抗HER2抗体－吡咯并苯并二氮杂卓衍生物偶联物制造技术

本发明专利技术涉及一种新型抗HER2抗体－吡咯并苯并二氮杂卓(PBD)衍生物偶联物、使用了该抗体－药物偶联物的对于肿瘤具有治疗效果的医药品、以及使用了该抗体－药物偶联物或医药品的肿瘤的治疗方法。的肿瘤的治疗方法。的肿瘤的治疗方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗HER2抗体－吡咯并苯并二氮杂卓衍生物偶联物


[0001]本专利技术涉及一种新型抗HER2抗体和包含该抗体的抗体－药物偶联物。

技术介绍

[0002]抗体－药物偶联物(Antibody－Drug Conjugate；ADC)在癌症治疗等中得以使用，例如，与癌细胞表面所表达的抗原结合，对于通过该结合能够将抗原在细胞内内化的抗体，结合具有细胞毒活性的药物。ADC能够通过将药物高效地送达癌细胞，能够期待使药物蓄积于癌细胞内，使癌细胞死亡。
[0003]作为ADC所使用的药物中有效药物之一，可举出吡咯并苯并二氮杂卓(PBD)。PBD通过与DNA小沟的PuGPu序列等结合而显示细胞毒性。作为来源于天然的PBD的安曲霉素(anthramycin)在1965年被首次发现，至此以后各种来源于天然、或其类似物的PBD被发现(非专利文献1～4)。
[0004]PBD的结构通式由下述的式表示。
[0005][0006]已知PBD在A、C环部上的取代基的数目、种类、部位各不相同，此外，在B、C环部的不饱和度各不相同。
[0007]已知PBD通过形成二聚体结构而使细胞毒性大幅度地提高(非专利文献5、6)，也有将二聚体PBD进行ADC化的各种报告(专利文献1～15)。然而，在C2位具有螺环的PBD或其ADC体是未知的。
[0008]人上皮生长因子受体2(HER2)为属于受体蛋白质酪氨酸激酶的上皮生长因子受体亚家族的膜贯通受体(非专利文献7～12)。
[0009]报告了HER2在乳腺癌、胃癌等各种癌症种类中过量表达(非专利文献13～18)，在乳腺癌中为负的预后因素(非专利文献19、20)。作为对于HER2过量表达癌症有效的抗HER2药，已知曲妥珠单抗(trastuzumab)、曲妥单抗(kadcyla)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、拉帕替尼(lapatinib)等。
[0010]然而，响应性、活性的强度、以及适应范围还不充分，以HER2作为标的的不充足的需求尚存。
[0011]现有技术文献
[0012]专利文献
[0013]专利文献1：国际公开第2013/173496号
[0014]专利文献2：国际公开第2014/130879号
[0015]专利文献3：国际公开第2017/004330号
[0016]专利文献4：国际公开第2017/004025号
[0017]专利文献5：国际公开第2017/020972号
[0018]专利文献6：国际公开第2016/036804号
[0019]专利文献7：国际公开第2015/095124号
[0020]专利文献8：国际公开第2015/052322号
[0021]专利文献9：国际公开第2015/052534号
[0022]专利文献10：国际公开第2016/115191号
[0023]专利文献11：国际公开第2015/052321号
[0024]专利文献12：国际公开第2015/031693号
[0025]专利文献13：国际公开第2011/130613号
[0026]专利文献14：国际公开第2005/040170号
[0027]专利文献15：国际公开第2017/137556号
[0028]非专利文献
[0029]非专利文献1：Angewandte Chemie Internationl Edition 2016，55，2－29
[0030]非专利文献2：Chemical Reviews 2010，111，2815－2864
[0031]非专利文献3：In Antibiotics III.Springer Verlag，New York，pp.3－11
[0032]非专利文献4：Accounts of Chemical Research 1986，19，230
[0033]非专利文献5：Journal of the American Chemical Society 1992，114，4939
[0034]非专利文献6：Journal of Organic Chemistry 1996，61，8141
[0035]非专利文献7：Science.1985；230(4730):1132－1139.
[0036]非专利文献8：EMBO J.1997；16:1647－1655.
[0037]非专利文献9：EMBO J.1996；15:254－264.
