包括TGFΒ结合结构域的嵌合细胞因子受体制造技术

本文提供了具有能够与TGF

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包括TGF
Β
结合结构域的嵌合细胞因子受体
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2019年8月30日提交的美国临时申请第62/894,658号；以及于2020年7月17日提交的美国临时申请第63/053,322号的优先权的权益，所述两个美国临时申请的内容特此通过引用整体并入。
[0003]序列表
[0004]本申请经由EFS
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Web电子申请并且包含呈.txt格式的电子提交的序列表。.txt文件含有2020年8月27日创建的名为“AT
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030_03WO_SL.txt”的序列表，并且其大小为576,780字节。此.txt文件中含有的序列表是说明书的一部分，并且通过引用整体并入本文。


技术介绍

[0005]经基因修饰以识别恶性肿瘤相关抗原的免疫细胞(例如，T细胞)的过继转移正在显示出作为治疗癌症的新方法的前景。例如，可以对T细胞进行基因修饰以表达嵌合抗原受体(CAR)，所述嵌合抗原受体是包含抗原识别部分和T细胞激活结构域的融合蛋白。
[0006]T细胞增殖、细胞毒性效力和持久性由信号转导通路驱动。常规的CAR设计提供两种信号：CD3ζ激活(信号1)和共刺激(信号2，例如，通过4
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1BB、OX40和/或CD28表达)。在一些情况下，第三种信号(信号3)，细胞因子诱导的细胞因子受体信号传导(例如，用于免疫增强的细胞因子支持)可能是令人期望的。然而，提供信号3的方法已经受到显著的限制。
[0007]提供细胞因子支持的一种方法包含将CAR
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T细胞疗法与重组细胞因子/细胞因子模拟物的全身输注组合，以及对CAR
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T细胞进行工程化以在细胞外分泌/表达细胞因子。由于细胞因子具有多效性作用并且也可以影响其它细胞类型的功能，CAR
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T细胞的全身施用或产生免疫增强的细胞因子具有至少两个主要缺点：(i)这些方法可能导致人体全身毒性，以及(ii)在同种异体CAR
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T细胞疗法的背景下，这些方法可能会导致旁观者宿主免疫激活，所述旁观者宿主免疫激活加速同种异体CAR
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T细胞的排斥反应，从而影响治疗效果。提供细胞因子支持的另一种方法基于引入组成性激活的二聚化细胞因子受体IL
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7Ra，这限制了信号传导输出的性质(仅IL
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7信号传导)和量级。提供细胞因子支持的又一种方法涉及将信号3直接掺入到CAR分子中(《自然医学(Nat Med.)》2018年3月；24(3):352
‑
359)。这种方法的限制在于信号3的强度取决于CAR激活的强度。在不存在靶标(和CAR激活)的情况下，信号3不会被转导。
[0008]需要通过以背景相关的方式将细胞因子信号特异性靶向CAR
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T细胞来规避这些缺点的解决方案，从而允许改善的安全性特征和治疗效果。本文提供了解决这种需要的组合物和方法。

