Reg4抗菌肽治疗铜绿假单胞菌感染性肺炎的应用制造技术

本发明专利技术提供了Reg4抗菌肽治疗铜绿假单胞菌感染性肺炎的应用。菌感染性肺炎的应用。菌感染性肺炎的应用。

【技术实现步骤摘要】
Reg4抗菌肽治疗铜绿假单胞菌感染性肺炎的应用


[0001]本专利技术涉及新药物用途领域，具体地，涉及Reg4抗菌肽治疗铜绿假单胞菌感染性肺炎的应用。

技术介绍

[0002]铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PAO1)又称绿脓杆菌，属于假单胞菌属，是一种单向运动型的革兰氏阴性机会致病菌，分布在各种环境和生物中，如土壤、水、植物和动物。
[0003]在临床上，PAO1是医院内获得性感染和呼吸道感染的主要致病菌之一，能够引发患者呼吸道、泌尿道和烧伤部位的急性和慢性感染，导致严重的发病率和死亡率。特别是在伴有基础疾病如癌症、囊性纤维化、呼吸机相关性肺炎、或其他免疫缺陷患者中会导致相当高的感染发生率甚至死亡率。
[0004]铜绿假单胞杆菌是囊性纤维化病人发病和死亡的主要原因之一。研究显示， PAO1是医院获得性肺炎(hospital
‑
acquired pneumonia,HAP)的第二大病因，占14％
‑
16％。
[0005]目前PAO1感染主要的治疗方案是抗生素和支持治疗。但近年来，由于抗生素的过度滥用，已经对多种抗生素表现出耐药性，这严重限制了可用于治疗PAO1 感染患者的治疗方案。一旦患者感染泛耐药PA01菌株，即使更换不同的抗生素，治疗效果均非常有限。碳青霉烯类抗生素，包括亚胺培南和美罗培南等，是治疗革兰氏阴性菌感染的最后手段。然而情况不容乐观，据中国细菌耐药监测网监测统计：在2019年，从中国三级医院临床分离的铜绿假单胞菌中有27.5％的菌株对亚胺培南类抗生素产生抗性。新型抗生素开发周期较长，且新型抗生素不能有效解决PAO1耐药问题。因此，目前急需开发新的有效非抗生素治疗PAO1 感染策略控制和治疗多重耐药菌引起的顽固性感染。

