原人参二醇及其衍生物和PD-L1/PD-L2抗体联合治疗癌症的方法技术

本发明专利技术公开了原人参二醇及其衍生物与PD-L1/PD-L2抗体组合联用可以提高对肺癌的抗肿瘤治疗效果，同时减轻副作用。通过该组合用药治疗，可以有效地治疗癌症。可以有效地治疗癌症。可以有效地治疗癌症。

【技术实现步骤摘要】
L1/PD-L2的剂量为10mg/kg。
[0009]原人参二醇是人参皂苷是主要的活性成分。人参中含有多种类型化学成分，如皂苷类、挥发油类、多糖类、氨基酸和多肽类、微量元素等，其中人参皂苷属于三萜类皂苷，目前可分为3类
①
原人参二醇型，主要有人参皂苷Rb1,Rb2,Rc,Rd,Rh2等；
②
原人参三醇型，有人参皂苷Re,Rf,Rg1,Rg2,Rh1。等；
③
齐墩果酸型，有人参皂苷Ro,Rh1,Ri,F4等。其中原人参二醇(20(S)-原人参二醇)化学名称：Dammar-24-ene-3,12,20-triol,(3beta,12beta,20R)-；(3beta,5xi,12beta,14beta,20R)-dammar-24-ene-3,12,20-triol，分子量460.70，分子式C30H5203，结构式如式Ⅰ：
[0010]本领域技术人员可以在式Ⅰ结构基础上对其结构集团进行改构，获得原人参二醇衍生物；本专利技术选用的原人参二醇衍生物如下式：式Ⅱ所示的原人参二醇衍生物的名称为达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇；式Ⅲ所示的原人参二醇衍生物的名称为达玛-20S-24(S)-环氧-3β,12β,25-三醇。
[0011][0012][0013]本专利技术提供一种结合原人参二醇及其衍生物和PD-L1/PD-L2抗体治疗癌症的药物组合，其包括向所述受试者施用：a)治疗有效量的至少一种PD-L1/PD-L2抗体，以及b)治疗有效量的原人参二醇及其衍生物药物；以及其中所述疾病、病症或病状是肺癌或其他各类优选表达PD-L1和/或PD-L2的良性或恶性肿瘤。
[0014]所述原人参二醇及其衍生物的多种有效成分包括原人参二醇及其衍生物I、原人参二醇及其衍生物ⅡA、原人参二醇及其衍生物ⅡB、隐原人参二醇及其衍生物、异隐原人参二醇及其衍生物等10余个原人参二醇及其衍生物单体。
[0015]所述原人参二醇及其衍生物和PD-L1/PD-L2抗体治疗癌症的药物组合施用借助于腹腔注射。
[0016].一种药物组合物，其包含a)治疗有效量的所述的PD-L1/PD-L2抗体和药学上可接
受的稀释剂、载体或赋形剂；以及b)治疗有效量的所述的原人参二醇及其衍生物药物和药学上可接受的稀释剂、载体或衍生物。
[0017]上述组合物中所述赋形剂是等渗注射溶液。
[0018]上述组合物中所述阴性对照抗体是IgG。
[0019]上述组合物中所述受试者可以是人、小鼠、大鼠、狗等。
附图说明
[0020]图1为本专利技术实施例1中测定实验药物的IFNG+CD8+T细胞数量变化图
[0021]图2为本专利技术实施例1中测定实验药物的Grz B+CD8+T细胞数量变化图
[0022]图3为本专利技术实施例1中测定实验药物的Treg细胞数量变化图
[0023]图4为本专利技术实施例1中测定实验药物的小鼠肿瘤大小与重量图
[0024]图5为本专利技术实施例1中测定实验药物的小鼠生存期图
具体实施方式
[0025]以下通过实施例和试验例来进一步说明本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。
[0026]实施例1原人参二醇及其衍生物和PDL1药物组合对小鼠非小细胞肺癌模型的治疗作用
[0027]实验仪器：
[0028]5％CO2、95％O2的恒温恒湿37℃培养箱
[0029]实验药物及试剂
[0030]PD-L1抗体(鼠源PD-L1抗体，CD297 bioxcell)原人参二醇(自制纯度99％)、原人参二醇衍生物(自制纯度99％)、90％的DMEM培养基(Dulbecco's modified Eagle's medium，Gibco BRL,USA)。10％FBS胎牛血清(fetal bovine serum，Gibco BRL,USA)。无菌水、啮齿动物饲料(北京KeAoXieLi)