[0038]非专利文献10：J Biom Chem.1994；269:14661－14665.
[0039]非专利文献11：Science.1987；237:178－182.
[0040]非专利文献12：Proc Natl Acad Sci U S A.1987；84:7159－7163.
[0041]非专利文献13：Eur.J Surg Oncol.1997(23):30－35.
[0042]非专利文献14：Oncogene.2008；27(47):6120－6130.
[0043]非专利文献15：Oncol Rep.2006；15(1):65－71.
[0044]非专利文献16：Science.1987；235:177－182.
[0045]非专利文献17：Ann Oncol 19:1523－1529，2008.
[0046]非专利文献18：Mol Cell Biol 6:955－958，1986.
[0047]非专利文献19：Science.1989；244:707－712.
[0048]非专利文献20：Diagn Mol Pathol 10:139－152，2001.

技术实现思路

[0049]专利技术所要解决的课题
[0050]本专利技术提供新型抗HER2抗体和该抗体－吡咯并苯并二氮杂卓(PBD)衍生物偶联物、以及新型PBD衍生物。
[0051]此外，本专利技术提供具有抗肿瘤活性的抗HER2抗体和抗HER2抗体－PBD衍生物偶联物、以及含有新型PBD衍生物的医药组合物。
[0052]进而，本专利技术提供抗HER2抗体和抗HER2抗体－PBD衍生物偶联物、以及使用了新型PBD衍生物的癌的治疗方法。
[0053]用于解决课题的方法
[0054]本专利技术人等进行了深入研究，结果发现，新型抗HER2抗体－吡咯并苯并二氮杂卓(PBD)衍生物偶联物具有强抗肿瘤活性，从而完成本专利技术。
[0055]即，本申请专利技术涉及下述技术方案。
[0056][1]下式所示的抗体－药物偶联物。
[0057][0058](式中，m1表示1或2的整数。
[0059]D为选自下述的组中的任一者。
[0060][0061]在此，式中，星号(*)表示与L结合。
[0062]L为将Ab的Asn297所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种抗体－药物偶联物，其由下式所示，式中，m1表示1或2的整数，D为选自下述的组中的任一者，在此，式中，星号*表示与L结合，L为将Ab的Asn297所结合的糖链即N297糖链与D进行连接的连接子，N297糖链任选地被重构，Ab表示与HER2特异性结合的抗体或该抗体的功能性片段，所述抗体或该抗体的功能性片段包含重链以及轻链，所述重链含有：由序列号1所述的氨基酸序列形成的CDRH1、由序列号2所述的氨基酸序列形成的CDRH2以及由序列号3所述的氨基酸序列或该氨基酸序列的一个～多个氨基酸被取代而成的氨基酸序列形成的CDRH3，所述轻链含有：由序列号5所述的氨基酸序列形成的CDRL1、由序列号6的氨基酸号1～3所述的氨基酸序列形成的CDRL2以及由序列号7所述的氨基酸序列或该氨基酸序列的一个～多个氨基酸被取代而成的氨基酸序列形成的CDRL3。2.根据权利要求1所述的抗体－药物偶联物，其中，L由－Lb－La－Lp－NH－B－CH2－O(C＝O)－*表示，在此，式中，星号*表示与D结合，B为1，4－苯基、2，5－吡啶基、3，6－吡啶基、2，5－嘧啶基或2，5－噻吩基，Lp表示选自下述的组中的任一者，－GGVA－、－GG－(D－)VA－、－VA－、－GGFG－、－GGPI－、－GGVCit－、－GGVK－以及－GGPL－，La表示选自下述的组中的任一者，－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－、－C(＝O)－(CH2CH2)2－C(＝O)－、－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－NH－(CH2CH2)2－C(＝O)－、－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－NH－(CH2CH2O)2－CH2－C(＝O)
‑
、－C(＝O)－CH2CH2－NH－C(＝O)－(CH2CH2O)4－CH2CH2－C(＝O)－、－CH2－OC(＝O)－、以及－OC(＝O)－，以及Lb由下式表示，
或者在此，在以上所示的Lb的结构式中，星号*表示与La结合，波浪线表示与N297糖链或被重构的N297糖链结合。3.根据权利要求1或2所述的抗体－药物偶联物，其中，L表示选自下述的组中的任一者，－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－GGVA－NH－B－CH2－OC(＝O)