技术实现思路

[0006]本专利技术旨在克服上述缺陷，提供了一种抗生素的理想代替品，即、Reg4抗菌肽。
[0007]本专利技术提供了一种活性成分的用途,其特征在于:
[0008]上述活性成分为:Reg4蛋白；
[0009]Reg4蛋白如SEQ ID NO.1所示：
[0010][0011]上述用途包括:用于制备治疗或缓解PAO1感染症状的药物。
[0012]进一步地，本专利技术提供的一种活性成分的用途,其特征还在于:
[0013]上述用途还包括如下用途的至少一种:
[0014]用途A.用于制备治疗和缓解由PAO1诱导的肺部炎症反应的药物；
[0015]用途B.用于制备治疗和缓解由PAO1引起的肺脏损伤的药物。
[0016]进一步地，本专利技术提供的一种活性成分的用途,其特征还在于:
[0017]上述用途还包括:用于制备治疗和缓解由PAO1感染导致的体重丢失病症的药物。
[0018]进一步地，本专利技术提供的一种活性成分的用途,其特征还在于:
[0019]上述用途还包括:用于制备能与PAO1结合的药物。
[0020]进一步地，本专利技术提供的一种活性成分的用途,其特征还在于:
[0021]上述用途包括:用于制备抑制PAO1细菌生长的药物。
[0022]进一步地，本专利技术提供的一种活性成分的用途,其特征还在于:
[0023]上述用途还包括:用于制备减少PAO1粘附和侵袭肺泡上皮细胞的药物。
[0024]进一步地，本专利技术提供的一种活性成分的用途,其特征还在于:
[0025]上述用途还包括:用于制备减少PAO1在肺部定植的药物。
[0026]进一步地，本专利技术提供的一种活性成分的用途,其特征还在于:
[0027]上述用途还包括:用于制备能够抑制PAO1迁移的药物。
[0028]进一步地，本专利技术提供的一种活性成分的用途,其特征还在于:
[0029]上述用途还包括:用于制备缓解PAO1对脾脏侵袭的药物。
[0030]此外，本专利技术提供的一种PAO1慢性感染模型实验模型,其特征在于，由如下步骤建模:
[0031]S1.准备含有PAO1细菌的琼脂珠悬液；
[0032]S2.将琼脂珠注入目标模型的特定部位。
[0033]本专利技术的作用和效果：
[0034]再生基因(regenerating family，Reg)蛋白4(Reg4)是机体表达的分泌性蛋白，经本专利技术的研究表明Reg4对PAO1具有抗菌活性。
[0035]在本专利技术的研究中发现，将Reg4蛋白与PAO1共孵育，发现Reg4蛋白能显著抑制PAO1生长。
[0036]在本专利技术的研究中，通过成功建立小鼠PAO1慢性感染模型，发现Reg4能减少PA01在肺脏内的定植、改善PAO1感染小鼠肺部病理学损伤和炎症反应。
[0037]由此，本专利技术认为Reg4蛋白抗菌活性较强，具有分子质量小、抗蛋白酶降解、抗菌谱广、抗菌机制异于传统抗生素，对抗生素产生的超级耐药菌株具有较好的抗菌活性等特性，同时，优于Reg4蛋白属于人体抗菌肽中的一种，不会引起机体排异反应，且无药物残留等风险。
[0038]故而，Reg4蛋白可作为一种新型抗菌肽，替代传统抗生素，改善PAO1慢性肺部感染，成为今后治疗铜绿假单胞菌感染的最佳药物，为临床治疗PAO1感染提供新的治疗策略。
附图说明
[0039]图1.Reg4蛋白抑制PAO1生长
[0040]其中，图1A为PAO1细菌生长动力学曲线(****，PA01+PBS vs.PAO1+10μ g/ml,p<0.0001)。
[0041]图1B为Reg4蛋白和PAO1细菌共同孵育第4h OD
600
测量结果。
[0042]图1C为Reg4蛋白和PAO1细菌共同孵育第24h细菌平板涂布结果。
[0043]图1D为Reg4蛋白和PAO1细菌共同孵育第24h细菌数目测量结果。
[0044]图2.PAO1感染小鼠流程图和小鼠体重变化
[0045]其中，图2A为PA01肺部慢性感染小鼠流程图。
[0046]图2B为PA01感染后Reg表达改变。
[0047]图2C为PA01肺部感染小鼠体重变化。
[0048]图3.PAO1感染小鼠肺脏病理性变化
[0049]其中，图3A为小鼠肺脏HE染色光镜(各组放大倍数：
×
200)。
[0050]图3B为小鼠肺脏Masson染色光镜(各组放大倍数：
×
200)。
[0051]图4.小鼠肺脏和肺泡灌洗液中相关炎症因子表达水平检测
[0052]其中，图4A为ELISA检测小鼠肺泡灌洗液中Reg4含量。
[0053]图4A为ELISA检测小鼠肺泡灌洗液中IL
‑
22含量。
[0054]图4C为小鼠结肠粘膜组织中IL
‑
1β的表达水平。
[0055]图4D为小鼠结肠粘膜组织中IL
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种活性成分的用途,其特征在于:所述活性成分为:Reg4蛋白；所述用途包括:用于制备治疗或缓解PAO1感染症状的药物。2.如权利要求1所述的一种活性成分的用途,其特征在于:所述用途还包括如下用途的至少一种:用途A.用于制备治疗和缓解由PAO1诱导的肺部炎症反应的药物；用途B.用于制备治疗和缓解由PAO1引起的肺脏损伤的药物。3.如权利要求1所述的一种活性成分的用途,其特征在于:所述用途还包括:用于制备治疗和缓解由PAO1感染导致的体重丢失病症的药物。4.如权利要求1所述的一种活性成分的用途,其特征在于:所述用途还包括:用于制备能与PAO1结合的药物。5.如权利要求1所述的一种活性成分的用途,其特征在于:所述用途包括:用于...

【专利技术属性】
技术研发人员：万晓玉，肖永陶，王伟鹏，
申请(专利权)人：上海市儿科医学研究所，
类型：发明
国别省市：