽抗原的结合。TCR上的结合面来自6个区域:TCRα、β链上各自的CDRl、CDR2以及CDR3。CDR1与CDR2主要结合相对保守的MHC分子，CDR3则主要结合多变的抗原多肽。这种结合模式可以好地保证TCR特异地结合MHC分子，并能识别多变的抗原。(Chinese Journal of Cell Biology2011,33(9):955-963)。其中以CDR3的变异最大，直接决定了TCR的抗原结合特异性。在免疫系统中，通过抗原特异性的TCR与pMHC复合物的结合引发T细胞与抗原呈递细胞(APC)直接的物理接触，然后T细胞及APC两者的其他细胞膜表面分子就发生相互作用，这就引起了一系列后续的细胞信号传递和其他生理反应，从而使得不同抗原特异性的T细胞对其靶细胞发挥免疫效应。
[0003]E6基因为人乳头状瘤病毒(HPV)基因组的早期区基因之一，位于HPV基因的83～559碱基上，编码E6蛋白。在世界范围内子宫颈癌中最流行的类型为HPV16,占检测病例的50％～60％(Acta Acad Med Sin,2007,29(5):678-684)；而E6蛋白是高危型HPV感染宫颈上皮细胞后编码的两种重要致瘤蛋白之一([J].江苏大学学报(医学版)，2018，28(2):135－139.)。HPV16 E6还会引起头颈部肿瘤(中国耳鼻咽喉颅底外科杂志，2017，23(6):594－598)、结膜上皮内瘤变(CIN)以及角结膜侵袭性鳞状细胞癌(SCC)等疾病。TIHDIILECV是HPV16 E6蛋白的表位肽，是HPV16E6相关疾病治疗的一种靶标。
[0004]本专利技术致力于开发能够结合TIHDIILECV-HLA A0201复合物且对肿瘤的治疗具有很高的应用价值的TCR。例如，能够靶向该肿瘤细胞标记的TCR可用于将细胞毒性剂或免疫刺激剂递送到靶细胞，或被转化入T细胞，使表达该TCR的T细胞能够破坏肿瘤细胞，以便在被称为过继免疫治疗的治疗过程中给予患者。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种特异性识别并结合TIHDIILECV-HLA A0201复合物的TCR。本专利技术的再一目的是提供一种上述类型TCR的制备方法及上述类型TCR的用途。
[0006]本专利技术的第一方面，提供了一种TCR，所述TCR具有结合TIHDIILECV-HLA A0201复合物的活性，并且所述TCR的α链可变域为与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列有至少90％的序列同源性的氨基酸序列；和所述TCR的β链可变域为与SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列有至少90％的序列同源性的氨基酸序列。
[0007]在另一优选例中，所述TCR的α链可变域包含与SEQ ID NO:1所示的序列有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同源性的氨基酸序列。
[0008]在另一优选例中，所述TCR的β链可变域为与SEQ ID NO:5所示的序列有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同源性的氨基酸序列。
[0009]在另一优选例中，本专利技术所述TCR是人源的。
[0010]在另一优选例中，所述TCR为αβ异质二聚TCR，优选地，所述TCR具有α链恒定区序列TRAC*01和β链恒定区序列TRBC1*01或TRBC2*01。
[0011]在另一优选例中，所述TCR的α与β链的恒定区分别为鼠源的α与β链的恒定区。
[0012]在另一优选例中，所述TCR是可溶的。
[0013]在另一优选例中，所述TCRα链可变域包含3个CDR区,和所述TCRβ链可变域包含3个CDR区，其中所述TCRβ链可变域的3个CDR区的氨基酸序列为：
[0014]βCDR1-MNHNS(SEQ ID NO:17)
[0015]βCDR2-SASEGT(SEQ ID NO:18)
[0016]βCDR3-ASGPWGSSGNTIY(SEQ ID NO:19)。
[0017]在另一优选例中，所述TCR的α链可变域为与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列有至少95％的序列同源性的氨基酸序列；和所述TCR的β链可变域为与SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列有至少95％的序列同源性的氨基酸序列。
[0018]在另一优选例中，所述TCR的β链可变域的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。
[0019]在另一优选例中，所述TCR的α链可变域为与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列有至少95％的序列同源性的氨基酸序列；和所述TCRβ链可变域的3个CDR区的氨基酸序列为：
[0020]βCDR1-MNHNS(SEQ ID NO:17)
[0021]βCDR2-SASEGT(SEQ ID NO:18)
[0022]βCDR3-ASGPWGSSGNTIY(SEQ ID NO:19)。
[0023]在另一优选例中，所述TCR的α链可变域为与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列有至少95％的序列同源性的氨基酸序列；和所述TCR的β链可变域的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。
[0024]在另一优选例中，所述TCRα链可变域包含3个CDR区,和所述TCRβ链可变域包含3个CDR区,其中所述TCRα链可变域中CDR3α的氨基酸序列选自：ALRAGANNLF(SEQ ID NO:22)、ALRAGANLPV(SEQ ID NO:23)、ALRAGANTPI(SEQ ID NO:24)、ALRAGAWPMK(SEQ ID NO:25)。
[0025]在另一优选例中，所述TCRα链可变域包含3个CDR区,和所述TCRβ链可变域包含3个CDR区,其中所述TCRα链可变域中CDR1α的氨基酸序列为：TRDTTYY；和CDR2α的氨基酸序列为：RNSFDEQN；和CDR3α的氨基酸序列选自：ALRAGANNLF(SEQ ID NO:22)、ALRAGANLPV(SEQ ID NO:23)、ALRAGANTPI(SEQ ID NO:24)、ALRAGAWPMK(SEQ ID NO:25)。
[0026]在另一优选例中，所述TCRα链可变域的3个CDR区的序列如下，
[0027]CDR1α：TRDTT本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种T细胞受体(TCR)，所述T细胞受体包含TCRα链可变域和TCRβ链可变域，其特征在于，其具有结合TIHDIILECV-HLA A0201复合物的活性，并且所述TCRα链可变域的氨基酸序列与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列有至少90％的序列同源性和所述TCRβ链可变域的氨基酸序列与SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列有至少90％的序列同源性。2.一种多价TCR复合物，其特征在于，包含至少两个TCR分子，并且其中的至少一个TCR分子为权利要求1所述的TCR。3.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包含编码权利要求1中所述的TCR或权利要求2中所述的TCR复合物的核酸序列或其互补序列。4.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求3中所述的核酸分子。5.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞中含有权利要求4中所述的载体或染色体中整合有外源的权利要求3中所述的核酸分子。6.一种分离的细胞，其特征在于，所述细...

【专利技术属性】
技术研发人员：李懿，杨东雪，陈少沛，孙含丽，
申请(专利权)人：香雪生命科学技术广东有限公司，
类型：发明
国别省市：