一种替格瑞洛中N-亚硝胺类杂质的分离及检测方法技术

本发明专利技术提供一种采用气相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种替格瑞洛中N-亚硝胺类杂质的分离及检测方法


[0001]本专利技术属于分析检测
，具体涉及分离并检测替格瑞洛合成过程中N-亚硝胺类杂质的方法。

技术介绍

[0002]替格瑞洛(Ticagrelor)结构如式(I)所示，化学名称：(1S,2S,3R,5S)-3-[7-[[(1R,2S)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基]氨基]-5-丙硫基三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羟乙氧基)-1,2-环戊二醇，是由美国阿斯利康(AstraZeneca)公司开发的一种新型血小板聚集抑制剂，商品名为倍林达(Brilinta)。替格瑞洛为非前体药，无须经肝脏代谢激活即可直接起效，与P2Y12 ADP受体可逆性结合。临床用于急性冠脉综合征(ACS)患者的抗血小板治疗，或用于降低高危冠状动脉疾病(CAD)患者初发心脏病或卒中风险。
[0003][0004]截至目前，对于替格瑞洛合成过程中杂质的检测多集中在起始原料(1R,2S)-rel-2-(3,4-二氟苯基)环丙胺(SM2)杂质、异构体杂质等。
[0005]CN105424822B公开了一种HPLC法检测替格瑞洛中(1R,2S)-2-(3,4-二氟苯基)环丙胺的方法。
[0006]CN106841413A公开了采用HPLC法对替格瑞洛对映异构体(1S，2S，3R，5S)-3-(7-(((1S，2R)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基氨基)-5-(丙硫基)-3氢-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)-5-(2-羟基乙氧基)环戊烷1,2-二醇，以及非对映异构体(1R，2R，3S，5R)-3-(7-(((1S，2R)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基氨基)-5-(丙硫基)-3氢-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)-5-(2-羟基乙氧基)环戊烷1,2-二醇、(1S，2S，3R，5S)-3-(7-(((1S，2R)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基氨基)-5-(丙硫基)-3氢-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)-5-(2-羟基乙氧基)环戊烷1,2-二醇进行分离鉴定的方法。
[0007]替格瑞洛在形成三氮唑结构过程中引入了亚硝酸钠，从而极大地增加了产生N-亚硝胺类杂质(如NDEA、NDMA、N-亚硝基哌啶等)的可能性。目前，对于N-亚硝胺类杂质的检测还未纳入替格瑞洛药品的质量控制标准体系，而N-亚硝胺类杂质属于公认的基因毒警示结构，具有很强的遗传毒性及致癌性。因此，对于这类杂质的分离检测对于替格瑞洛药物质量控制至关重要，且对保障替格瑞洛的安全用药也具有重要意义。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的之一在于提供一种替格瑞洛的N-亚硝胺类杂质的分离检测方法，具体为：采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法，对替格瑞洛及其中间体中的N-亚硝胺类杂质进行检测。
[0009]本专利技术的优选技术方案中，所述N-亚硝胺类杂质选自N-亚硝基二甲胺(NDMA)、N-亚硝基二乙胺(NDEA)、N-亚硝基哌啶中的一种或其组合。
[0010]本专利技术的优选技术方案中，所述方法包括以下步骤：1)溶液配制；2)采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法进行检测。
[0011]本专利技术的优选技术方案中，所述步骤1)的溶液包含对照品溶液和供试品溶液。
[0012]本专利技术的优选技术方案中，所述对照品溶液的配制方法为：精密称取N-亚硝胺类杂质适量，采用适宜溶剂溶解后定量稀释，作为对照品溶液。
[0013]本专利技术的优选技术方案中，所述对照品溶液的浓度为500-1000ng/ml。
[0014]本专利技术的优选技术方案中，所述溶剂选自N-甲基吡咯烷酮、DMSO、DMF中的一种或其组合。
[0015]本专利技术的优选技术方案中，所述供试品溶液的配制方法为：精密称取替格瑞洛或其中间体样品，精密加入一定量溶剂溶解，密封，作为待测样品溶液。
[0016]本专利技术的优选技术方案中，供试品溶液的浓度为50-200mg/ml。
