靶向CD24的抗体及其制备和用途制造技术

本申请提供一种与CD24特异结合的单克隆抗体或其抗原结合部分。还提供编码该抗体或其抗原结合部分的核酸分子、包含该核酸分子的表达载体和宿主细胞、制备该抗体或其抗原结合部分的方法，以及使用该抗体或其抗原结合部分来治疗与CD24过表达相关的疾病的方法。治疗与CD24过表达相关的疾病的方法。治疗与CD24过表达相关的疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
靶向CD24的抗体及其制备和用途
专利

[0001]本申请涉及一种特异结合CD24的单克隆抗体或其抗原结合部分、及其制备和用途，特别是其在肿瘤治疗中的用途。

技术介绍

[0002]癌细胞已经发展出一些逃避宿主免疫监视的机制，包括：1)通过高表达膜蛋白CD24，与免疫细胞表面的Siglec
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10受体结合，从而抑制免疫激活，来逃避巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞的免疫监视；2)通过高表达CD47来逃避巨噬细胞(Mφ)的免疫监视，CD47与巨噬细胞表面上的信号调节蛋白α(SIRPα)结合，从而引发抑制性信号的生成，该抑制信性号抑制巨噬细胞对癌细胞的吞噬作用。可以看出，癌细胞相当聪明，可以基于它们发展出的逃避机制而迅速增殖。因此，有效杀灭癌细胞的抗癌药物的开发可以针对这些机制。
[0003]CD24和Siglec
‑
10
[0004]唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素(Siglecs)是一种免疫球蛋白样I型跨膜蛋白。在Siglecs家族中，Siglec
‑
10是一种抑制性受体，广泛表达于巨噬细胞、B细胞、NK细胞和活化的T细胞等免疫细胞上。它有五个细胞外Ig样结构域、一个跨膜区和一个胞质尾区。Siglec
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10的IgV结构域包含一个关键的精氨酸残基，它与唾液酸的识别有关(Yin，et al.，2020)。已知T细胞上的Siglec
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10表达通过抑制T细胞主要组织相容性复合物I类(MHC
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I)肽复合物的形成和T细胞受体相关激酶Lck和ZAP
‑
70的磷酸化来干扰T细胞活化(Yin，et al.，2020)。B细胞和NK细胞上表达的Siglec
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10能够抑制BCR介导和NK细胞受体介导的信号转导(Yin，et al.，2020)。
[0005]CD24是一种糖基
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磷脂酰肌醇锚定蛋白，存在于发育中的T淋巴细胞和大多数B淋巴细胞的表面(Yin et al.，2020)。很多癌细胞，包括卵巢癌、乳腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌、急性淋巴细胞白血病(ALL)、胆管癌、膀胱癌、胰腺癌、胃腺癌和胶质母细胞瘤，也高表达CD24(Barkal et al.，2019；Liu et al.，2013)。癌细胞上的CD24与免疫细胞上的Siglec
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10相互作用，产生“不要吃我”的信号，用于免疫逃避和保护肿瘤细胞免受免疫攻击。
[0006]研究表明CD24表达与膀胱肿瘤复发存在相关性(Liu et al.，2013)。在卵巢癌患者中，CD24的表达是总生存期的独立预测因子，并与肿瘤分期、腹膜和淋巴结转移相关；CD24阳性细胞增殖增强，是一种高度侵袭性的表型，并且与卵巢癌细胞的顺铂耐药性相关(Nakamura et al.2017)。
[0007]研究表明CD24单克隆抗体能够在膀胱癌和三阴性乳腺癌的小鼠模型中，减少肺部转移并且延长总体存活期。文献还表明，通过抗体阻断CD24
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Siglecs 10相互作用能够经巨噬细胞引起肿瘤生长减少，并且延长荷瘤小鼠的生存期(Barkal，et al.，2019；Chan et al.，2019；Overdevest et al.，2011)。
[0008]此外，之前的研究表明CD47/CD24双特异性抗体可以有效激活大脑中的髓系免疫(WuH，et al，2021)。CD24抗体和CD47抗体的联合用药可增强对人卵巢癌细胞的吞噬作用
(Barkal et al.，2019)。Barakal等人还发现，与单独治疗相比，CD24抗体和西妥昔单抗联合治疗进一步增强了对胰腺癌细胞的吞噬作用，这表明包含CD24中和的联合疗法可能会产生协同抗肿瘤作用。
[0009]另有研究表明，CD24上调还与急性移植物抗宿主病(Toubai，T.，et al.，2014)、抗艾滋鸡尾酒疗法引起的炎症反应(包括肝脂肪变性和纤维化、低密度脂蛋白症等)(Tian，R.R.，et al.，2018)、代谢相关脂肪性肝病(Fairbridge，N.A.，et al.，2015)、糖尿病(E1
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Mokhtar，M.A.，et al.，2020)、多发性硬化症、风湿性关节炎、系统性红斑狼疮(Tan，Y.，et al.，2016)、败血症(Chen，G.Y.，et al.，2011)等多种疾病有着紧密联系。正在进行的很多临床试验中，也显示了CD24过表达在上述疾病中的作用(参见参考文献8
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16)。
[0010]领域内需要更多具有所需特性的CD24抗体。
[0011]对于本申请中任何文件的引用，并不等同于承认这些文件是本申请的现有技术。