‑
、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－GG－(D－)VA－NH－B－CH2－OC(＝O)－、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－VA－NH－B－CH2－OC(＝O)
‑
、－Z1－C(＝O)－(CH2CH2)2－C(＝O)－VA－NH－B－CH2－OC(＝O)－、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－GGPI－NH－B－CH2－OC(＝O)
‑
、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－B－CH2－OC(＝O)
‑
、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－GGVCit－NH－B－CH2－OC(＝O)－、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－GGVK－NH－B－CH2－OC(＝O)－、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－GGPL－NH－B－CH2－OC(＝O)
‑
、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－NH－(CH2CH2)2－C(＝O)－VA－NH－B－CH2－OC(＝O)－、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－NH－(CH2CH2O)2－CH2－C(＝O)－VA－NH－B－CH2－OC(＝O)－、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－NH－C(＝O)－(CH2CH2O)4－CH2CH2－C(＝O)－VA－NH－B－CH2－OC(＝O)－、－Z2－OC(＝O)－GGVA－NH－B－CH2－OC(＝O)－、以及－Z3－CH2－OC(＝O)－GGVA－NH－B－CH2－OC(＝O)－，在此，B表示1，4－苯基，Z1表示下述的结构式，
Z2表示下述的结构式，Z3表示下述的结构式，在此，在Z1、Z2和Z3的结构式中，星号*表示与所邻接的C(＝O)、OC(＝O)或CH2结合，波浪线表示与N297糖链或被重构的N297糖链结合。4.根据权利要求3所述的抗体－药物偶联物，其中，L表示选自下述的组中的任一者，－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－GGVA－NH－B－CH2－OC(＝O)
‑
、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－VA－NH－B－CH2－OC(＝O)
‑
、－Z1－C(＝O)－(CH2CH2)2－C(＝O)－VA－NH－B－CH2－OC(＝O)－、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－GGVCit－NH－B－CH2－OC(＝O)－、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－NH－(CH2CH2)2－C(＝O)－VA－NH－B－CH2－OC(＝O)－、－Z1－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－NH－(CH2CH2O)2－CH2－C(＝O)－VA－NH－B－CH2－OC(＝O)－、以及－Z1－C(＝O)－CH2CH2－NH－C(＝O)－(CH2CH2O)4－CH2CH2－C(＝O)－VA－NH－B－CH2－OC(＝O)－。在此，B为1，4－苯基，Z1表示下述的结构式，在此，在所述Z1的结构式中，星号*表示与邻接于Z1的C(＝O)结合，波浪线表示与N297糖链或被重构的N297糖链结合。5.根据权利要求1～4中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，D为选自下述的组中的任一者，