技术实现思路

[0009]本文提供了包括TGF
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β结合结构域的嵌合细胞因子受体。本文提供了诱导型TGF
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β
驱动的嵌合细胞因子受体，所述嵌合细胞因子受体当与转化生长因子β细胞因子家族的配体(TGF
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β配体，例如，TGF
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β1、TGF
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β2和TGF
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β3)结合时或用抗TGF
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β受体抗体激活时是有活性的。当存在于具有嵌合抗原受体(CAR)的免疫细胞上并且与TGF
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β配体结合和/或用抗TGF
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βR抗体激活时，此类受体使细胞因子受体信号传导(信号3)增加，从而导致具有CAR的免疫细胞的免疫细胞激活、增殖、持久性和/或效力增加。因此，本公开的嵌合细胞因子受体允许细胞因子信号与内源性TGF
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β配体一起被传递到免疫细胞中，从而阻断细胞因子信号的免疫抑制信号，并且将细胞因子信号转化成可以与CAR驱动的活性协同工作或协同作用的免疫增强信号。另外，由于临床批准的抗TGF
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β受体抗体可以聚集和激活本公开的嵌合细胞因子受体，用抗TGF
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β受体治疗的患者不仅可以受益于内源性TGF
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β信号传导的阻断，而且还受益于具有嵌合细胞因子受体的细胞中细胞因子信号传导的激活。本文还提供了组成型活性TGF
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β驱动的含TGF
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β结合结构域的嵌合细胞因子受体；此类受体在不存在诱导剂的情况下继续发信号，但可以被进一步诱导或表现出进一步提高的性质或活性，例如，在存在TGF
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β配体或抗TGF
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βR抗体的情况下。在一些实施例中，TGF
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βR是TGF
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βR2，并且抗体是抗TGF
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βR2抗体。如本文所使用的，“TGF
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β(TGF
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beta)”与“TGF
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β”可互换使用。
[0010]因此，一方面，本文提供了一种嵌合细胞因子受体，其包括：(a)结合结构域，所述结合结构域包括TGF
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β受体的细胞外部分或TGF
‑
β抗原结合结构域；(b)跨膜结构域；(c)Janus激酶(JAK)结合结构域；以及(d)募集结构域。如本文所使用的，“细胞外部分”是指TGF
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β受体的细胞外结构域的任何部分。
[0011]在相关方面，本文提供了一种编码本公开的嵌合细胞因子受体中的任何一个的多核苷酸，以及包括此类多核苷酸的表达载体。在一些实施例中，所述多核苷酸进一步编码嵌合抗原受体(CAR)，其中所述CAR与所关注靶标结合。所关注靶标可以是任何所关注分子，例如，包含但不限于表8中呈现的靶标中的任何一个或多个靶标。
[0012]在另外的方面，本文提供了一种工程化免疫细胞，其包括本公开的至少一个嵌合细胞因子受体。在另一方面，本文提供了一种工程化免疫细胞，其包括本公开的至少一个嵌合抗原受体(CAR)和至少一个嵌合细胞因子受体。在一些实施例中，所述免疫细胞是T细胞。在一些实施例中，所述免疫细胞是同种异体免疫细胞。在其它实施例中，所述免疫细胞是自体免疫细胞。所述免疫细胞可以选自由以下组成的组：T细胞、树突状细胞、杀伤树突状细胞、肥大细胞、NK细胞、巨噬细胞、单核细胞、B细胞和源自干细胞的免疫细胞。在相关方面，本文提供了一种药物组合物，其包括本公开的工程化免疫细胞中的任何工程化免疫细胞；以及包括此类药物组合物的试剂盒。本文还提供了一种制备免疫细胞的方法。
[0013]在另一方面，本文提供了一种治疗受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的本文所述的工程化免疫细胞中的任何工程化免疫细胞。
附图说明
[0014]图1示出了本公开的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种嵌合细胞因子受体，其包括：a.结合结构域，所述结合结构域包括TGF
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β受体的细胞外部分或TGF
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β抗原结合结构域；b.跨膜结构域；c.Janus激酶(JAK)结合结构域；以及d.募集结构域。2.根据权利要求1所述的嵌合细胞因子受体，其中所述募集结构域是STAT募集结构域。3.根据权利要求1或2所述的嵌合细胞因子受体，其中所述募集结构域来自受体，任选地来自细胞因子受体。4.根据权利要求1到3中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述嵌合细胞因子受体是成簇的。5.根据权利要求1到3中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述嵌合细胞因子受体是二聚化的，并且每个单体包括：a.结合结构域，所述结合结构域包括TGF
‑
β受体的细胞外部分或TGF
‑
β抗原结合结构域；b.跨膜结构域；c.Janus激酶(JAK)结合结构域；以及d.募集结构域。6.根据权利要求1到5中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述TGF
‑
β抗原结合结构域是scFv。7.根据权利要求1到5中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述结合结构域包括野生型TGF
‑
β受体序列的细胞外部分。8.根据权利要求1到5中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述结合结构域包括野生型TGF
‑
β受体序列的细胞外部分的一个或多个突变。9.根据权利要求1到5中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述结合结构域包括TGFβR2的细胞外部分。10.根据权利要求1到5中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述结合结构域包括SEQ ID NO:2到SEQ ID NO:20以及SEQ ID NO:159中的任一个的氨基酸序列。11.根据权利要求1到10中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述嵌合细胞因子受体具有组成型活性或在所述结合结构域与TGF
‑
β配体结合时激活。12.根据权利要求11所述的嵌合细胞因子受体，其中所述TGF
‑
β配体是TGFβ
‑
1、TGF
‑
β2或TGF
‑
β3中的任一个。13.根据权利要求1到10中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述嵌合细胞因子受体具有组成型活性或在所述结合结构域与抗TGF
‑
β受体抗体结合时激活。14.根据权利要求1到13中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述JAK结合结构域是JAK1结合结构域、JAK2结合结构域、JAK3结合结构域或TYK2结合结构域。15.根据权利要求1到14中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述跨膜结构域源自EpoR、GP130、PrlR、GHR、GCSFR或TPOR/MPLR受体。16.根据权利要求1到15中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述跨膜结构域源自
TPOR/MPLR受体。17.根据权利要求16所述的嵌合细胞因子受体，其中所述跨膜结构域和所述JAK结合结构域包括SEQ ID NO:26的天然存在的TPOR/MPLR受体的氨基酸478
‑
582。根据权利要求17所述的嵌合细胞因子受体，其中所述跨膜结构域和所述JAK结合结构域进一步包括所述TPOR/MPLR受体的氨基酸位置H499、S505、W515、K553或K573处的至少一个取代。18.根据权利要求17所述的嵌合细胞因子受体，其中所述跨膜结构域和所述JAK结合结构域包括选自H499L、S505N、W515K、K553R和K573R的至少一个氨基酸取代。19.根据权利要求18所述的嵌合细胞因子受体，其中所述TPOR/MPLR受体的所述跨膜结构域和所述JAK结合结构域包括：(a)所述H499L取代；(b)所述S505N取代；(c)所述W515K取代；(d)所述S505N取代、所述W515K取代；或(e)所述H499L取代、所述S505N取代、所述W515K取代。20.根据权利要求17到19中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述TPOR/MPLR受体的所述跨膜结构域和所述JAK结合结构域进一步包括所述K553R取代和/或所述K573R取代。21.根据权利要求1到20中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述跨膜结构域和所述JAK结合结构域包括选自以下的氨基酸序列：SEQ ID NO:27到SEQ ID NO:79、SEQ ID NO:160以及SEQ ID NO:217到SEQ ID NO:234。22.根据权利要求2到21中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述STAT募集结构域来自选自表4中所呈现的受体的受体。23.根据权利要求2到22中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述募集结构域包括来自IL7Ra、IL12Rb2、EGFR、IL
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21R或IL2Rb的一个或多个受体的STAT募集结构域。24.根据权利要求2到23中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述STAT募集结构域包括SEQ ID NO:80到SEQ ID NO:122以及SEQ ID NO:161的氨基酸序列中的任一个氨基酸序列。25.根据权利要求2到24中任一项所述的嵌合细胞因子受体，其中所述STAT募集结构域包括IL7Ra(316
‑
459)(SEQ ID NO:80...

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：艾洛基治疗公司，
类型：发明
国别省市：