抗PD-1抗体和其用途制造技术

本公开涉及所分离单克隆抗体或其抗原结合片段，所述所分离单克隆抗体或其抗原结合片段与PD

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗PD
‑
1抗体和其用途
[0001]优先权要求
[0002]本申请要求于2019年4月19日提交的美国临时申请第62/836,177号的权益。前述美国临时申请的全部内容通过引用并入本文。


[0003]本公开涉及抗PD
‑
1(程序性细胞死亡1)抗体、抗原结合片段以及其用途。

技术介绍

[0004]蛋白质程序性死亡1(PD
‑
1或PDCD1)是CD28受体家族的抑制成员，所述CD28受体家族还包含CD28、CTLA
‑
4、ICOS和BTLA。PD
‑
1在活化的B细胞、T细胞和髓样细胞上表达(Agata等人,见上文；Okazaki等人(2002)《当前免疫学观点(Curr.Opin.Immunol.)》14:391779
‑
82；Bennett等人(2003)《免疫学杂志l(J Immunol l)》70:711
‑
8)。PD
‑
1基因是55kDa I型跨膜蛋白，所述55kDa I型跨膜蛋白是Ig基因超家族的一部分(Agata等人(1996)《国际免疫学(Int Immunol)》8:765
‑
72)。PD
‑
1含有膜近端免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)和膜远端基于酪氨酸的开关基序(ITSM)(Thomas,M.L.(1995)《实验医学杂志(J Exp Med)》181:1953
‑
6；Vivier,E和Daeron,M(1997)《今日免疫学(Immunol Today)》18:286
‑
91)。虽然与CTLA
‑
4在结构上类似，但PD
‑
1缺少对于B7
‑
1和B7
‑
2结合至关重要的MYPPY基序。
[0005]T细胞接收正次级共刺激信号和负次级共刺激信号两者。此类正信号和负信号的调节对于最大化宿主的保护性免疫应答，同时维持免疫耐受性并预防自身免疫性至关重要。负次级信号似乎对诱导T细胞耐受是必须的，而正信号则促进T细胞活化。尽管简单的两信号模型为原初淋巴细胞提供了有效的解释，但宿主的免疫应答是动态过程，并且还可以向抗原暴露的T细胞提供共刺激信号。PD
‑
1是在活化的B细胞、T细胞和骨髓细胞上表达的CD28家族的抑制成员(Agata等人,见上文；Okazaki等人(2002)《当前免疫学观点》14:391779
‑
82；Bennett等人(2003)《免疫学杂志l》70:711
‑
8)并且提供负信号。
[0006]已经标识了PD
‑
1的两种配体PD
‑
Ll和PD
‑
L2。已显示所述配体在与PD
‑
1结合时下调T细胞活化(Freeman等人(2000)《实验医学杂志》192:1027
‑
34；Latchman等人(2001)《自然
‑
免疫学(Nat Immunol)》2:261
‑
8；Carter等人(2002)《欧洲免疫学杂志(Eur J Immunol)》32:634
‑
43)。PD
‑
Ll和PD
‑
L2两者均为与PD
‑
1结合但不与其它CD28家族成员结合的B7同源物。PD
‑
Ll在多种人类癌症中是丰富的(Dong等人(2002)《自然
‑
医学(Nat.Med.)》8:787
‑
9)。PD
‑
1与PD
‑
Ll之间的相互作用导致肿瘤浸润淋巴细胞减少，经过T细胞受体介导的增殖减少以及癌细胞的免疫逃避(Dong等人(2003)《分子医学杂志(J.Mal.Med.)》81:281
‑
7；Blank等人(2005)《癌症免疫学与免疫治疗(Cancer Immunol.Immunother.54:307
‑
314；Konishi等人(2004)《临床癌症研究(Clin.Cancer Res.)》10:5094
‑
100)。通过抑制PD
‑
1与PD
‑
Ll的局部相互作用可以逆转免疫抑制，并且当PD
‑
1与PD
‑
L2的相互作用也被阻断时，这种作用是加和的(Iwai等人(2002)《美国国家科学院院刊(Proc.Nat'l.Acad.Sci.USA)》99:12293
‑
7；Brown等人(2003)《免疫学杂志》170:1257
‑
66)。
[0007]在本领域中需要中和/阻断PD
‑
1负信号并刺激免疫应答，并且可以应用于治疗癌症和许多其它疾病的抗体或其抗原结合部分，包含嵌合抗体和人源化抗体。

