一种用于防治新冠肺炎的SARS-CoV-2卵黄中和抗体IgY喷雾剂制造技术

一种用于防治新冠肺炎的SARS

【技术实现步骤摘要】
一种用于防治新冠肺炎的SARS-CoV-2卵黄中和抗体IgY喷雾剂


[0001]本专利技术属于防疫领域，具体涉及一种用于防治新冠肺炎的SARS-CoV-2卵黄中和抗体IgY喷雾剂。

技术介绍

[0002]2019年爆发了由新型冠状病毒SARS-CoV-2(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2，简称novel coronavirus，SARS-CoV-2，简称新冠病毒)感染引起的急性严重性呼吸道综合征流行性高度传染病，目前已波及全世界，中国境内感染者超过8万，死亡5000多人，国外已感染近4000多万人，死亡超过100万人。由于目前没有特效药，因此，研制针对新型冠状病毒的特效药非常必要。
[0003]在SARS-CoV-2中，病毒表面的S蛋白介导受体识别和膜融合。在病毒感染过程中，三聚体S蛋白被切割成S1和S2亚基，S1蛋白的受体结合域(RBD)直接与靶细胞表面受体ACE2的肽酶域(peptidase domain，PD)结合，而S2负责膜融合，因此，该病毒能够特异性的识别并结合到人细胞表面受体，侵入人体细胞，造成人的感染。
[0004]研制新冠疫苗需要做I，II，III期临床试验，周期长，最快也需要3-5年时间。新冠病毒属于RNA单链病毒，容易变异，新冠病毒基因组30000多个碱基，目前已突变1000多个位点，若研制疫苗的抗原表位发生突变，则疫苗就失效了，因此，疫苗研制的速度赶不上基因突变的速度。
[0005]中和抗体能够中和病毒，使病毒失去感染性达到防治作用，若能够研制出新型冠状病毒的中和抗体，就能够中和新型冠状病毒，使病毒不能结合到细胞表面受体，阻断病毒的感染，从而达到预防和治疗新型冠状病毒感染引起的疾病作用。
[0006]目前，新型冠状病毒感染者恢复期的康复者血浆也含有新型冠状病毒的中和抗体，能够治疗新型冠状病毒感染者，但由于血浆中可能含有其它的病原体，会引起其它的传染病，又由于康复者血浆来源少，难以满足庞大病人治疗的需求。
[0007]许多科学家转而研制新冠病毒人源化中和抗体IgG，但人源化中和抗体IgG与病毒结合后有时会产生“抗体依赖的增强作用(ADE)”，协助病毒进入靶细胞，提高感染率，导致病毒致死率增加几十倍甚至几百倍。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的在于提供一种用于防治新冠肺炎的SARS-CoV-2卵黄中和抗体IgY喷雾剂，中和病毒，阻断新冠病毒的感染，抑杀病毒，起到预防及治疗新冠肺炎的作用，作用方式安全、容易大规模生产，不会产生免疫排斥反应，开创一种安全简便、卫生有效、经济的个性化防疫方式应对疫情。
[0009]为了达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0010]提供新冠病毒卵黄中和抗体IgY在制备抗新冠病毒SARS-CoV-2制剂中的应用。
[0011]进一步，所述新冠病毒卵黄中和抗体IgY为多克隆抗体，包括新冠病毒S1蛋白受体结合域RBD的3个表位的抗体或S2蛋白抗体。
[0012]又，所述新冠病毒卵黄中和抗体IgY中，包括S1蛋白的受体结合域RBD的抗体，其重链为67-70KD，轻链为22-30KD。
[0013]又，所述新冠病毒卵黄中和抗体IgY的制备方法为：以新冠病毒的S蛋白、S1蛋白、RBD蛋白或S2蛋白免疫产蛋母鸡，每次取抗原50-250μg，对产蛋母鸡进行肌肉注射，免疫三次，每次间隔时间为7-42天；用蛋黄筛分离免疫母鸡产蛋的蛋黄，制备为蛋黄液，用1MolHCl调至pH5.1-6.0，2-8℃静置沉淀4-5小时，以8000-12000rpm转速离心20-30分钟，弃沉淀，上清加入1-2％正辛酸沉淀去除杂蛋白和卵磷脂纯化，得到所述新冠病毒卵黄中和抗体IgY，含量为2-6mg/ml，纯度40-50％。
[0014]一种抗新冠病毒SARS-CoV-2卵黄中和抗体IgY制剂，包括：所述新冠病毒卵黄中和抗体IgY、稳定剂、抑菌剂和防腐剂。
[0015]优选地，所述抑菌剂为乳酸链球菌素NISIN、苯扎溴安、溶菌酶中的一种以上；所述防腐剂为氯已定、山梨酸钾中的一种或两种。
[0016]优选地，所述新冠病毒卵黄中和抗体IgY制剂为喷雾剂、滴眼剂、口服胶囊或口服含片。