技术实现思路

[0012]本申请提供一种新的CD24抗体或其抗原结合部分，其可以结合CD24
+
细胞，引发对于CD24
+
细胞的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)，还具有强劲的体内抗肿瘤效果。特别地，通过施用一定剂量的本申请CD24抗体，可以彻底消除荷肿瘤动物体内的肿瘤。而且，在彻底消除肿瘤后再次植入肿瘤细胞，在不继续给药的情况下，不会成瘤。
[0013]因此，在一个方面，本申请涉及一种分离的单克隆抗体、或其抗原结合部分，其与CD24结合，可以含有i)重链可变区，该重链可变区含有VH
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CDR1区、VH
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CDR2区和VH
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CDR3区，其中，VH
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CDR1区、VH
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CDR2区和VH
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CDR3区可以分别包含如SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，或与上述序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或ii)轻链可变区，该轻链可变区含有VL
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CDR1区、VL
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CDR2区和VL
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CDR3区，其中，VL
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CDR1区、VL
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CDR2区和VL
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CDR3区可以分别包含如SEQ ID NOs：4、5、和6所示的氨基酸序列，或与上述序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
[0014]本申请单克隆抗体或其抗原结合部分的重链可变区可以包含如SEQ IDNOs：7或10所示的氨基酸序列，或与上述序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
[0015]本申请的单克隆抗体或其抗原结合部分的轻链可变区可以包含如SEQ ID NOs：8、9或11所示的氨基酸序列，或与上述序列具有至少80％本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，与CD24结合，包含重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包含HV
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CDR1区、HV
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CDR2区和HV
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CDR3区，该轻链可变区包含LV
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CDR1区、LV
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CDR2区和LV
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CDR3区，其中HV
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CDR1区、HV
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CDR2区、HV
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CDR3区、LV
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CDR1区、LV
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CDR2区和LV
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CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NOs:1、2、3、4、5和6所示。2.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区包含SEQ ID NOs:7或10所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述轻链可变区包含SEQ ID NOs:8、9或11所示的氨基酸序列。4.根据权利要求2所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区和所述轻链可变区分别包含i)SEQ ID NOs:7和8；ii)SEQ ID NOs:7和9；或iii)SEQ ID NOs:10和11所示的氨基酸序列。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：田文志，李松，陈典泽，郭慧琴，
申请(专利权)人：宜明昂科生物医药技术上海有限公司，
类型：发明
国别省市：