一株铜绿假单胞菌及其构建方法与应用技术

本发明专利技术公开了一株铜绿假单胞菌及其构建方法与应用。本发明专利技术公开一株铜绿假单胞菌重组菌，其过表达NAD+合成酶。本发明专利技术为微生物利用甘油发酵生产鼠李糖脂提供了新的开发策略。甘油发酵生产鼠李糖脂提供了新的开发策略。

【技术实现步骤摘要】
一株铜绿假单胞菌及其构建方法与应用


[0001]本专利技术属于基因
，涉及一株铜绿假单胞菌及其构建方法与应用。

技术介绍

[0002]鼠李糖脂是由假单胞菌产生的一种糖脂类的阴离子表面活性剂，它具有和化学表面活性剂相同的乳化、润湿、发泡等性能，同时兼具健康无毒、绿色环保等特性，是目前研究最成熟，最深入的生物表面活性剂之一。在石油开采、污水污泥治理、土壤修复、农业生产、日用洗涤产品、化妆品、食品医药等领域均具有广泛的应用。
[0003]NADH(还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)，在维持细胞生长、分化和能量代谢以及细胞保护方面起着重要作用，而调节微生物胞内NADH的浓度，可以定向的提高微生物细胞整体代谢水平，增加对碳源的消耗，实现发酵产能的提高。
[0004]CN201510100736.0孙叶芳等人通过过表达鼠李糖脂合成酶RhlAB，鼠李糖脂产量提高接近10倍，CN201711021178.4朱坤等人通过分子手段降低铜绿假单胞菌多糖合成，提高鼠李糖脂合成水平，最终鼠李糖脂产量提高93％。目前尚无铜绿假单胞菌中nadE基因与鼠李糖脂本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株铜绿假单胞菌重组菌，其过表达NAD+合成酶。2.根据权利要求1所述的铜绿假单胞菌重组菌，其特征在于：所述NAD+合成酶为如下a)或b)所示的蛋白质：a)SEQ ID NO:4所示的蛋白质；b)将SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白质。3.根据权利要求1或2所述的铜绿假单胞菌重组菌，其特征在于：所述过表达NAD+合成酶是通过在出发菌株中过表达nadE基因实现的；优选地，所述nadE基因为如下1)或2)或3)所示的基因：1)SEQ ID NO:3所示的DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1或2中所述的NAD+合成酶的DNA分子；3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1或2中所述的NAD+合成酶的DNA分子。4.根据权利要求3所述的铜绿假单胞菌重组菌，其特征在于：所述出发菌株为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)KT1115，其保藏编号为CCTCC M2016686。5.权利要求1
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4任一项所述的铜绿假单胞菌重组菌的构建方法，包括在出发菌株中过表达NAD+合成酶。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述N...

【专利技术属性】
技术研发人员：张稳，王竞辉，黄真真，杨付伟，姜西娟，石森，孔令晓，黎源，
申请(专利权)人：万华化学集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：