一种恰玛古抗肿瘤成分的提取方法技术

本发明专利技术涉及植物天然提取物技术领域，尤其涉及一种恰玛古抗肿瘤成分的提取方法。本发明专利技术直接采用极性小的溶剂石油醚作为提取溶剂一步提取粗恰玛古抗肿瘤成分，步骤简单，提取时间短，提取温度低。进一步地，本发明专利技术采用层析分离的方式对粗恰玛古抗肿瘤成分进行进一步提纯，得到活性更好的恰玛古抗肿瘤成分。本发明专利技术实施例表明，采用本发明专利技术提取方法得到的抗肿瘤成分能够有效抑制人肺癌A549细胞和小鼠肺癌LLC细胞的活性。LLC细胞的活性。LLC细胞的活性。

【技术实现步骤摘要】
一种恰玛古抗肿瘤成分的提取方法


[0001]本专利技术涉及植物天然提取物
，尤其涉及一种恰玛古抗肿瘤成分的提取方法。

技术介绍

[0002]恰玛古为十字花科芸苔属二年生草本植物，学名为芜菁(Brassica rapa L.)。随着对恰玛古的研究不断深入，不同类别的化学成分被分离获得，对其药理作用的认识也不断提升。
[0003]恰玛古作为中国新疆常用的药食兼用植物，其硫代葡萄糖苷、黄酮类、挥发油和多糖等多种活性成分，可发挥抗肿瘤、免疫调节、抗氧化和降血糖等多种生物活性。现有技术多采用加热及超声醇提的方式对抗肿瘤活性成分进行提取，醇提的温度通常为80℃以上，且醇提后需要进行多步浓缩才能获得粗产物，整体提取步骤复杂，所需时间长，提取温度高。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术提供了一种恰玛古抗肿瘤活性成分的提取方法。本专利技术提供的提取方法步骤简单，提取时间短，提取温度低，且提取的抗肿瘤成分活性高。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]一种恰玛古抗肿瘤成分的提取方法，包括以下步骤：
[0007]采用石油醚对恰玛古粉末进行超声提取和浸提，浸提后直接获得粗恰玛古抗肿瘤成分；
[0008]所述超声提取的时间≤20min，所述浸提的次数≤3次，单次所述浸提的时间≤2h；所述超声提取的温度≤60℃；所述浸提的温度为≤60℃
[0009]优选的，所述超声提取的时间为15～20min；所述浸提的次数为1～3次，单次所述浸提的时间为1～2h；所述超声提取的温度为50～60℃；所述浸提的温度为50～60℃。
[0010]优选的，所述恰玛古粉末和石油醚的料液比为1：5～10g/mL。
[0011]优选的，浸提后，还包括对所述粗恰玛古抗肿瘤成分进行层析分离。
[0012]优选的，所述层析分离的洗脱方式为梯度洗脱。
[0013]优选的，所述梯度洗脱包括：依次使用石油醚和乙酸乙酯的体积比为10:0、9:1、8:2和7:3的溶剂进行洗脱，石油醚和乙酸乙酯体积比为8:2和7:3时的洗脱组分为恰玛古抗肿瘤成分。
[0014]优选的，所述梯度洗脱在硅胶柱中进行，所述硅胶的粒径为50～150μm，所述硅胶柱的柱体体积为20～100cm3。
[0015]优选的，所述粗恰玛古抗肿瘤成分与硅胶的质量比为1：1～6。
[0016]优选的，所述梯度洗脱中，每个梯度的洗脱量为1～2个硅胶柱的柱体体积。
[0017]优选的，所述恰玛古粉末为恰玛古地下部分的粉末，所述恰玛古粉末的粒径为250
～850μm。
[0018]本专利技术提供了一种恰玛古抗肿瘤成分的提取方法，包括以下步骤：采用石油醚对恰玛古粉末进行超声提取和浸提，获得粗恰玛古抗肿瘤成分；所述超声提取的时间≤20min，所述浸提的时间≤2h；所述超声提取的温度≤60℃；所述浸提的温度为≤60℃。本专利技术直接采用用极性小的剂石油醚作为提取溶剂一步提取粗恰玛古抗肿瘤成分，步骤简单，提取时间短，提取温度低。进一步地，本专利技术采用层析分离的方式对粗恰玛古抗肿瘤成分进行进一步提纯，得到活性更好的恰玛古抗肿瘤成分。本专利技术实施例表明，采用本专利技术提取方法得到的抗肿瘤成分能够有效抑制人肺癌A549细胞和小鼠肺癌LLC细胞的活性。
附图说明
[0019]图1为粗恰玛古抗肿瘤成分以及恰玛古醇提石油醚萃取物对人肺癌A549细胞活性的抑制结果图；
[0020]图2为粗恰玛古抗肿瘤成分以及恰玛古醇提乙酸乙酯萃取物对人肺癌A549细胞活性的抑制结果图；
[0021]图3为粗恰玛古抗肿瘤成分硅胶柱层析分离TLC结果图；
[0022]图4为粗恰玛古抗肿瘤成分不同梯度洗脱组分对人肺癌A549细胞活性的抑制结果图；
[0023]图5为粗恰玛古抗肿瘤成分编号为23～25洗脱组分对人肺癌A549细胞形态改变的结果图；
