一种帕拉米韦起始物料及杂质的分析方法技术

本发明专利技术提供了一种帕拉米韦起始物料及杂质的分析方法，其采用氰基色谱柱，以磷酸二氢钾溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流动相B的起始体积分数为15％～25％，进行梯度洗脱，对帕拉米韦起始物料及杂质进行高效液相色谱分析。使用该分析方法能实现帕拉米韦起始物料与各杂质的有效检测分离，该分析方法高效准确、专属性强，并且检测灵敏度高、分离度好并且检测限及定量限低，为帕拉米韦起始物料的质量研究提供了方法，适合有关物质的控制和杂质研究。适合有关物质的控制和杂质研究。适合有关物质的控制和杂质研究。

【技术实现步骤摘要】
一种帕拉米韦起始物料及杂质的分析方法


[0001]本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种帕拉米韦起始物料及杂质的分析方法。

技术介绍

[0002]帕拉米韦是一种新型的抗流感病毒药物，属神经氨酸酶抑制剂，现有临床试验证明对甲型和乙型流感有效。根据世界卫生组织的通报，H7N9属于甲型流感病毒亚型，初步试验结果显示，神经氨酸酶抑制剂或许会对该病毒起作用。(3AR,4R,6S,6AS)
‑4‑
[叔丁氧羰基氨基]‑3‑
(1
‑
乙基丙基)
‑
3A,5,6,6A
‑
四氢
‑
4H
‑
环戊并[D]异恶唑
‑6‑
羧酸甲酯为合成帕拉米韦的起始物料，其分子式为：C
18
H
30
N2O5，分子量为354.44，结构式为
[0003]帕拉米韦起始物料中易存在以下杂质：杂质A：2
‑
氮杂双环[2.2.1]庚
‑5‑
烯
‑3‑
酮，分子式为C6H7NO，分子量为109.13，结构式为杂质B：(1S,4R)
‑4‑
氨基环戊
‑2‑
烯烃
‑1‑
羧酸甲酯的L
‑
酒石酸盐，分子式为C
11
H
14
NO8，分子量为291.26，结构式为杂质C：(1S,4R)
‑4‑
氨基环戊
‑2‑
烯
‑1‑
羧酸，分子式为C6H9NO2，分子量为127.14，结构式为杂质D：(1S,4R)
‑4‑
((叔丁氧羰基)氨基)环戊
‑2‑
烯
‑1‑
羧酸的L
‑
酒石酸盐，分子式为C
15
H
23
NO
10
，分子量为377.35，结构式为
[0004]杂质A为合成帕拉米韦起始物料的一个原料；杂质B为杂质A与甲醇开环，后用L
‑
酒石酸拆分所得；杂质C为杂质B未被甲酯化的杂质；杂质D为Boc保护氨基后的脱甲基杂质。这四种杂质的极性较大，分离较为困难，现有技术中未见对上述起始物料及杂质进行检测分析的报道。因此，开发一种检测灵敏度高、专属性强，能有效分离帕拉米韦起始物料与杂质A、杂质B、杂质C、杂质D的分析方法显得尤为重要。

