一种中亚苦蒿醇提物及其提取方法和应用技术

技术编号:32727058 阅读:12 留言:0更新日期:2022-03-20 08:32
本发明专利技术提供了一种中亚苦蒿醇提物及其提取方法和应用,属于生物医药技术领域,具体是将中亚苦蒿的80~90%的乙醇提物经大孔吸附树脂30%乙醇洗脱后收集的组分。实验表明,本发明专利技术的中亚苦蒿醇提物(AAEM)促进DC表面共刺激分子CD40和CD86的表达,能够提高DC分泌IL

【技术实现步骤摘要】
一种中亚苦蒿醇提物及其提取方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
,尤其涉及一种中亚苦蒿醇提物及其提取方法和应用。

技术介绍

[0002]树突状细胞(Dendritic cell,DC)是一种强大的专职抗原呈递细胞,它连接先天免疫系统和适应性免疫系统,平衡自我和非自我之间的适应性反应,具有抗原呈递和诱导T细胞反应的功能。随着人们研究的深入,树突状细胞的免疫功能调控可用于治疗自身免疫性疾病和肿瘤等疾病。近些年来,DC可以诱导抗肿瘤免疫,并且DC疫苗增强了机体抗肿瘤的活性。在现代医疗技术手段中手术,化疗和放疗是当下治疗癌症的常规手段,但它们均无法解决晚期癌症治疗效果、对患者免疫系统影响大等问题,中草药的有效成分作为新型治疗方式受到人们瞩目。中草药具有多靶点且毒副作用小等优势,可作为免疫佐剂,也可促进DC成熟,进而达到免疫治疗的目的。现有技术公开了:阿魏菇水提物可上调小鼠骨髓来源DC中CD40、CD80、CD86和MHC II的表达,增加了 IL

12的产生;南蛇藤茎乙酸乙酯醇提物促进DC表面共刺激分子(CD40,CD80 和CD86)及MHC分子的表达,增加趋化因子受体CCR7的表达量,增强DC 活化T淋巴细胞的能力,并呈剂量依赖性。此外,中草药可有效预防和治疗多种免疫疾病,是新型耐受佐剂的来源。
[0003]蒿属(Artemisia L.)植物主要的活性成分为倍半萜类,具有抗炎、免疫调节、抗肿瘤、抗疟、镇痛、抗菌等广泛的生物活性。蒿属中的中亚苦蒿(Artemisiaabsinthium L.),为菊科蒿属的多年生草本植物,其全草入药,味苦、性寒,药用部位是叶和茎。中亚苦蒿主要有萜类衍生物、挥发油、黄酮类、酚类、木脂素及其他类化合物等成分,具有抗炎镇痛、保肝、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等作用,可用于治疗关节肿痛、肿瘤、急性细菌性痢疾等疾病。
[0004]现有技术CN 112089743 A公开了一种免疫抑制药物,主要活性成分包括中亚苦蒿提取物。但是没有关于中亚苦蒿提取物用于制备免疫增强药物的报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种中亚苦蒿醇提物及其提取方法和应用,本专利技术的中亚苦蒿醇提物具有免疫增强活性,能够用于制备免疫增强药物。
[0006]为了实现上述专利技术目的,本专利技术提供以下技术方案:
[0007]本专利技术提供了一种中亚苦蒿醇提物的提取方法,包括以下步骤:
[0008]1)将中亚苦蒿地上部分和提取溶剂混合进行醇提,去除得到的醇提液中的醇溶剂得到醇提物,所述提取溶剂为体积浓度为80%~90%的乙醇水溶液,所述醇提的温度为55~65℃;
[0009]2)将所述醇提物过AB

8大孔树脂柱,依次用水和体积浓度为30%的乙醇水溶液进行梯度洗脱,收集洗脱液,所述洗脱液中含有中亚苦蒿醇提物。
[0010]优选的,步骤1)中所述中亚苦蒿地上部分的质量和提取溶剂的体积比为1: 8~
12;所述提取的次数为2~4次。
[0011]本专利技术还提供了上述方案所述的提取方法提取得到的中亚苦蒿醇提物,所述中亚苦蒿醇提物中多糖的质量百分含量为24.0%~24.5%,黄酮的质量百分含量为22.5%~23.0%,萜类的质量百分含量为28.0%~28.5%。
[0012]本专利技术还提供了上述方案所述的提取方法提取得到的中亚苦蒿醇提物或者所述的中亚苦蒿醇提物在制备免疫增强药物中的应用。
[0013]优选的,所述免疫增强药物包括促进树突状细胞成熟和/或调节树突状细胞功能的药物。
[0014]优选的,所述调节树突状细胞功能包括:提高树突状细胞的表面共刺激分子表达和增强炎性细胞因子的分泌水平中的一种或几种。
[0015]优选的,所述表面共刺激分子包括CD40和/或CD86。
[0016]优选的,所述炎性细胞因子包括IL

