一种针对表位点为SSCSSCPLSK的TCR所设计的引物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及质粒克隆技术领域。本发明专利技术提供了一种针对表位点为SSCSSCPLSK的TCR所设计的引物及其应用，所述引物对包括L11

【技术实现步骤摘要】
一种针对表位点为SSCSSCPLSK的TCR所设计的引物及其应用
[0001]本专利技术要求申请号为202110681798.0，申请日为2021年6月19日，专利名称为“一种针对表位点为SSCSSCPLSK的TCR所设计的引物及其应用”的中国专利申请的全部优先权。


[0002]本专利技术涉及质粒克隆
，尤其涉及一种针对表位点为SSCSSCPLSK的TCR所设计的引物及其应用。

技术介绍

[0003]载体是一种运载体(vehicle)，通过其可将多核苷酸序列(例如，外源基因)引入至宿主细胞中，以便转化宿主并促进引入的序列的表达(例如转录和翻译)。载体包括质粒、噬菌体、病毒等。载体的最普遍的类型是质粒，其是指闭合的环状双链DNA环，其中可连接含有目标基因的另外的DNA段。载体的另一种类型为病毒载体，其中将待运输的核酸构建体连接至病毒基因组中。病毒载体可在它们被引入的宿主细胞中自主复制、或可将它们自身整合至宿主细胞的基因组中，从而与宿主基因组一起复制。此外，某些载体可指导与其可操作连接的基因的表达。
[0004]要将某一目标基因片段克隆进质粒载体，必须有与目标基因片段序列相匹配的引物。我公司克隆到了3条针对免疫分型为HLA A11的病人体内的EBV病毒蛋白的SSCSSCPLSK表位点的TCR，并对这3条TCR的基因序列申请了专利保护。但是，现有技术中尚没有将此3条TCR的基因序列克隆进质粒载体的引物。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种引物对，用于质粒克隆。/>[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案。
[0007]本专利技术提供了一种引物对，所述引物对包括L11
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3位点的引物对、L11
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6位点的引物对和L11
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15位点的引物对中的一种、两种或三种。
[0008]作为优选，所述引物对针对分型为HLA A11、表位点为SSCSSCPLSK的患者体内EBV病毒抗原肽段的TCR所设计。
[0009]作为优选，所述L11
‑
3位点的引物对的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
[0010]作为优选，所述L11
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6位点的引物对的序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。
[0011]作为优选，所述L11
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15位点的引物对的序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。
[0012]作为优选，所述L11
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3位点的引物对的序列如SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示。
[0013]作为优选，所述L11
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6位点的引物对的序列如SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11所示。
[0014]作为优选，所述L11
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15位点的引物对的序列如SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.13所示。
[0015]本专利技术还提供了所述的引物对在质粒克隆中的应用。
[0016]本专利技术提供了一种针对表位点为SSCSSCPLSK的TCR所设计的引物及其应用，所述
引物对包括L11
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3位点的引物对、L11
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6位点的引物对和L11
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15位点的引物对中的一种、两种或三种。本专利技术的引物对针对分型为HLA A11、表位点为SSCSSCPLSK的患者体内EBV病毒抗原肽段的TCR所设计，能够实现特定质粒的克隆。
附图说明
[0017]图1为TCRPCR扩增后胶回收电泳结果；
[0018]图2为骨架载体质粒图谱；
[0019]图3为TCR与载体重组质粒酶切电泳结果；
[0020]图4为TCR与载体重组质粒测序峰图；
[0021]图5为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0022]图6为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测INFg；
[0023]图7为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测INFg。
具体实施方式
[0024]本专利技术提供了一种引物对，所述引物对包括L11
‑
3位点的引物对、L11
‑
6位点的引物对和L11
‑
15位点的引物对中的一种、两种或三种。
[0025]在本专利技术中，所述引物对针对分型为HLA A11、表位点为SSCSSCPLSK的患者体内EBV病毒抗原肽段的TCR所设计。
[0026]在本专利技术中，所述L11
‑
3位点的引物对的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
[0027]在本专利技术中，所述L11
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6位点的引物对的序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。
[0028]在本专利技术中，所述L11
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15位点的引物对的序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。
[0029]在本专利技术中，所述L11
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3位点的引物对的序列如SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示。
[0030]在本专利技术中，所述L11
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6位点的引物对的序列如SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11所示。
[0031]在本专利技术中，所述L11
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15位点的引物对的序列如SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.13所示。
[0032]在本专利技术中，所述L11
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3位点的引物对的模板序列如SEQ ID NO.14所示。
[0033]在本专利技术中，所述L11
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6位点的引物对的模板序列如SEQ ID NO.15所示。
[0034]在本专利技术中，所述L11
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15位点的引物对的模板序列如SEQ ID NO.16所示。
[0035]本专利技术还提供了所述的引物对在质粒克隆中的应用。
[0036]在本专利技术中，所述质粒优选为MP71。
[0037]在本专利技术中，所述质粒骨架为public available information。
[0038]在本专利技术中，所述MP71的序列如SEQ ID NO.7所示。
[0039]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0040]实施例1
[0041]引物对设计实例：以SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2为例。
[0042]Forwardprimer(SEQ ID NO.1):GGCCGCGCCACCATGCTGCTGATCA；
[0043]Reverse primer(SEQ ID NO.2):GTAGGTCCTCCACCACGGTCAGTCT本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种引物对，其特征在于，所述引物对包括L11
‑
3位点的引物对、L11
‑
6位点的引物对和L11
‑
15位点的引物对中的一种、两种或三种。2.根据权利要求1所述的一种引物对，其特征在于，所述引物对针对分型为HLA A11、表位点为SSCSSCPLSK的患者体内EBV病毒抗原肽段的TCR所设计。3.根据权利要求2所述的一种引物对，其特征在于，所述L11
‑
3位点的引物对的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。4.根据权利要求3所述的一种引物对，其特征在于，所述L11
‑
6位点的引物对的序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。5.根据权利要求1～4任意一...

【专利技术属性】
技术研发人员：张立峰，杨宏波，孟锦，
申请(专利权)人：广东天科雅生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：