技术实现思路

[0005]为解决上述问题，本专利技术提供了一种帕拉米韦起始物料及杂质的分析方法，使用该分析方法能实现帕拉米韦起始物料与各杂质的有效检测分离，该分析方法高效准确、专属性强，检测灵敏度高、分离度好并且检测限及定量限低，为帕拉米韦起始物料的质量研究提供了方法，适合有关物质的控制和杂质研究。
[0006]本专利技术提供如下技术方案：
[0007]一种帕拉米韦起始物料及杂质的分析方法，其采用氰基色谱柱，以磷酸二氢钾溶液为流动相A，甲醇或乙腈为流动相B，流动相B的起始体积分数为15％～25％，进行梯度洗脱，对帕拉米韦起始物料及杂质进行高效液相色谱分析。
[0008]在一些实施方案中，帕拉米韦起始物料为杂质为杂质A：杂质B：杂质C：杂质D：
[0009]在一些实施方案中，流动相A磷酸二氢钾溶液的pH为3～7，流动相B为乙腈。优选地，流动相A磷酸二氢钾溶液的pH为4.5。
[0010]在一些实施方案中，分析方法采用紫外检测器，柱温为30℃～40℃，检测波长为200nm～220nm。
[0011]在一些优选实施方案中，柱温为35℃，检测波长为210nm。
[0012]在一些实施方案中，流动相的流速为0.7～1.0ml/min。
[0013]在一些实施方案中，梯度洗脱的程序为：
[0014]时间(min)流动相A(％)流动相B(％)075～8515～25875～8515～25920～3070～801520～3070～80
[0015]在一些实施方案中，梯度洗脱的程序为：
[0016]时间(min)流动相A(％)流动相B(％)080208802092575152575
[0017]在一些实施方案中，梯度洗脱的程序为：
[0018][0019][0020]柱温为35℃，流动相的流速为0.8ml/min。
[0021]在一些实施方案中，色谱柱规格为：内径4.0～5.0mm，长度100～250mm，填料粒径2～6μm；进样量为5～50μl，优选20μl。
[0022]在一些实施方案中，分析方法包括供试品溶液配制：取帕拉米韦起始物料供试品，用稀释液溶解并稀释，作为供试品溶液，其中稀释液为乙腈水溶液。
[0023]在一些实施方案中，该分析方法包括：分别取杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、帕拉米韦起始物料适量，加适量乙腈溶解，然后用乙腈:水＝10:90(V/V)稀释，得到各定位溶液；取杂质A、杂质B、杂质C、杂质D和帕拉米韦起始物料，用乙腈:水＝10:90(V/V)溶解并稀释，得到系统测试液；使用氰基色谱柱和紫外检测器，以磷酸二氢钾溶液为流动相A，乙腈为流动相B，分别取20μl空白溶液(诸如乙腈水溶液的稀释液)、各定位溶液和系统测试液，以梯度洗脱进行色谱分析；分别按照杂质外标法计算各杂质的含量。
[0024]在一些实施方案中，所得系统测试液中帕拉米韦起始物料浓度为2mg/ml，杂质A浓度为3μg/ml，杂质B浓度为3μg/ml，杂质C浓度为3μg/ml，杂质D浓度为3μg/ml。
[0025]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：本专利技术选择氰基色谱柱，该色谱柱对样品成分保留能力强，峰形好。本方法专属性强：空白溶液对检测无干扰；帕拉米韦起始物料与杂质蜂之间的分离度基本均远大于1.5。对帕拉米韦起始物料及杂质的检测限(信噪比3:
1)均低于0.08μg/ml；对帕拉米韦起始物料及杂质的定量限(信噪比10:1)均低于0.33μg/ml。本专利技术的方法空白无干扰、专属性好，可以较好的应用于帕拉米韦起始物料的杂质控制。该方法能有效地检测并分离上述帕拉米韦起始物料与杂质A、杂质B、杂质C、杂质D，灵敏度高；并且操作简便、分析时间较短，可实现帕拉米韦起始物料及杂质的检测分析。
附图说明
[0026]图1为本专利技术实施例1中空白溶液的高效液相色谱图；
[0027]图2为本专利技术实施例1中帕拉米韦起始物料系统测试液的高效液相色谱图，按出峰时间先后顺序依次为：杂质C、杂质A、杂质B、杂质D、帕拉米韦起始物料；
[0028]图3为本专利技术实施例3中帕拉米韦起始物料供试品溶液的高效液相色谱图。
具体实施方式
[0029]下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行详细描述。除非另有说明，否则以下实施例中所用的试剂、材料及仪器均可通过常规商业手段获得。且应当理解，此处所描述的具体实施方式仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种帕拉米韦起始物料及杂质的分析方法，其特征在于，所述分析方法采用氰基色谱柱，以磷酸二氢钾溶液为流动相A，甲醇或乙腈为流动相B，流动相B的起始体积分数为15％～25％，进行梯度洗脱，对所述帕拉米韦起始物料及杂质进行高效液相色谱分析。2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述帕拉米韦起始物料为所述杂质为杂质A：杂质B：杂质C：杂质D：3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述流动相A磷酸二氢钾溶液的pH为3～7，所述流动相B为乙腈。4.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述分析方法采用紫外检测器，柱温为30℃～40℃，检测波长为200nm～220nm。5.根据权利要求4所述的分析方法，其特征在于，所述柱温为35℃，所述检测波长为210nm。6.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，流动相的流速为0.7～1.0ml/min。7.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：李园园，邓瑜，
申请(专利权)人：苏州正济药业有限公司，
类型：发明
国别省市：