6和/或TNF

α。
[0017]本专利技术还提供了上述方案所述的提取方法提取得到的中亚苦蒿醇提物或者所述的中亚苦蒿醇提物在制备治疗肿瘤和/或炎症感染相关疾病的药物中的应用。
[0018]本专利技术提供了一种中亚苦蒿醇提物的制备方法,具体是将中亚苦蒿的 80~90%的乙醇提物经大孔吸附树脂30%乙醇洗脱后收集的组分。实验表明,本专利技术的中亚苦蒿醇提物(AAEM)促进的DC表面共刺激分子CD40和CD86 的表达,能够提高DC分泌IL

6、TNF

α的水平,显示AAEM具有免疫增强作用,为免疫增强药物的制备提供候选。
附图说明
[0019]图1为AAEM促进DC表面共刺激分子CD40表达水平的结果图,AAEM 处理DC 12h后,用流式细胞仪分析DC表面分子CD40、CD86的表达水平,数据采用单因素方差分析,
a
P<0.001,处理组与Control组比较得出;
[0020]图2为AAEM促进DC表面共刺激分子CD86表达水平的结果图,AAEM 处理DC 12h后,用流式细胞仪分析DC表面分子CD86的表达水平,数据采用单因素方差分析,
a
P<0.001,处理组与Control组比较得出;
[0021]图3为AAEM促进DC分泌炎症细胞因子水平IL

6的结果图,AAEM处理DC 12h后,收集细胞上清,ELISA试剂盒检测IL

6的含量;数据采用单因素方差分析,
a
P<0.001,处理组与Control组比较得出;
[0022]图4为AAEM促进DC分泌炎症细胞因子水平TNF

α的结果图,AAEM 处理DC 12h后,收集细胞上清,ELISA试剂盒检测TNF

α的含量;数据采用单因素方差分析,
a
P<0.001,处理组与Control组比较得出。
具体实施方式
[0023]本专利技术提供了一种中亚苦蒿醇提物的提取方法,包括以下步骤:
[0024]1)将中亚苦蒿地上部分和提取溶剂混合进行醇提,去除得到的醇提液中的醇溶剂得到醇提物,所述提取溶剂为体积浓度为80%~90%的乙醇水溶液,所述醇提的温度为55~65℃;
[0025]2)将所述醇提物过AB

8大孔树脂柱,依次用水和体积浓度为30%的乙醇水溶液进
行梯度洗脱,收集洗脱液,所述洗脱液中含有中亚苦蒿醇提物。
[0026]本专利技术首先将中亚苦蒿地上部分和提取溶剂混合进行醇提,去除得到的醇提液中的醇溶剂得到醇提物,所述提取溶剂为体积浓度为80%~90%的乙醇水溶液,所述醇提的温度为55~65℃。
[0027]在本专利技术中,所述中亚苦蒿地上部分优选进行干燥、粉碎和过筛,收集筛下物得到粉末;所述干燥的方法包括烘干和自然晾干;所述过筛的孔径优选为 30~50目,更本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种中亚苦蒿醇提物的提取方法,包括以下步骤:1)将中亚苦蒿地上部分和提取溶剂混合进行醇提,去除得到的醇提液中的醇溶剂得到醇提物,所述提取溶剂为体积浓度为80%~90%的乙醇水溶液,所述醇提的温度为55~65℃;2)将所述醇提物过AB

8大孔树脂柱,依次用水和体积浓度为30%的乙醇水溶液进行梯度洗脱,收集洗脱液,所述洗脱液中含有中亚苦蒿醇提物。2.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,步骤1)中所述中亚苦蒿地上部分的质量和提取溶剂的体积比为1:8~12;所述提取的次数为2~4次。3.权利要求1或2所述的提取方法提取得到的中亚苦蒿醇提物,其特征在于,所述中亚苦蒿醇提物中多糖的质量百分含量为24.0%~24.5%,黄酮的质量百分含量为22.5%~23.0%,萜类的质量百分含量为28.0%~28.5%。4.权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员:李金耀马荣斌夏丽洁马梓航
申请(专利权)人:新疆前进荣耀投资有限公司
类型:发明
国别省市:

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