一种针对表位点为FLYALALLL的TCR所设计的引物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及质粒克隆技术领域。本发明专利技术提供了一种针对表位点为FLYALALLL的TCR所设计的引物及其应用，所述引物对包括L2

【技术实现步骤摘要】
NO.18所示；所述L2
‑
13位点的引物对的序列如SEQ ID NO.19和SEQ ID NO.20所示；所述L2
‑
16位点的引物对的序列如SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22所示；所述L2
‑
19位点的引物对的序列如SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.24所示；所述L2
‑
23位点的引物对的序列如SEQ ID NO.25和SEQ ID NO.26所示；所述L2
‑
24位点的引物对的序列如SEQ ID NO.27和SEQ ID NO.28所示；所述L2
‑
25位点的引物对的序列如SEQ ID NO.29和SEQ ID NO.30所示。作为优选，所述L2
‑
1位点的引物对的序列如SEQ ID NO.32和SEQ ID NO.33所示；所述L2
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2位点的引物对的序列如SEQ ID NO.34和SEQ ID NO.35所示；所述L2
‑
3位点的引物对的序列如SEQ ID NO.36和SEQ ID NO.37所示；所述L2
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5位点的引物对的序列如SEQ ID NO.38和SEQ ID NO.39所示；所述L2
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6位点的引物对的序列如SEQ ID NO.40和SEQ ID NO.41所示；所述L2
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9位点的引物对的序列如SEQ ID NO.42和SEQ ID NO.43所示；所述L2
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10位点的引物对的序列如SEQ ID NO.44和SEQ ID NO.45所示；所述L2
‑
11位点的引物对的序列如SEQ ID NO.46和SEQ ID NO.47所示；所述L2
‑
12位点的引物对的序列如SEQ ID NO.48和SEQ ID NO.49所示；所述L2
‑
13位点的引物对的序列如SEQ ID NO.50和SEQ ID NO.51所示；所述L2
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16位点的引物对的序列如SEQ ID NO.52和SEQ ID NO.53所示；所述L2
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19位点的引物对的序列如SEQ ID NO.54和SEQ ID NO.55所示；所述L2
‑
23位点的引物对的序列如SEQ ID NO.56和SEQ ID NO.57所示；所述L2
‑
24位点的引物对的序列如SEQ ID NO.58和SEQ ID NO.59所示；所述L2
‑
25位点的引物对的序列如SEQ ID NO.60和SEQ ID NO.61所示。
[0009]本专利技术还提供了所述的引物对在质粒克隆中的应用。
[0010]本专利技术提供了一种针对表位点为FLYALALLL的TCR所设计的引物及其应用，所述引物对包括L2
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1位点的引物对、L2
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2位点的引物对、L2
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3位点的引物对、L2
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5位点的引物对、L2
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6位点的引物对、L2
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9位点的引物对、L2
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10位点的引物对、L2
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11位点的引物对、L2
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12位点的引物对、L2
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13位点的引物对、L2
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16位点的引物对、L2
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19位点的引物对、L2
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23位点的引物对、L2
‑
24位点的引物对和L2
‑
25位点的引物对中的一种或多种。本专利技术的引物对针对分型为HLA A02、表位点为FLYALALLL的患者体内EBV病毒抗原肽段的TCR所设计，能够实现特定质粒的克隆。
附图说明
[0011]图1为TCRPCR扩增后胶回收电泳结果；
[0012]图2为骨架载体质粒图谱；
[0013]图3为TCR与载体重组质粒酶切电泳结果；
[0014]图4为TCR与载体重组质粒测序峰图；
[0015]图5为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0016]图6为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0017]图7为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0018]图8为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0019]图9为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0020]图10为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0021]图11为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0022]图12为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0023]图13为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0024]图14为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0025]图15为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0026]图16为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0027]图17为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0028]图18为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0029]图19为TCR转染Jurkat细胞，流式检测转染效率；
[0030]图20为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测IFN
‑
γ；
[0031]图21为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测IFN
‑
γ；
[0032]图22为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测CD69；
[0033]图23为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测CD69；
[0034]图24为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测CD69；
[0035]图25为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测CD69；
[0036]图26为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测CD69；
[0037]图27为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测CD69；
[0038]图28为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测CD69；
[0039]图29为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测IFN
‑
γ；
[0040]图30为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测CD69；
[0041]图31为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测CD69；
[0042]图32为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测CD69；
[0043]图33为TCR转染Jurkat细胞后，功能验证流式检测CD69；
[0044]图34为TCR转染Jurkat本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种引物对，其特征在于，所述引物对包括L2
‑
1位点的引物对、L2
‑
2位点的引物对、L2
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3位点的引物对、L2
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5位点的引物对、L2
‑
6位点的引物对、L2
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9位点的引物对、L2
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10位点的引物对、L2
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11位点的引物对、L2
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12位点的引物对、L2
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13位点的引物对、L2
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16位点的引物对、L2
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19位点的引物对、L2
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23位点的引物对、L2
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24位点的引物对和L2
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25位点的引物对中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的一种引物对，其特征在于，所述引物对针对分型为HLA A02、表位点为FLYALALLL的患者体内EBV病毒抗原肽段的TCR所设计。3.根据权利要求2所述的一种引物对，其特征在于，所述L2
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1位点的引物对的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；所述L2
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2位点的引物对的序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；所述L2
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3位点的引物对的序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示；所述L2
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5位点的引物对的序列如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示；所述L2
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6位点的引物对的序列如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示；所述L2
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9位点的引物对的序列如SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示；所述L2
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10位点的引物对的序列如SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14所示；所述L2
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11位点的引物对的序列如SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16所示；所述L2
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12位点的引物对的序列如SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18所示；所述L2
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13位点的引物对的序列如SEQ ID NO.19和SEQ ID NO.20所示；所述L2
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16位点的引物对的序列如SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22所示；所述L2
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【专利技术属性】
技术研发人员：张立峰，窦浪，贾杨彦圣，
申请(专利权)人：广东天科雅生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：