OsSGD1蛋白在提高水稻纹枯病抗病性中的应用制造技术

本发明专利技术公开了OsSGD1蛋白在提高植物纹枯病抗病性中的应用。本发明专利技术过表达OsSGD1基因提高植物纹枯病抗性，理论分析为OsSGD1蛋白通过调控植物抗病基因表达，提高植物抗病性。研究结果表明OsSGD1蛋白在提高植物纹枯病抗性中具有重要作用。本发明专利技术对于培育高纹枯病抗性植物具有重大的应用价值。物具有重大的应用价值。物具有重大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
OsSGD1蛋白在提高水稻纹枯病抗病性中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及OsSGD1蛋白在提高水稻纹枯病抗性中的应用。

技术介绍

[0002]纹枯病是我国水稻生成的三大病害之一，也是水稻生产的全球性重要病害。水稻纹枯病在我国各个水稻生产区域都有发生，水稻生产威胁极大，流行年份，一般减产10
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20%。在纹枯病重发区，其导致的水稻减产可达40
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50%，甚至绝收，严重危害我国的水稻生产。我国常年纹枯病发病面积300万公顷以上，纹枯病发病率之高，范围之广，损失程度之大，对国家粮食生产造成重大损失。近几年我国南方稻区纹枯病危害越来越严重。如，近几年江苏约95% 的稻田受到不同程度的纹枯病危害，受害田块一般减产10
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20%，严重田块减产超过50%。在东北地区，辽宁省纹枯病发生较重，已成为当地水稻的主要病害之一。在纹枯病较为严重的2014年，我国纹枯病危害面积超过为500万公顷，损失稻谷300多万吨，经济损失上百亿元。所以水稻纹枯病防治对国家水稻生产稳产有重要影响，抗病品种选育责任重大，具有广大应用前景。水稻纹枯病是水稻病害中流行情况最复杂、潜在威协最大的病害之一。因此通过利用抗性基因的方法，培育抗纹枯病水稻新材料，对提高水稻产量和粮食安全有重要作用。
[0003]专利技术人前期研究发现OsSGD1蛋白具有核酸结合活性，参与DNA复制，在水稻细胞周期调控中重要作用，从而影响水稻籽粒发育（CN 112795588 A）。过表达OsSGD1蛋白增加水稻籽粒的长度和宽度，从而提高了水稻籽粒的千粒重，增加水稻产量。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供OsSGD1蛋白在提高水稻纹枯病抗性中的应用。
[0005]OsSGD1蛋白具体来源于稻属亚洲栽培稻种02428品种（Oryza sativa L. 02428）。
[0006]OsSGD1蛋白在提高植物纹枯病抗病性中的应用。
[0007]所述OsSGD1蛋白为如下（a）或（b）或（c）所示的蛋白质：（a）氨基酸序列是序列表中SEQ ID NO：1所示的蛋白质；（b）将SEQ ID NO：1所示的蛋白质进行一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；（c）与（a）具有95%以上同一性且具有相同功能的蛋白质。
[0008]所述植物为禾本科植物水稻、小麦、燕麦或甘蔗。
[0009]所述OsSGD1蛋白的编码基因为如下（1）或（2）或（3）所述的DNA分子：（1）编码区如序列表中SEQ ID NO：2所示的DNA分子；（2）与（1）具有90%以上同一性且编码与提高纹枯病抗性相关的蛋白的DNA分子；（3）在严格条件下与（1）杂交且编码植物与提高纹枯病抗性相关的蛋白的DNA分子。
[0010]一种制备转基因植物的方法，包括如下步骤：在出发植物中导入OsSGD1基因，得到与所述出发植物相比增加了纹枯病抗性的转基因植物；所述OsSGD1基因为编码OsSGD1蛋白的基因。
[0011]一种植物育种的方法，包括如下步骤：提高目的植物中所述OsSGD1蛋白的活性和/或含量，从而提高植物纹枯病的抗病性。
[0012]以上任一所述方法中，“在出发植物中导入OsSGD1基因”是通过将重组表达载体导入出发植物实现的。所述重组表达载体为将所述OsSGD1基因插入植物表达载体得到的可以表达所述OsSGD1基因的质粒。所述重组表达载体具体可为：在pCAMBIA1307载体的多克隆位点（例如Xba与Xho酶切位点之间）插入序列表的序列2第1
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3645位核苷酸所示双链DNA分子得到的重组质粒pCAMBIA1307
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OsSGD1。
