一种表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞及其应用，所述表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞为将含磷酸转移酶基因的表达质粒与含非核糖体肽合成酶基因的表达质粒转入宿主细胞中得到。本发明专利技术通过构建重组基因工程菌，使用生物酶催化的方法制备脱羧肌肽，比现有化学合成法更加绿色环保。本发明专利技术的方法通过全细胞催化法制备脱羧肌肽，是生物法制备脱羧肌肽的首次报道。生物法制备脱羧肌肽的首次报道。

【技术实现步骤摘要】
一种表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞及其应用
(一)

[0001]本专利技术涉及一种制备脱羧肌肽的方法，具体涉及一种表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞及其应用。
(二)
技术介绍

[0002]脱羧肌肽(Carcinine)，学名为β
‑
丙氨酰
‑
L
‑
组氨(β
‑
alanyl histamine)，是一种由β
‑
丙氨酸和组胺构成的咪唑类二肽。1975年，脱羧肌肽最早在甲壳类动物体内被发现，随后在一些哺乳动物心脏中也有发现。相比于肌肽、维生素C和茶多酚等，脱羧肌肽抗氧化效果更强，同时还具备抗糖化、隔离紫外线、对抗皮肤光老化、改善肌肤皱纹和晒后修复等功效。此外，还具有显著的“逆转”功能，有效逆转皮肤的糖化、氧化作用。而且代谢速度慢，结构稳定，可以更有效的发挥功能。相关实验表明，使用品牌HMA的脱羧肌肽精华一至两个肌肤周期，黄皮粗糙降低30％，肌肤紧致度提升24％，润弹细腻增加37％；志愿者口服脱羧肌肽显著增加了皮肤生物表面的抗氧化潜力，是目前化妆品领域极本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞。2.如权利要求1所述的表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞，其特征在于：所述表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞为将含磷酸转移酶基因的表达质粒与含非核糖体肽合成酶基因的表达质粒转入宿主细胞中得到。3.如权利要求2所述的表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞，其特征在于：所述宿主细胞为E.coli BL21(DE3)。4.如权利要求2所述的表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞，其特征在于：所述含磷酸转移酶基因的表达质粒为将如SEQ ID NO：1所示的磷酸转移酶基因与pACYCDuet
‑
1质粒连接得到；所述含非核糖体肽合成酶基因的表达质粒为将如SEQ ID NO：2所示的非核糖体肽合成酶基因与pET28a质粒连接得到。5.如权利要求2所述的表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞，其特征在于：所述含磷酸转移酶基因的表达质粒按以下方法构建：利用引物对Bsusfp
‑
F和Bsusfp
‑
R对枯草芽孢杆菌的基因组进行PCR扩增，得到Bsusfp基因；Bsusfp
‑
F 5
’‑3’
:ACCATCATCACCACAGCCAG ATGAAGATTTACGGAATTTATATGGABsusfp
‑
R 5
’‑3’
:GTGGCAGCAGCCTAGGTTAA TTATAAAAGCTCTTCGTACGAGACC利用引物对pACYC
‑
F和pACYC
‑
R对pACYCDuet
‑
1质粒进行反向PCR，得到线性化pACYC质粒；pACYC
‑
F 5
’‑3’
:TTAACCTAGGCTGCTGCCACpACYC
‑
R 5
’‑3’
:CTGGCTGTGGTGATGATGGT利用一步克隆试剂盒(ClonExpress II One Step Cloning Kit)将所述Bsusfp基因和所述线性化pACYCDuet
‑
1质粒连接，获得插入Bs...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵嫚，成浩，刘薇，柳志强，郑裕国，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：