技术实现思路

[0008]本公开提供了单克隆抗体或其抗原结合部分，所述单克隆抗体或其抗原结合部分与人PD
‑
1特异性结合并中和人PD
‑
1。小鼠中产生的单克隆抗体在人类中可以是免疫原性的。本公开还提供了根据所述小鼠抗体重新设计以降低人类中的免疫原性的人源化抗体。这些抗体在人类中具有改进的功效和安全性。
[0009]在一方面，本文提供了一种抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段与PD
‑
1(程序性细胞死亡蛋白1)结合，所述抗体或其抗原结合片段包括重链可变区(VH)，所述VH包括互补决定区(CDR)1、2和3。在一些实施例中，所述VH CDR1区包括与所选VH CDR1氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述VH CDR2区包括与所选VH CDR2氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，并且所述VH CDR3区包括与所选VH CDR3氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列；以及轻链可变区(VL)，所述VL包括CDR1、2和3。在一些实施例中，所述VL CDR1区包括与所选VL CDR1氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述VL CDR2区包括与所选VL CDR2氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，并且所述VL CDR3区包括与所选VL CDR3氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
[0010]在一些实施例中，所述所选VH CDR1、2和3氨基酸序列以及所述所选VL CDR1、2和3氨基酸序列为以下之一：
[0011](1)所述所选VH CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:8、9、10中列示，并且所述所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:5、6、7中列示；
[0012](2)所述所选VH CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:22、23、24中列示，并且所述所选VL CD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种与程序性细胞死亡蛋白1(Programed Cell Death Protein 1；PD
‑
1)结合的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包括：重链可变区(VH)，所述VH包括互补决定区(CDR)1、2和3，其中所述VH CDR1区包括与所选VH CDR1氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述VH CDR2区包括与所选VH CDR2氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，并且所述VH CDR3区包括与所选VH CDR3氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列；以及轻链可变区(VL)，所述VL包括CDR1、2和3，其中所述VL CDR1区包括与所选VL CDR1氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述VL CDR2区包括与所选VL CDR2氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，并且所述VL CDR3区包括与所选VL CDR3氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，其中所述所选VH CDR1、2和3氨基酸序列以及所述所选VL CDR1、2和3氨基酸序列为以下之一：(1)所述所选VH CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:8、9、10中列示，并且所述所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:5、6、7中列示；(2)所述所选VH CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:22、23、24中列示，并且所述所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:19、20、21中列示；(3)所述所选VH CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:74、75、76中列示，并且所述所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:71、72、73中列示；(4)所述所选VH CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:34、35、36中列示，并且所述所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:31、32、33中列示；(5)所述所选VH CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:54、55、56中列示，并且所述所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:51、52、53中列示；(6)所述所选VH CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:64、65、66中列示，并且所述所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:61、62、63中列示；(7)所述所选VH CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:44、45、46中列示，并且所述所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:41、42、43中列示。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VH包括具有分别在SEQ ID NO:8、9和10中列示的所述氨基酸序列的CDR1、2、3，并且所述VL包括具有分别在SEQ ID NO:5、6和7中列示的所述氨基酸序列的CDR1、2、3。3.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VH包括具有分别在SEQ ID NO:22、23和24中列示的所述氨基酸序列的CDR1、2、3，并且所述VL包括具有分别在SEQ ID NO:19、20和21中列示的所述氨基酸序列的CDR1、2、3。4.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VH包括具有分别在SEQ ID NO:74、75和76中列示的所述氨基酸序列的CDR1、2、3，并且所述VL包括具有分别在SEQ ID NO:71、72和73中列示的所述氨基酸序列的CDR1、2、3。5.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VH包括具有分别在SEQ ID NO:34、35和36中列示的所述氨基酸序列的CDR1、2、3，并且所述VL包括具有分别在SEQ ID NO:31、32和33中列示的所述氨基酸序列的CDR1、2、3。6.根据权利要求1到5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结
