漆酶基因表达盒、漆酶光学生物传感器平台及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了本发明专利技术提供了一种漆酶基因表达盒、漆酶光学生物传感器平台及其构建方法和应用，所述表达盒包括依次连接的以下表达元件：（a）里氏木霉来源的Pcbh1启动子；（b）外源漆酶编码基因；以及（c）里氏木霉来源的Tcbh1终止子。本发明专利技术的有益效果是：本发明专利技术的AALB平台通过构建受Pcbh1启动子调控的平菇来源的漆酶基因表达盒，实现对转录因子变体的灵敏、经济且高效的筛选；本发明专利技术在里氏木霉基因组ACE1位点整合了高活性的外源漆酶基因，从而放大转录因子的调控效应，使漆酶表达水平能够直观反映转录因子的转录活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，涉及一种漆酶基因表达盒、漆酶光学生物传感器平台及其构建方法和应用，具体涉及一种基于吸光度激活的漆酶基因表达盒、漆酶光学生物传感器平台及其构建方法和应用，该漆酶光学生物传感器平台可以高通量筛选里氏木霉中转录因子以及评估水稻秸秆酶解效率。

技术介绍

1、里氏木霉（trichoderma reesei）是一种模式丝状真菌，以其卓越的纤维素水解酶生产能力而广受关注，这些酶在纤维素原料的降解过程中发挥关键作用。纤维素酶的高效分泌使里氏木霉在生物燃料、造纸、纺织以及食品工业等多个领域展现出广泛的应用前景。尽管近年来基因工程技术的进步显著提升了里氏木霉的酶产能力，但仍需进一步解析其转录调控网络，以实现更高效的纤维素酶合成和分泌。里氏木霉纤维素酶的表达受到多个转录因子的严格调控，这些转录因子通过结合纤维素酶基因启动子的特定dna序列调节基因表达。转录因子通常包含dna结合域和转录激活域，前者负责靶向特定启动子区域，后者则介导转录调控。xyr1是关键的正向调控因子，可识别并结合启动子中的保守序列5′-ggc(a/t)-3′，从而激活纤维素酶基因表达。相反本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种漆酶基因表达盒，其特征在于，包括依次连接的以下表达元件:（a）里氏木霉来源的Pcbh1启动子；（b）外源漆酶编码基因；以及（c）里氏木霉来源的Tcbh1终止子。

2.根据权利要求1所述的一种漆酶基因表达盒，其特征在于，所述外源漆酶编码基因是平菇来源的漆酶基因，其核苷酸序列的GenBank登记号为AQX45445.1。

3.一种重组里氏木霉菌株，其特征在于：所述菌株的基因组的ACE1基因位点整合有权利要求1或2所述的漆酶基因表达盒。

4.一种重组里氏木霉菌株的构建方法，其特征在于，包括：

5.根据权利要求4所述重组里氏木霉菌株的构建方...

【技术特征摘要】

1.一种漆酶基因表达盒，其特征在于，包括依次连接的以下表达元件:（a）里氏木霉来源的pcbh1启动子；（b）外源漆酶编码基因；以及（c）里氏木霉来源的tcbh1终止子。

2.根据权利要求1所述的一种漆酶基因表达盒，其特征在于，所述外源漆酶编码基因是平菇来源的漆酶基因，其核苷酸序列的genbank登记号为aqx45445.1。

3.一种重组里氏木霉菌株，其特征在于：所述菌株的基因组的ace1基因位点整合有权利要求1或2所述的漆酶基因表达盒。

4.一种重组里氏木霉菌株的构建方法，其特征在于，包括：

5.根据权利要求4所述重组里氏木霉菌株的构建方法，其特征在于，所述引物对ace1-5’f/ace1-5’r的核苷酸序列如seq id no:3和seq id no:4所示；所述引物对ace1-3’f/ace1-3’r...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏颖，林欣大，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：