生产3-岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种生产3

【技术实现步骤摘要】
生产3-岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用


[0001]本专利技术属于枯草芽孢杆菌重组菌株构建
，具体涉及一种生产3-岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用。

技术介绍

[0002]母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMOs)在母乳中含量高达15g/L，是母乳中乳糖和脂类之后第三丰富的组分。其中，包括2
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FL(2
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岩藻糖基乳糖)和3-FL(3-岩藻糖基乳糖)在内的岩藻糖基化寡糖是母乳所独有的。3-FL可以抑制病原菌在上皮细胞上的附着，从而有预防感染疾病的作用，同时，配方奶粉中添加3-FL可以减少婴儿腹泻症状。因此，3-FL兼具医学和营养学价值。
[0003]和2
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FL一样，3-FL可以通过在人乳中分离出来，也可以通过化学手段或酶催化法合成。近年来有文献报道可以通过代谢工程和发酵工程技术，利用微生物生产2
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FL，具有工业化的潜力。3-FL可以以GDP-L-岩藻糖和乳糖为底物，在α-1,3-岩本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.生产3-岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于：所述重组枯草芽孢杆菌为重组枯草芽孢杆菌1643FL、重组枯草芽孢杆菌1643FL-fcoA2、或者重组枯草芽孢杆菌1643FL-fcoA1；所述重组枯草芽孢杆菌1643FL通过在枯草芽孢杆菌的manA位点整合编码果糖6-磷酸异构酶、磷酸甘露糖变位酶、甘露糖-1-磷酸鸟苷基转移酶的融合基因片段，以及在xylA-xylB位点整合编码GDP-甘露糖脱水酶、GDP-L-岩藻糖合成酶、α-1,3岩藻糖基转移酶的融合基因片段获得；所述重组枯草芽孢杆菌1643FL-fcoA2通过在重组枯草芽孢杆菌1643FL的fcoA2位点整合编码乳糖渗透酶的基因片段获得；所述重组枯草芽孢杆菌1643FL-fcoA1通过在重组枯草芽孢杆菌1643FL的fcoA1位点整合编码乳糖渗透酶的基因片段获得。2.如权利要求1所述的生产3-岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于：所述编码果糖6-磷酸异构酶、磷酸甘露糖变位酶、甘露糖-1-磷酸鸟苷基转移酶的融合基因片段为SEQ ID NO：1所示的序列，或者是与SEQ ID NO：1具有85％以上同源性且具有相同功能的序列；所述编码GDP-甘露糖脱水酶、GDP-L-岩藻糖合成酶、α-1,3岩藻糖基转移酶的融合基因片段为SEQ ID NO：2所示的序列，或者是与SEQ ID NO：2具有85％以上同源性且具有相同功能的序列。3.如权利要求1所述的生产3-岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于：所述在重组枯草芽孢杆菌1643FL的fcoA2位点整合的编码乳糖渗透酶的基因片段是SEQ ID NO：3所示的序列或者与SEQ ID NO：3具有85％以上同源性且具有相同功能的序列；在重组枯草芽孢杆菌1643FL的fcoA1位点整合的编码乳糖渗透酶的基因片段是SEQ ID NO：4所示的序列或者与SEQ ID NO：4具有85％以上同源性且具有相同功能的序列。4.如权利要求1所述的生产3-岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌ATCC 6051a。5.权利要求1-4任一项所述的重组枯草芽孢杆菌的构建方法，包括如...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙俊松，纪明华，谢雨康，陈艾，史吉平，
申请(专利权)人：中国科学院上海高等研究院，
类型：发明
国别省市：