一种检测灵芝属真菌中性三萜的方法技术

本发明专利技术提供了一种检测灵芝属真菌中性三萜的方法，该方法包括如下步骤：(1)灵芝子实体的预处理步骤；(2)超高效液相色谱检测步骤；(3)化合物质谱信息获得步骤；(4)超高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种检测灵芝属真菌中性三萜的方法


[0001]本专利技术涉及食品药品分析领域，具体的说涉及一种检测灵芝属真菌中性三萜的方法。

技术介绍

[0002]灵芝属(Ganoderma P.Karst)隶属于担子菌门(Basidiomycota)，伞菌纲(Agaricomycetes)，多孔菌目(Polyporales)，灵芝科(Ganodermataceae)，是高等担子菌的一个重要类群,共有137个种。其中，赤芝(Ganoderma lucidum)和紫芝(Ganoderma sinense)被中国药典规定可以作为药材使用，赤芝、紫芝和松杉灵芝(Ganoderma tsugae)一起，可以作为保健食品开发的原料。灵芝属真菌中含有种类丰富的三萜化合物，是其主要活性成分之一，具有多种生理活性。这些三萜化合物，可以通过酸碱萃取的方式分成两类，即酸性三萜和中性三萜。酸性三萜主要为灵芝酸、灵芝烯酸和赤芝酸类化合物，例如灵芝酸Ganoderic acid A、B、C2、D、E、F，灵芝烯酸Ganoderenic acid A、B、D，赤芝酸lucidenic a本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测灵芝属真菌中性三萜的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：(1)灵芝子实体的预处理步骤：将灵芝子实体样品加入有机溶剂进行提取，取上清液，过滤，稀释，得到待测样品溶液；配制12个中性三萜化合物的混合标准品溶液；(2)超高效液相色谱检测步骤：对待测样品溶液和12个三萜化合物的混合标准品溶液进行超高效液相色谱分离，以获得较好的分离度；(3)化合物质谱信息获得步骤：利用质谱优化软件Agilent Optimizer，对12个中性三萜化合物进行母离子扫描、子离子对的检出以及最佳碰撞能的寻找；(4)超高效液相色谱
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三重四级杆质谱联用分析方法建立步骤：在数据采集软件AgilentMassHunter Data Acquisition中，在超高效液相色谱分析条件和三重四级杆质谱检测条件下，导入保留时间，母离子、子离子对，建立12个中性三萜化合物的动态多反应监测DMRM分析测定方法；同时，对不同浓度的混合标准品溶液和待测样品溶液进行上样测定；(5)数据分析步骤：运用定量分析软件Agilent MassHunter Quantitative Analysis，创建12个中性三萜化合物的标准曲线，对所建方法进行方法学验证，并对灵芝子实体待测样品溶液进行定量分析。2.根据权利要求1所述的检测灵芝属真菌中性三萜的方法，其中步骤(1)中灵芝子实体的预处理步骤中：所用有机溶剂为甲醇或乙醇中的一种；提取方法为超声提取或66℃加热提取；提取时间为16
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96min；料液比为1:26
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1:46，重量体积比，重量g：体积ml；取提取上清液用6.26μm孔径的有机相微孔滤膜过滤,然后用质谱级甲醇稀释26倍即获得进样用待测样品溶液。3.根据权利要求1所述的检测灵芝属真菌中性三萜的方法，其中步骤(2)中超高效液相色谱分离的色谱条件为：选用Agilent ZORBAX SB
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Aq色谱柱，1.8μm，2.1
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156mm，检测波长：246nm。柱温：35℃；上样量为2μL。流速：6.4mL/min。流动相：6.61％醋酸水(A)
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甲醇(B)。洗脱程序：6min，26％A，86％B；8min，26％A，86％B；16min，16％A，96％B；15min，6％A，166％B；18min，6％A，166％B。4.根据权利要求1所述的检测灵芝属真菌中性三萜的方法，其中通过质谱优化软件Agilent Optimizer，获得步骤(3)中分析所需的各化合物的保留时间、母离子、子离子对及碰撞能信息如下：Ganodermanontriol，保留时间：3.79min；母离子：455.6；定量离子：165.1，碰撞能：86；定性离子：167.6，碰撞能：37；23S
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hydroxy
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11,15
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dioxo
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【专利技术属性】
技术研发人员：冯娜，张劲松，程池露，王晨光，唐庆九，周帅，冯杰，王金艳，周靖，
申请(专利权)人：上海百信生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：