[0031]实验细胞
[0032]Lewis鼠源性肺腺癌细胞株(LLC)，购自中国医学科学院细胞培养中心(Cell Culture Centerof Chinese Academy of Medical Sciences；CAMS；中华人民共和国，北京)。
[0033]实验动物
[0034]采用健康SPF级雌性C57BL/6小鼠60只，体重20-22g，6周龄；购自中华人民共和国北京CAMS的实验动物科学研究院(Institute of LaboratoryAnimal Science)
[0035]实验方法
[0036]肿瘤细胞接种
[0037]LLC细胞培养，传代；在细胞对数期收集细胞，做成5
×
10^5个/ml的细胞悬液，C57BL/6小鼠右侧腋下注射100ul细胞悬液后，待肿瘤的直径达到7-9mm时开始治疗。
[0038]实验分组及给药
[0039]将接种成功的C57BL/6小鼠随机分为6组，每组10只，通过剪脚趾对每组进行编号。分组后，每组每日均正常饲养。实验动物共分成
[0040]模型组：腹腔注射(1mg/ml)IgG抗体10mg/kg；
[0041]PD-L1组：腹腔注射(1mg/ml)PD-L1/PD-L2抗体10mg/kg；
[0042]PPD组：腹腔注射(1mg/ml)原人参二醇50mg/kg；
[0043]PPD衍生物组：腹腔注射(1mg/ml)原人参二醇衍生物(达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇)50mg/kg；
[0044]PPD+PD-L1组：腹腔注射(1mg/ml)PD-L1/PD-L2抗体10mg/kg+(1mg/ml)原人参二醇50mg/kg；
[0045]PPD衍生物+PD-L1组：腹腔注射(1mg/ml)PD-L1/PD-L2抗体10mg/kg+(1mg/ml)原人参二醇衍生物(达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇)50mg/kg。
[0046]PPD、IgG每天给药一次，连续给药14天。PD-L1抗体四天给一次，一共给药4次，14天后每组处死7只小鼠。
[0047]实验结果
[0048]原人参二醇及其衍生物与PDL1对肿瘤里T细胞数量的影响：
[0049]利用尼龙毛纤维法提取小鼠外周血总T细胞，调整细胞个数约2
×
106个/ml，用APC标记IFN-γ，FITC标记CD8+T Cell,避光孵育30min，用流式细胞术检测LLC细胞荷瘤裸鼠外周血IFNG+CD8+T细胞数量变化，实验结果见表1和图1。
[0050]表1：
[0051][0052]注：PD-L1组，PPD+PD-L1组，与服用IgG抗体的模型组相比，P<0.05
[0053]PE标记Grz B,同法标记CD8+T Cell，避光孵育30min，用流式细胞术检测LLC细胞荷本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种结合原人参二醇及其衍生物和PD-L1/PD-L2抗体治疗癌症的药物组合，其包括向所述受试者施用：a)治疗有效量的至少一种免疫检查点的抑制剂，所述抑制剂为PD-L1/PD-L2抗体；b)治疗有效量的原人参二醇及其衍生物药物；其中所述疾病、病症或病状是肺癌或其他各类优选表达PD-L1和/或PD-L2的良性或恶性肿瘤。2.根据权利要求1所述，本发明中原人参二醇及其衍生物与PD-L1/PD-L2抗体用量比为5:1。3.根据权利要求1所述，本发明中原人参二醇及其衍生物的用量为50mg/kg。4.根据权利要求1所述，本发明中PD-L1/PD-L2抗体的用量为10mg/kg。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述原人参二醇及其衍生物的多种有效成分包括原人参二醇及其衍生物I、原人...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘珂，范华英，寇丽娟，刘明，
申请(专利权)人：山东铂源生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：