一种恶臭假单胞菌及其在降解白酒废水中总氮的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种恶臭假单胞菌及其在降解白酒废水中总氮的应用，属于微生物降解技术领域，该恶臭假单胞菌命名为Pseudomonas putida WL

【技术实现步骤摘要】
一种恶臭假单胞菌及其在降解白酒废水中总氮的应用


[0001]本专利技术涉及微生物降解
，具体涉及到一种恶臭假单胞菌及其在降解白酒废水中总氮的应用。

技术介绍

[0002]白酒酿造作为中国传统酿造产业，近几年迅猛发展，白酒产量呈上升态势，但生产过程中会产生大量的白酒废水。白酒废水主要来源于含高有机物浓度的蒸馏锅底水、发酵盲沟水、蒸馏工段地面冲洗水、酒库的渗漏水、“下沙”和“糙沙”工艺操作期间的高粱冲洗水和浸泡水等，由于其COD、SS值(水质悬浮物)高，pH值呈酸性，成分复杂，且废水中有机物、氮、磷浓度高，色度高，处理难度较大，这给白酒企业带来了极大的环境压力和经济压力。
[0003]目前，白酒废水一般采用厌氧
‑
好氧为主的多级治理工艺，以达到《发酵酒精和白酒工业水污染物排放标准》(GB27631
‑
2011)。该工艺可以有效降解白酒废水中大部分有机物，但含氮化合物依然较高，从而需进一步生物脱氮。传统生物的脱氮技术是基于微生物硝化作用和反硝化作用的两个独立过程进行。第一个阶段由硝化作用在好氧条件下，将水中的氨氮转化为NO2‑
N和NO3‑
N，以此硝化产物为底物进行反硝化作用。第二阶段的反硝化作用中，反硝化菌将硝态氮与亚硝态氮进一步转化氮气，达到了将水体中氮离子去除的目的。随着技术进步，异好氧反硝化菌逐渐进入人们视野，该菌能够在好氧条件下同时进行硝化和反硝化作用。好氧反硝化细菌在生物脱氮过程中具有关键作用。因此，好氧反硝化细菌的筛选对白酒废水中总氮的去除具有重要意义。但是迄今为止还未见恶臭假单胞菌降解白酒废水中总氮的报道。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中存在的上述问题，本专利技术的目的是提供一种恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)及其在降解白酒废水中总氮的应用，该菌株具有易培养、强的耐高温、耐酸碱能力、优异的好氧反硝化能力和总氮降解率高的特点。
[0005]为达上述目的，本专利技术采取如下的技术方案：
[0006]本专利技术提供一种恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)，该菌株筛选于白酒厂污水处理站的活性污泥，命名为Pseudomonas putida WL
‑
2，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏日期为2021年6月28日，保藏编号为GDMCC NO:61748。
[0007]本专利技术还提供上述恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)在降解白酒废水中总氮的应用。
[0008]进一步地，该恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)在降解白酒废水中总氮的应用，包括以下步骤：
[0009]步骤(1)：制备恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)活化菌液；
[0010]步骤(2)：将步骤(1)所得的活化后的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)菌液投入白酒废水中，进行降解。
[0011]进一步地，步骤(1)中恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)活化菌液的浓度为2
×
107～10
×
107CFU/mL。
[0012]进一步地，步骤(2)中白酒废水中总氮浓度为4500～5000mg/L。
[0013]进一步地，步骤(2)中降解的条件为：降解温度为25～30℃，转速为150～210r/min，降解时间为24～48h。
[0014]进一步地，恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)的接种量为1～5wt％。
[0015]进一步地，恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)活化菌液的制备方法包括以下步骤：
[0016]1)、将恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)菌株接种于种子液培养基中，置于25～30℃、150～210r/min摇床培养12～24h后，即得种子液；
[0017]2)、取富集液体培养基置于锥形瓶，灭菌冷却后，在无菌操作台上接入步骤1)所得的4～8wt％的种子液，然后置于25～30℃、150～210r/min摇床培养1～2天，即得恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)活化菌液。
[0018]进一步地，步骤1)中种子液培养基配方中包括以下重量份的组份：酵母浸膏3～7份、蛋白胨8～12份、磷酸二氢钾0.1～0.4份、磷酸氢二钾0.1～0.4份、硫酸镁0.1～0.4份和蒸馏水800～1100份。
[0019]进一步地，步骤2)中富集液体包括以下重量份的组份：葡萄糖14～18份、蛋白胨4～8份、硫酸镁0.5～1.5份、磷酸二氢钾1～4份和蒸馏水800～1100份。
[0020]进一步地，步骤2)中富集液体的pH为6.5～7.5。
[0021]进一步地，培养基均采用120～125℃灭菌20～30min。
[0022]综上所述，本专利技术具有以下优点：
[0023]1、白酒废水呈酸性(pH约5.95～6.85)，普通的硝化菌株无法大量生长，本专利技术中提供的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
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2)对环境适应性强，易培养。
[0024]2、白酒废水属于高浓度有机废水，其总氮含量高，本专利技术中提供的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)具备较高降解总氮的能力。且该菌株经多次传代培养，菌株依旧稳定遗传，且降解能力稳定；在传代过程中，并未出现明显的变异菌株。
[0025]3、本专利技术中恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)是好氧反硝化菌，能够在好氧条件下同时进行硝化和反硝化作用，对白酒废水中总氮降解率达60～85％，为白酒废水生物脱氮过程中提供了重要菌株，对白酒废水降解总氮具有实际的应用价值。
附图说明
[0026]图1是本专利技术中恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)在LB平板培养基上的菌落形态图；
[0027]图2是本专利技术中恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)经革兰氏染色后的结果图；
[0028]图3是本专利技术中恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
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2)扫描电镜图；
[0029]图4是本专利技术中恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑
2)序列进化树图；
[0030]图5是本专利技术中恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida WL
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)，其特征在于，所述恶臭假单胞菌命名为Pseudomonas putida WL
‑
2，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏日期为2021年6月28日，保藏编号为GDMCC NO:61748。2.权利要求2所述的恶臭假单胞菌Pseudomonas putida WL
‑
2在降解白酒废水中总氮方面的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：步骤(1)：制备恶臭假单胞菌Pseudomonas putida WL
‑
2活化菌液；步骤(2)：将步骤(1)所得的活化后的恶臭假单胞菌Pseudomonas putida WL
‑
2菌液投入白酒废水中，进行降解。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中恶臭假单胞菌Pseudomonas putida WL
‑
2活化菌液的浓度为2
×
107～10
×
107CFU...

【专利技术属性】
技术研发人员：方春玉，吕枫，安明哲，赵长青，寇治刚，赵兴秀，苏建，张富勇，
申请(专利权)人：四川轻化工大学，
类型：发明
国别省市：