[0013]本专利技术的有益效果：本专利技术过表达OsSGD1基因提高植物纹枯病抗性，理论分析为OsSGD1蛋白通过调控植物抗病基因表达，提高植物抗病性。研究结果表明OsSGD1蛋白在提高植物纹枯病抗性中具有重要作用。本专利技术对于培育高纹枯病抗性植物具有重大的应用价值。
附图说明
[0014]图1为重组质粒pCAMBIA1307
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OsSGD1的元件示意图。
[0015]图2为转基因株系中OsSGD1基因的相对表达水平。
[0016]图3为水稻纹枯病发病及统计结果。
[0017]图4 为转基因株系中水稻抗病相关基因的相对表达水平。
具体实施方式
[0018]为了便于理解本专利技术，下面将对本专利技术进行更全面的描述。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。
[0019]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。将序列表SEQ ID NO：1所示的蛋白质命名为OsSGD1蛋白。水稻cDNA中， OsSGD1蛋白的编码区如序列表SEQ ID NO：2所示，将其命名为OsSGD1基因。
[0020]pCAMBIA1307载体，全称为pCAMBIA1307
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myc植物过表达载体：上海吉然生物科技有限公司，产品目录号为JR13080311。农杆菌LBA4404：行知生物科技有限公司，产品目录号为AABV02
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03。
[0021]实施例1转基因植物的获得一、重组质粒的构建1、提取水稻02428的总RNA，然后反转录得到cDNA。
[0022]2、以步骤1得到的cDNA为模板，采用F1和R1组成的引物对进行PCR扩增，回收PCR扩增产物。
[0023]F15'
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CGGTATCTAGAACTAGTGGAATGTCGACGGCCGCCAAGGAGG
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3'R1：5'
‑ꢀ
GGGCCCCCCCTCGAGGTCCACTGAGGAGCGCTCCAAACTGC
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3'。
[0024]3、用限制性内切酶Xba与Xho双酶切步骤2得到的PCR扩增产物，回收酶切产物。
[0025]4、用限制性内切酶Xba与Xho双酶切pCAMBIA1307载体，回收载体骨架。
[0026]5、将步骤3得到的酶切产物和步骤4得到的载体骨架连接，得到重组质粒pCAMBIA1307
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OsSGD1。根据测序结果，对重组质粒pCAMBIA1307
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OsSGD1进行结构描述如下：在pCAMBIA1307载体的Xba与Xho酶切位点之间插入了序列表的序列1第1
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2424位核苷酸所示的双链DNA分子。重组质粒pCAMBIA1307
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OsSGD1的元件示意图见图1。
[0027]二、转基因OsSGD1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.OsSGD1蛋白在提高植物纹枯病抗病性中的应用。2.根据权利要求1所述OsSGD1蛋白在提高植物纹枯病抗病性中的应用，其特征在于，所述OsSGD1蛋白为如下（a）或（b）或（c）所示的蛋白质：（a）氨基酸序列是序列表中SEQ ID NO：1所示的蛋白质；（b）将SEQ ID NO：1所示的蛋白质进行一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；（c）与（a）具有95%以上同一性且具有相同功能的蛋白质。3.根据权利要求1所述OsSGD1蛋白在提高植物纹枯病抗病性中的应用，其特征在于，所述植物为禾本科植物水稻、小麦、燕麦或甘蔗。4.根据权利要求1所述OsSGD1蛋白在提高植物纹枯病抗病性中的应用，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：张执金，靳茜，张海文，朱莉，王嘉翼，李梓萱，李华，
申请(专利权)人：保定学院，
类型：发明
国别省市：