在此，式中，星号*表示与L结合。6.根据权利要求1～5中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，抗体包含：含有下述的(a)～(c)所述的CDRH1、CDRH2和CDRH3的重链；以及，含有下述的(a)～(c)所述的CDRL1、CDRL2和CDRL3的轻链，(a)由序列号1所述的氨基酸序列形成的CDRH1、由序列号2所述的氨基酸序列形成的CDRH2以及由序列号4所述的氨基酸序列形成的CDRH3、以及由序列号5所述的氨基酸序列形成的CDRL1、由序列号6的氨基酸号1～3所述的氨基酸序列形成的CDRL2以及由序列号8所述的氨基酸序列形成的CDRL3、(b)由序列号1所述的氨基酸序列形成的CDRH1、由序列号2所述的氨基酸序列形成的CDRH2以及由序列号3所述的氨基酸序列形成的CDRH3、以及由序列号5所述的氨基酸序列形成的CDRL1、由序列号6的氨基酸号1～3所述的氨基酸序列形成的CDRL2以及由序列号8所述的氨基酸序列形成的CDRL3、或(c)由序列号1所述的氨基酸序列形成的CDRH1、由序列号2所述的氨基酸序列形成的CDRH2以及由序列号3所述的氨基酸序列形成的CDRH3、以及由序列号5所述的氨基酸序列形成的CDRL1、由序列号6的氨基酸号1～3所述的氨基酸序列形成的CDRL2以及由序列号7所述的氨基酸序列形成的CDRL3。7.根据权利要求1～6中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，抗体包含由选自下述的(a)～(d)所构成的组中的氨基酸序列形成的重链可变区、以及由选自(e)～(i)所构成的组中的氨基酸序列形成的轻链可变区，(a)序列号13所述的氨基酸序列，(b)序列号17所述的氨基酸序列，(c)相对于(a)或(b)的序列中各CDR序列以外的骨架区的序列具有至少95％以上的同源性的氨基酸序列，(d)(a)或(b)的序列中的各CDR序列以外的骨架区的序列中，缺失一个或多个氨基酸、取代一个或多个氨基酸或添加一个或多个氨基酸而成的氨基酸序列，以及(e)序列号21所述的氨基酸序列，(f)序列号25所述的氨基酸序列，(g)序列号29所述的氨基酸序列，(h)相对于(e)～(g)的序列中各CDR序列以外的骨架区的序列具有至少95％以上的同源性的氨基酸序列，以及(i)(e)～(g)的序列中的各CDR序列以外的骨架区的序列中，缺失一个或多个氨基酸、取代一个或多个氨基酸或添加一个或多个氨基酸而成的氨基酸序列。
8.根据权利要求7所述的抗体－药物偶联物，其中，抗体包含下述的(a)～(c)所述的重链可变区和轻链可变区，(a)由序列号17所述的氨基酸序列形成的重链可变区以及由序列号25所述的氨基酸序列形成的轻链可变区，(b)由序列号13所述的氨基酸序列形成的重链可变区以及由序列号29所述的氨基酸序列形成的轻链可变区，或者(c)由序列号13所述的氨基酸序列形成的重链可变区以及由序列号21所述的氨基酸序列形成的轻链可变区。9.根据权利要求1～8中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，抗体为嵌合抗体。10.根据权利要求1～8中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，抗体为人源化抗体。11.根据权利要求9或10所述的抗体－药物偶联物，其中，抗体包含人IgG1、人IgG2或人IgG4的重链恒定区。12.根据权利要求11所述的抗体－药物偶联物，其中，抗体的重链恒定区为人IgG1的重链恒定区，在该重链恒定区中，由EU Index表示的234位和235位的亮氨酸被丙氨酸取代。13.根据权利要求10～12中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，抗体包含下述的(a)或(b)所述的重链和轻链，(a)由序列号15的氨基酸号20～469所述的氨基酸序列形成的重链以及由序列号23的氨基酸号21～234所述的氨基酸序列形成的轻链，即H01L02，或者(b)由序列号11的氨基酸号20～469所述的氨基酸序列形成的重链以及由序列号27的氨基酸号21～234所述的氨基酸序列形成的轻链，即HwtL05。14.根据权利要求10～12中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，抗体包含下述的(a)或(b)所述的重链和轻链，(a)由序列号11中氨基酸号20～469所述的氨基酸序列形成的重链以及由序列号19中氨基酸号21～234所述的氨基酸序列形成的轻链，或者(b)由序列号31中氨基酸号20～469所述的氨基酸序列形成的重链以及由序列号32中氨基酸号21～234所述的氨基酸序列形成的轻链。15.