合片段与人PD
‑
1特异性结合。7.根据权利要求1到6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段是人源化抗体或其抗原结合片段。8.根据权利要求1到7中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段是单链可变片段(scFv)。9.一种核酸，其包括编码多肽的多核苷酸，所述多肽包括：(1)包括重链可变区(VH)的免疫球蛋白重链或其片段，所述VH包括互补决定区(CDR)1、2和3，所述互补决定区包括分别在SEQ ID NO:8、9和10中列示的氨基酸序列，并且其中所述VH当与包括在SEQ ID NO:2、16、28、38、48、58或68中列示的所述氨基酸序列的轻链可变区(VL)配对时与PD
‑
1结合；(2)包括VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:5、6和7中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VL当与包括在SEQ ID NO:4、18、30、40、50、60或70中列示的所述氨基酸序列的VH配对时与PD
‑
1结合；(3)包括重链可变区(VH)的免疫球蛋白重链或其片段，所述VH包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:22、23和24中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VH当与包括在SEQ ID NO:2、16、28、38、48、58或68中列示的所述氨基酸序列的轻链可变区(VL)配对时与PD
‑
1结合；(4)包括VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:19、20和21中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VL当与包括在SEQ ID NO:4、18、30、40、50、60或70中列示的所述氨基酸序列的VH配对时与PD
‑
1结合；(5)包括重链可变区(VH)的免疫球蛋白重链或其片段，所述VH包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:74、75和76中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VH当与包括在SEQ ID NO:2、16、28、38、48、58或68中列示的所述氨基酸序列的轻链可变区(VL)配对时与PD
‑
1结合；(6)包括VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:71、72和73中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VL当与包括在SEQ ID NO:4、18、30、40、50、60或70中列示的所述氨基酸序列的VH配对时与PD
‑
1结合；(7)包括VH的免疫球蛋白重链或其片段，所述VH包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:34、35和36中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VH当与包括在SEQ ID NO:2、16、28、38、48、58或68中列示的所述氨基酸序列的VL配对时与PD
‑
1结合；(8)包括VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:31、32和33中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VL当与包括在SEQ ID NO:4、18、30、40、50、60或70中列示的所述氨基酸序列的VH配对时与PD
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1结合；(9)包括VH的免疫球蛋白重链或其片段，所述VH包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:54、55和56中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VH当与包括在SEQ ID NO:2、16、28、38、48、58或68中列示的所述氨基酸序列的VL配对时与PD
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1结合；(10)包括VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:51、52和53中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VL当与包括在SEQ ID NO:4、18、30、40、50、60或70中列示的所述氨基酸序列的VH配对时与PD
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1结合；
(11)包括VH的免疫球蛋白重链或其片段，所述VH包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:64、65和66中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VH当与包括在SEQ ID NO:2、16、28、38、48、58或68中列示的所述氨基酸序列的VL配对时与PD
‑
1结合；(12)包括VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:61、62和63中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VL当与包括在SEQ ID NO:4、18、30、40、50、60或70中列示的所述氨基酸序列的VH配对时与PD
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1结合；(13)包括VH的免疫球蛋白重链或其片段，所述VH包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括分别在SEQ ID NO:44、45和46中列示的所述氨基酸序列，并且其中所述VH当与包括在SEQ ID NO:2、16、28、38、48、58或68中列示的所述氨基酸序列的VL配对时与PD
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1结合；(14)包括VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包括CDR1、2和3，所述CDR1、2和3包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：何为无，保罗，
申请(专利权)人：广东天科雅生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：