[0017]进一步，所述喷雾剂中包括：新冠病毒卵黄中和抗体IgY 0.1-0.3％、溶菌酶0.1-0.9％、乳酸链球菌素(NISIN)0.005-0.02％、甘油0.5-20％、氯已定0.01-0.05％和蒸馏水79.8-98.57％。
[0018]又，所述滴眼剂中包括：卵黄中和抗体IgY 0.1-0.3％、溶菌酶0.1-0.9％、EDTA-2Na 0.01-0.1％、NaCl 0.1-0.5％、苯扎溴安0.01-0.05％、乳酸链球菌素(NISIN)0.005-0.02％、甘油0.5-20％和蒸馏水72.4-96.29％。
[0019]优选地，所述口服含片中包括：卵黄中和抗体IgY 0.01-0.03％、柠檬酸1-5％、木糖醇10-30％、淀粉40-50％、山梨酸钾0.05-0.5％和蒸馏水48.99-14.97％。
[0020]又，所述口服胶囊中包括：卵黄中和抗体IgY 0.5-1.6％、乳酸链球菌素0.005-0.02％、壳聚糖0.1-0.4％、CaCl
2 0.5-3％、海藻酸钠1-3％和蒸馏水97.895-91.98％。
[0021]在新冠病毒SARS-CoV-2中，病毒表面的S蛋白是糖基化蛋白，须用具有糖基化表达系统才能表达出糖基化的S蛋白，才能保持天然结构，才能有活性，才能免疫出中和抗体。大肠杆菌表达系统无糖基化系统，酵母表达系统糖基化系统不完善，昆虫表达系统也不完善，本专利技术选择含有完善糖基化系统的哺乳细胞表达S、S1、S2、RBD蛋白，表达出的糖基化S蛋白保持天然结构，有活性，能免疫出卵黄中和抗体。
[0022]将本专利技术的抗突变新冠病毒卵黄中和抗体IgY喷剂喷在鼻腔和口腔，吸入呼吸道，可中和新冠病毒SARS-CoV-2，将其雾化吸入肺内可应急治疗新冠肺炎。
[0023]本专利技术的抗新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄中和抗体IgY制剂中，抗体IgY是蛋白质，浓度高，乳酸链球菌素(NISIN)的作用就象一个表面活性剂，它对细菌的营养细胞及孢子都有作用。NISIN对营养细胞的主要作用点是细胞质膜，抑制细胞壁中肽聚糖的生物合成，从而使细胞壁质膜和磷脂化合物合成受阻，并造成细胞膜内容物外泄，严重地引起细胞裂解，在万分之三到万分之五的浓度既有明显抑菌作用，对芽孢的作用是在孢子出现膨胀的起始阶段抑制其发芽。NISIN主要抑制大部分革兰氏阳性菌，特别是细菌的芽孢，还能抑制葡萄
球菌属、链球菌属、小球菌属和乳杆菌属的某些菌种，抑制大部分梭菌属和芽孢杆菌属的芽孢，避免在制剂的生产过程中污染菌，防止产品腐败变质。
[0024]抗体IgY制剂在生产过程中需防止染菌，本专利技术中的抗体IgY是蛋白质，浓度很高，喷雾剂的生产本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.新冠病毒卵黄中和抗体IgY在制备抗新冠病毒SARS-CoV-2制剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述新冠病毒卵黄中和抗体IgY为多克隆抗体，包括新冠病毒S1蛋白受体结合域RBD3个表位的抗体或S2蛋白抗体。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述新冠病毒卵黄中和抗体IgY的制备过程为：以新冠病毒的S蛋白、S1蛋白、RBD蛋白或S2蛋白免疫产蛋母鸡，每次取抗原50-250μg，对产蛋母鸡进行肌肉注射，免疫三次，每次间隔时间为7-42天；用蛋黄筛分离免疫母鸡产蛋的蛋黄，制备为蛋黄液，用1MolHCl调至pH5.1-6.0，2-8℃静置沉淀4-5小时，以8000-12000rpm转速离心20-30分钟，弃沉淀，上清加入1-2％正辛酸沉淀去除杂蛋白和卵磷脂纯化，得到所述新冠病毒卵黄中和抗体IgY，含量为2-6mg/ml，纯度40-50％。4.一种抗新冠病毒SARS-CoV-2卵黄中和抗体IgY制剂，包括：权利要求2所述的新冠病毒卵黄中和抗体IgY、稳定剂、抑菌剂和防腐剂。5.根据权利要求4所述的制剂，其特征在于，所述抑菌剂为NISIN、苯扎溴安、溶菌酶中的一种以上；所述防腐剂为氯已定、山梨酸钾中的一种或两种。6.根据权利要求4或5所述的制剂，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵凯，
申请(专利权)人：上海博满生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：