根据权利要求1～14中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，抗体包含选自由N－连接糖基化、O－连接糖基化、N末端的加工、C末端的加工、脱酰胺化、天冬氨酸的异构化、蛋氨酸的氧化、N末端的蛋氨酸残基的添加、脯氨酸残基的酰胺化、以及重链的羧基末端的一个或两个氨基酸残基的缺失构成的组中的一种或两种以上的修饰。16.根据权利要求15所述的抗体－药物偶联物，其中，在抗体的重链的羧基末端缺失一个或多个氨基酸残基。17.根据权利要求16所述的抗体－药物偶联物，其中，在抗体的两条重链双方的羧基末端缺失一个氨基酸残基。18.根据权利要求1～5中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，
抗体与权利要求6～17中任一项所述的抗体在与HER2的结合上竞争，或者，结合于权利要求6～17中任一项所述的抗体所识别的HER2上的部位。19.根据权利要求1～18所述的抗体－药物偶联物，其中，N297糖链为被重构的糖链。20.根据权利要求1～19所述的抗体－药物偶联物，其中，N297糖链表示具有下式所示的结构的N297－(Fuc)MSG1、N297－(Fuc)MSG2或它们的混合物、或N297－(Fuc)SG中的任一者，所述式中，波浪线表示与抗体的Asn297结合，N297糖链中的L(PEG)表示－NH－CH2CH2－(O－CH2CH2)n5－*，在此，n5表示2～5的整数，左端的氨基与N297糖链的β－Man支链的1－3链侧或/和1－6链侧的非还原末端的唾液酸的2位羧酸经由酰胺键而键合，星号*表示与L中的Z1的三唑环上的1位或3位的氮原子结合。21.根据权利要求20所述的抗体－药物偶联物，其中，n5为3。22.一种抗体－药物偶联物，其由下式所示，
在以上所示的各个结构式中，m1表示1或2的整数，Ab表示与HER2特异性结合的抗体或该抗体的功能性片段，所述抗体或该抗体的功能性片段包含重链以及轻链，所述重链含有：由序列号1所述的氨基酸序列形成的CDRH1、由序列号2所述的氨基酸序列形成的CDRH2以及由序列号3所述的氨基酸序列或该氨基酸序列的一个～多个氨基酸被取代而成的氨基酸序列形成的CDRH3，所述轻链含有：由序列号5所述的氨基酸序列形成的CDRL1、由序列号6的氨基酸号1～3所述的氨基酸序列形成的CDRL2以及由序列号7所述的氨基酸序列或该氨基酸序列的一个～多个氨基酸被取代而成的氨基酸序列形成的CDRL3，N297糖链为具有下式所示的结构的N297－(Fuc)MSG1、N297－(Fuc)MSG2或它们的混合物、或N297－(Fuc)SG，97－(Fuc)SG，式中，波浪线表示与抗体的Asn297结合，N297糖链中的L(PEG)表示－NH－CH2CH2－(O－CH2CH2)3－*，在此，左端的氨基与N297糖链的β－Man支链的1－3链侧或/和1－6链侧的非还原末端
的唾液酸的2位羧酸经由酰胺键而键合，右端的星号*表示与所述结构式中的三唑环上的1位或3位的氮原子结合。23.一种抗体－药物偶联物，其由下式所示，在以上所示的各个结构式中，m1表示1或2的整数，Ab表示与HER2特异性结合的抗体或该抗体的功能性片段，所述抗体或该抗体的功能性片段包含重链以及轻链，所述重链含有：由序列号1所述的氨基酸序列形成的CDRH1、由序列号2所述的氨基酸序列形成的CDRH2以及由序列号3所述的氨基酸序列或该氨基酸序列的一个～多个氨基酸被取代而成的氨基酸序列形成的CDRH3，所述轻链含有：由序列号5所述的氨基酸序列形成的CDRL1、由序列号6的氨基酸号1～3所述的氨基酸序列形成的CDRL2以及由序列号7所述的氨基酸序列或该氨基酸序列的一个～多个氨基酸被取代而成的氨基酸序列形成的CDRL3，N297糖链为具有下式所示的结构的N297－(Fuc)MSG1、N297－(Fuc)MSG2或它们的混合物、或N297－(Fuc)SG，
式中，波浪线表示与抗体的Asn297结合，N297糖链中的L(PEG)表示－NH－CH2CH2－(O－CH2CH2)3－*，在此，左端的氨基与N297糖链的β－Man支链的1－3链侧或/和1－6链侧的非还原末端的唾液酸的2位羧酸经由酰胺键而键合，右端的星号*表示与所述结构式中的三唑环上的1位或3位的氮原子结合。24.一种抗体－药物偶联物，其由下式所示，在以上所示的各个结构式中，m1表示1或2的整数，Ab表示与HER2特异性结合的抗体或该抗体的功能性片段，所述抗体或该抗体的功能性片段包含重链以及轻链，所述重链含有：由序列号1所述的氨基酸序列形成的CDRH1、由序列号2所述的氨基酸序列形成的CDRH2...

【专利技术属性】
技术研发人员：原田直弥，米田耕三，早川市郎，
申请(专利权)人：第一三共株式会社，
类型：发明
国别省市：