一种四氢嘧啶中羟基四氢嘧啶残留的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种四氢嘧啶中羟基四氢嘧啶残留的检测方法，所述的检测方法包括：对照品溶液的制备：将羟基四氢嘧啶对照品溶解得到羟基四氢嘧啶对照品溶液；供试品溶液的制备：将四氢嘧啶供试品溶解得到供试品溶液；测定：使用高效液相分析方法对供试品溶液中的羟基四氢嘧啶残留进行检测，所述的检测方法操作简单，分离度高、分析时间短，检测限低。并且不使用甲醇、乙腈等有毒有害溶剂。乙腈等有毒有害溶剂。

【技术实现步骤摘要】
一种四氢嘧啶中羟基四氢嘧啶残留的检测方法


[0001]本专利技术涉及羟基四氢嘧啶检测的
，尤其涉及一种四氢嘧啶中羟基四氢嘧啶残留的检测方法。

技术介绍

[0002]四氢嘧啶是一种不带电荷的小分子的极性化合物，广泛存在于大多数可在极端环境下生存的中度嗜盐菌细胞内，用来平衡细胞渗透压，羟基四氢嘧啶是其常见的衍生物。
[0003]目前，四氢嘧啶的检测方法主要是采用高效液相色谱法，但是四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶是一种强烈的亲水性物质，在常规的色谱条件或常规反相色谱柱上的保留很弱，例如，在普通C18柱上保留时间极短，难以有效分离；某些氨基柱虽然能分离这两种化合物，但分离度和柱效不佳。
[0004]现有技术中，李海宇、彭彤、白林含的“UPLC
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MS法测定中度嗜盐菌中的四氢嘧啶与羟基四氢嘧啶的方法优化”一文采用超高效液相色谱，乙腈/水(V/V,1:99)UPLCHSST3色谱柱，流速0.4mL/min，检测波长204nm等色谱条件分析四氢嘧啶与羟基四氢嘧啶，该方法依赖于UPLC和特定的色谱柱，成本较高，适用性不强，且流动相使用毒性有机试剂。贺冰、陶萍、陈爱连等的“亲水相互作用色谱法测定中度嗜盐菌中四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶”一文中采用乙腈和NH4H2PO4缓冲溶液为流动相，在210nm的检测波长下，用ZIC
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HILIC柱进行分离，同时测定提取样品中的四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶。从其结果可知，该方法需采用专门用于分析极性和亲水性化合物的HILIC柱，并提升流动相中毒性有机试剂的比例到80％时，才能完全分离四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶。可见，现有技术中，四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶的分析方法并不理想。