[0017]本专利技术的优选技术方案中，所述溶剂选自N-甲基吡咯烷酮、DMSO、DMF中的一种或其组合。
[0018]本专利技术的优选技术方案中，所述步骤2)的检测条件为：起始温度为35-50℃，维持0.5-2分钟，以每分钟10-30℃的速率升温至150-200℃，维持0-5分钟，以每分钟5-30℃的速率升温至200-300℃，维持1-5分钟；后进样口温度为200-250℃；氦气为载气，流速为每分钟1.0-5.0ml；分流进样，分流比为3-10:1，传输线温度为100-250℃；顶空进样，20ml顶空瓶装样1ml，顶空平衡温度100-150℃，定量环温度150-200℃，传输线温度150-200℃，平衡时间10-20min；采用单级四级杆质谱检测器，温度为100-200℃；离子源为EI源，温度为200-250℃，溶剂为N-甲基吡咯烷酮(NMP)、DMSO或DMF；选择离子监测(SIM)模式下进行检测，定量、定性离子见表1。
[0019]表1
[0020]名称定量离子(m/z)定性离子(m/z)NDMA7442、43NDEA10244、57N-亚硝基哌啶11442、55
[0021]本专利技术的优选技术方案中，色谱柱选自(14％-氰丙基-苯基)-甲基聚硅氧烷(AgilentDB-1701,30m
×
0.25mm
×
1.0μm)或聚乙二醇(AgilentVF-Waxms，30m
×
0.25mm
×
0.25μm)。
[0022]本专利技术的另一目的在于提供N-亚硝胺类杂质在替格瑞洛质量控制和/或安全用药中的应用。
[0023]本专利技术的优选技术方案中，所述N-亚硝胺类杂质选自N-亚硝基二甲胺(NDMA)、N-亚硝基二乙胺(NDEA)、N-亚硝基哌啶中的一种或其组合。
[0024]本专利技术的另一目的在于提供N-亚硝胺类杂质的分离检测方法在替格瑞洛质量控制和/或安全用药中的应用。
[0025]本专利技术的优选技术方案中，所述分离检测方法具体为：采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法，对替格瑞洛及其中间体中的N-亚硝胺类杂质进行检测。
[0026]本专利技术的优选技术方案中，所述N-亚硝胺类杂质选自N-亚硝基二甲胺(NDMA)、N-亚硝基二乙胺(NDEA)、N-亚硝基哌啶中的任一种或其组合。
[0027]本专利技术的优选技术方案中，所述方法包括以下步骤：1)溶液配制；2)采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法进行检测。
[0028]本专利技术的优选技术方案中，所述步骤1)的溶液包含对照品溶液和供试品溶液。
[0029]本专利技术的优选技术方案中，所述对照品溶液的配制方法为：精密称取N-亚硝胺类杂质适量，采用适宜溶剂溶解后定量稀释，作为对照品溶液。
[0030]本专利技术的优选技术方案中，所述对照品溶液的浓度为500-1000ng/ml。
[0031]本专利技术的优选技术方案中，所述溶剂选自本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种替格瑞洛的N-亚硝胺类杂质的分离检测方法，其特征在于：采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法，对替格瑞洛及其中间体中的N-亚硝胺类杂质进行检测。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述N-亚硝胺类杂质选自N-亚硝基二甲胺(NDMA)、N-亚硝基二乙胺(NDEA)、N-亚硝基哌啶中的一种或其组合。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：1)溶液配制；2)采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法进行检测。4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于：所述步骤2)的检测条件为：起始温度为35-50℃，维持0.5-2分钟，以每分钟10-30℃的速率升温至150-200℃，维持0-5分钟，以每分钟5-30℃的速率升温至200-300℃，维持1-5分钟；后进样口温度为200-250℃；氦气为载气，流速为每分钟1.0-5.0ml；分流进样，分流比为3-10:1，传输线温度为100-250℃；顶空进样，20ml顶空瓶装样1ml，顶空平衡温度100-150℃，定量环温度150-200℃，传输线温度150-200℃，平衡时间10-20min；采用单级四级杆质谱检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：红星，苗颖，肖锋，邓声菊，徐艳君，王田园，
申请(专利权)人：北京澳合药物研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：