[0024]图6为粗恰玛古抗肿瘤成分编号为23～25洗脱组分对人肺癌A549细胞和小鼠肺癌LLC细胞活性的抑制结果图。
具体实施方式
[0025]下面将结合本专利技术中的实施例，对本专利技术中的技术方案进行清楚、完整地描述。
[0026]本专利技术提供了一种恰玛古抗肿瘤成分的提取方法，包括以下步骤：
[0027]采用石油醚对恰玛古粉末进行超声提取和浸提，浸提后直接获得粗恰玛古抗肿瘤成分；
[0028]所述超声提取的时间≤20min，所述浸提的次数≤3次，所述单次浸提的时间≤2h；所述超声提取的温度≤60℃；所述浸提的温度为≤60℃。
[0029]本专利技术采用石油醚对恰玛古粉末进行超声提取和浸提，浸提后直接获得粗恰玛古抗肿瘤成分。在本专利技术中，所述恰玛古粉末优选为恰玛古地下部分的粉末，所述恰玛古粉末的粒径优选为250～850μm，更优选为380～550μm。在本专利技术的实施例中，所述恰玛古粉末的制备方法优选为：将恰玛古地下部分依次进行洗净切片、晾干、粉碎，得到恰玛古粉粹物，将所述恰玛古粉碎物过40目(孔径为425μm)筛，取筛下物，得到恰玛古粉末。
[0030]在本专利技术中，所述恰玛古粉末和石油醚的料液比优选为1：5～10g/mL，更优选为1：7～10g/mL，进一步优选为1:10g/mL。
[0031]在本专利技术中，所述超声的功率优选为280～320W，更优选为300W；所述超声提取的时间优选为≤20min，更优选为15～20min，进一步优选为20min，超声提取的温度优选为50～60℃，更优选为50～55℃，进一步优选为50℃。本专利技术采用上述超声时间和温度，有利于
抗肿瘤有效成分从恰玛古粉末中充分释放到溶剂中。
[0032]在本专利技术中，所述浸提优选在水浴条件下进行，所述浸提的次数≤3次，优选为1～3次，进一步优选为3次，单次所述浸提的时间≤2h，优选为1～2h，进一步优选为2h，所述浸提的温度≤60℃，优选为50～60℃，进一步优选为55～60℃，更优选为60℃。本专利技术优选采用上述浸提条件有利于对抗肿瘤有效成分进行充分提取。
[0033]得到粗恰玛古抗肿瘤成分后，本专利技术优选对所述粗恰玛古抗肿瘤进行层析分离以富集抗肿瘤成分。在本专利技术中，所述层析分离用装置优选为硅胶柱，所述硅胶柱中硅胶的粒径优选为50～150μm，更优选为75～150μm，进一步优选为75μm，所述硅胶柱的柱体体积优选为20～100cm3，更优选为50～80cm3，进一步优选为50cm3；所述层析分离的洗脱方法优选为梯度洗脱。在本专利技术中，在进行梯度洗脱前优选将粗恰玛古抗肿瘤成分用石油醚溶解，再与硅胶进行拌样混合。在本专利技术的实施例中，所述粗恰玛古抗肿瘤成分和石油醚的质量比优选为1:10，与硅胶拌样后，本专利技术优选将拌样后的硅胶在60℃水浴下蒸发掉石油醚，使粗恰玛古抗肿瘤成分完全被硅胶吸附。在本专利技术中，所述粗恰玛古抗肿瘤成分与硅胶的质量比优选为1：1～6，更优选为1：2～5，进一步优选为1:3，本专利技术优选将粗恰玛古抗肿瘤本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种恰玛古抗肿瘤成分的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：采用石油醚对恰玛古粉末进行超声提取和浸提，浸提后直接获得粗恰玛古抗肿瘤成分；所述超声提取的时间≤20min，所述浸提的次数≤3次，单次所述浸提的时间≤2h；所述超声提取的温度≤60℃；所述浸提的温度为≤60℃。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述超声提取的时间为15～20min；所述浸提的次数为1～3次，单次所述浸提的时间为1～2h；所述超声提取的温度为50～60℃；所述浸提的温度为50～60℃。3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述恰玛古粉末和石油醚的料液比为1：5～10g/mL。4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，浸提后，还包括对所述粗恰玛古抗肿瘤成分进行层析分离。5.根据权利要求4所述的提取方法，其特征在于，所述层析分离...

【专利技术属性】
技术研发人员：李金耀，马荣斌，夏丽洁，谢仁古丽，
申请(专利权)人：新疆前进荣耀投资有限公司，
类型：发明
国别省市：