技术实现思路

[0005]如上所述，为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种四氢嘧啶中羟基四氢嘧啶残留的检测方法，所述方法操作简便，分析时间短，检测限低，并且其使用的流动相是水，未使用甲醇、乙腈等有毒有害溶剂。
[0006]本专利技术具体技术方案如下：
[0007]1.一种四氢嘧啶中羟基四氢嘧啶残留的检测方法，其包括：
[0008]对照品溶液的制备：将羟基四氢嘧啶对照品溶解得到羟基四氢嘧啶对照品溶液；
[0009]供试品溶液的制备：将四氢嘧啶供试品溶解得到供试品溶液；
[0010]测定：使用高效液相分析方法对供试品溶液中的羟基四氢嘧啶残留进行检测。
[0011]2.根据项1所述的检测方法，其中，流动相为水。
[0012]3.根据项1或2所述的检测方法，其中，流动相的流速为0.4
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1.2mL/min，优选为0.5
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0.7mL/min。
[0013]4.根据项1
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3中任一项所述的检测方法，其中，色谱柱为C18色谱柱，优选为填料为十八烷基键合硅胶的C18柱，进一步优选为ZORBAX SB
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Aq柱。
[0014]5.根据项4所述的检测方法，其中，所述色谱柱的柱温为30
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60℃，优选为35
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45℃。
[0015]6.根据项1
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5中任一项所述的检测方法，其中，检测波长为190
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220nm，优选为210nm。
[0016]7.根据项1
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6中任一项所述的检测方法，其中，进样量为5
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100μL，优选为10
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30μL。
[0017]8.根据项1
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7中任一项所述的检测方法，其中，采用外标法测定四氢嘧啶供试品中的羟基四氢嘧啶的含量。
[0018]9.根据项1
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8中任一项所述的检测方法，其中，羟基四氢嘧啶的检测限≤1μg/g。
[0019]专利技术的效果
[0020]本专利技术所述的检测方法操作简单，分离度高、分析时间短，检测限低。并且不使用甲醇、乙腈等有毒有害溶剂。
附图说明
[0021]图1是实施例1中对照品色谱图。
[0022]图2是实施例1中供试品的色谱图。
具体实施方式
[0023]下面结合附图所描述的实施方式对本专利技术做以详细说明，其中所有附图中相同的数字表示相同的特征。虽然附图中显示了本专利技术的具体实施例，然而应当理解，可以以各种形式实现本专利技术而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本专利技术，并且能够将本专利技术的范围完整的传达给本领域的技术人员。
[0024]需要说明的是，在说明书及权利要求当中使用了某些词汇来指称特定组件。本领域技术人员应可以理解，技术人员可能会用不同名词来称呼同一个组件。本说明书及权利要求并不以名词的差异作为区分组件的方式，而是以组件在功能上的差异作为区分的准则。如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”或“包括”为开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。说明书后续描述为实施本专利技术的较佳实施方式，然而所述描述乃以说明书的一般原则为目的，并非用以限定本专利技术的范围。本专利技术的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。
[0025]由于羟基四氢嘧啶是四氢嘧啶的衍生物，其对于原料四氢嘧啶来说，其相当于杂质，需要对羟基四氢嘧啶的量进行准确分析，因此，需要建立一个专属性强、操作简便、耐用性好的分析方法实现对四氢嘧啶中的杂质量进行监测和控制。本专利技术提供了一种四氢嘧啶中羟基四氢嘧啶残留的检测方法，其包括：
[0026]对照品溶液的制备：将羟基四氢嘧啶对照品溶解得到羟基四氢嘧啶对照品溶液；
[0027]供试品溶液的制备：将四氢嘧啶供试品溶解得到供试品溶液；
[0028]测定：使用高效液相分析方法对供试品溶液中的羟基四氢嘧啶残留进行检测。
[0029]采用本专利技术所述的检测方法，操作简便，检测限低，分离度高。
[0030]在一个实施方案中，流动相为水。
[0031]通过使用流动相为水，能够将羟基四氢嘧啶和四氢嘧啶分离，即使用含有甲醇或乙腈的流动相，会使羟基四氢嘧啶和四氢嘧啶的分离度下降。
[0032]在一个实施方案中，流动相的流速为0.4
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1.2mL/min，优选为0.5
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0.7mL/min。
[0033]例如，所述流动相的流速可以为0.4mL/min、0.5mL/min、0.6mL/min、0.7mL/min、0.8mL/min、0.9mL/min、1.0mL/min、1.1mL/min、1.2mL/min等。
[0034]在一个实施方案中，色谱柱为C18色谱柱，优选为填料为十八烷基键合硅胶的C18柱，进一步优选为ZORBAX SB
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Aq柱。
[0035]本专利技术使用上述所述的色谱柱，能够将四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶分开，并且使用的流动相为水，而不使用甲醇、乙腈等有毒有害溶剂。
[0036]在一个实施方案中，所述色谱柱的柱温为30
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种四氢嘧啶中羟基四氢嘧啶残留的检测方法，其包括：对照品溶液的制备：将羟基四氢嘧啶对照品溶解得到羟基四氢嘧啶对照品溶液；供试品溶液的制备：将四氢嘧啶供试品溶解得到供试品溶液；测定：使用高效液相分析方法对供试品溶液中的羟基四氢嘧啶残留进行检测。2.根据权利要求1所述的检测方法，其中，流动相为水。3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其中，流动相的流速为0.4
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1.2mL/min，优选为0.5
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0.7mL/min。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的检测方法，其中，色谱柱为C18色谱柱，优选为填料为十八烷基键合硅胶的C18柱，进一步优选为ZORBAX SB
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Aq柱。5.根据权利要求4所述的检测方...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈玉娟，陈雯雯，万金玉，王冠凤，郭学平，
申请(专利权)人：华熙生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：