一种脑靶向的神经保护剂SS31-HA-RT及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于生物制药领域，涉及一种神经保护剂，特别是指一种脑靶向的神经保护剂SS31

【技术实现步骤摘要】
一种脑靶向的神经保护剂SS31
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HA
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RT及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物制药领域，涉及一种神经保护剂，特别是指一种脑靶向的神经保护剂SS31
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HA
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RT及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]脑卒中是一种常见的脑血管疾病，具有高致残率和高致死率的特点，且该病的发病率逐年升高。据调查显示，中国目前罹患中风人数约有1300万，其中缺血性中风患者占80%，中风导致的死亡人数占总死亡人口的20%，且存活患者中有50%～70%的患者留下严重残疾，给家庭及社会带来沉重的负担。目前脑缺血的首选治疗方案是恢复缺血区供血，然而恢复灌注后，过量活性氧的产生、炎症因子的大量募集及细胞异常死亡会进一步加剧神经损伤。该过程受多种分子机制调控，由氧化应激引起的缺血性级联瀑布反应是导致神经细胞死亡的核心原因，机体的抗氧化活性则是急性脑缺血发生后发挥神经保护作用的重要因素。然而迄今，唯一批准临床有效的自由基清除剂依达拉奉被撤出我国医保，低毒高效的抗氧化类神经保护药物研发迫在眉睫。
[0003]SS31最早是由Peter W. Schiller和Hazel H. Szeto合成的线粒体靶向肽。SS31的分子结构为 H
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D
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Arg
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Dmt
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Lys
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Phe
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NH2，其分子量小，为639.8Da。该多肽由于包含了一个交替的芳香族阳离子基序，从而使其可以自由透过细胞膜，以非能量依赖、无饱和性的形式浓聚于线粒体内膜上。SS31在体外证实可以剂量依赖的方式清除线粒体ROS，抑制脂质过氧化；体内已有研究证实SS31能保护氧化应激引起小鼠感光细胞、人晶状体上皮细胞以及RPE细胞的氧化应激、线粒体损伤，逆转凋亡损伤。
[0004]虽然现有研究表明SS31分子可以靶向线粒体，但是由于SS31在进入体内发挥的药效学作用有限，且主要是针对线粒体相关的损伤产生的轻微修复，因此本课题组一直致力于研究如何最大程度的发挥SS31的作用。
[0005]透明质酸(Hyaluronic acid，HA)是一种天然带负电荷的大分子链粘多糖，由两个双糖单元d
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葡萄糖醛酸和n
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乙酰氨基葡萄糖组成。它广泛存在于动物和人类的不同组织中。它具有高亲水性、高粘弹性、生物降解性、低致敏性、良好的生物相容性以及与细胞表面特异性受体结合的能力，可作为药物载体。研究发现HA的特异性受体CD44在多种癌细胞表面及特殊病理区域有高表达。利用HA与特异性受体结合的特性，多种药物可被输送到病理部位，不仅可以减少药物对正常细胞的毒副作用，还能提高药物的生物利用度和疗效，降低给药频率，提高顺应性。此外，透明质酸酶的组织分布差异也可实现HA枝接化合物的定向释放。目前，HA及其衍生物已被用作多种小分子药物、多肽和蛋白药物的载体。它可以较好的增加不溶药物的水溶性、并且利用与CD44受体的结合实现靶向富集作用。我们则借助CD44及透明质酸酶在缺血脑区的特异性增加，利用HA枝接药物，实现药物的靶点富集和靶向释放。
[0006]芦丁（Rutin，RT）又称芸香苷，属于生物类黄酮，具有多种药理活性。芦丁归类为维生素P，可增加毛细血管的韧性，调节其渗透性，具有降血脂、细胞保护、抗痉挛作用及预防
和治疗心血管疾病的意义。目前，中国芦丁的产量主要来自于槐米，其含量可高达40%，作为医药和食品的两用工厂，槐米价格低廉，无毒无害，在分布和应用上都相当广泛。研究表明芦丁具有较好的神经保护作用，然而其低水溶性及难以透过血脑屏障的特点大大限制了其临床使用。
[0007]为了提高药物的水溶性并促进其穿过血脑屏障的能力、增加其在病灶区的富集与靶向，本课题组对芦丁进行了一系列修饰、改造及体内外评价实验。

技术实现思路

[0008]为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种脑靶向的神经保护剂SS31
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HA
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RT及其制备方法和应用。
[0009]本专利技术的技术方案是这样实现的：一种脑靶向的神经保护剂SS31
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HA
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RT，其结构式如下：式中，RT为，SS31为
。
[0010]上述的神经保护剂SS31
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HA
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RT的制备方法，步骤如下：（1）向HA水溶液中加入活化剂Ⅰ活化2h，再加入RT溶液，在氩气保护下反应 12h，经透析、过滤得产物HA
‑
RT；其技术路线如下：RT；其技术路线如下：式中：n为22~26，p为9~10，q为13~16。
[0011]（2）将步骤（1）的产物HA
‑
RT溶于双蒸水中配制HA
‑
RT溶液，加入活化剂Ⅱ活化2h，再加入多肽SS
‑
31溶液，在氩气保护下反应 12h，经透析、过滤得神经保护剂SS31
‑
HA
‑
RT；其技术路线如下：
式中：p为9~10，q为13~16，r为1~2，s为12~14。
[0012]所述步骤（1）中HA水溶液的摩尔浓度为0.25mmol/mL，RT溶液的溶剂为DMF、浓度为2 mmol/mL。
[0013]所述HA、活化剂Ⅰ、RT的摩尔比为1:4:1.5，其中活化剂Ⅰ为EDC
·
HCl。
[0014]所述步骤（2）中HA
‑
RT溶液的摩尔浓度为0.25mmol/mL，多肽SS
‑
31溶液的溶剂为DMF、浓度为30 mmol/mL。
[0015]所述HA
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RT、活化剂Ⅱ、多肽SS
‑
31的摩尔比为0.5:2:0.05。
[0016]透析采用的透析液为双蒸水、过滤采用的微孔滤膜的直径为0.45μm。
[0017]上述的神经保护剂SS31
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HA
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R在制备穿透血脑屏障保护神经元药物中的应用。
[0018]上述的神经保护剂SS31
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HA
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R在制备促进血管生成、抗炎、抗氧化药物中的应用。
[0019]上述的神经保护剂SS31
‑
HA
‑
R作为改善脑梗死药物的应用，其使用浓度为100μg/250g。
[0020]本专利技术具有以下有益效果：1、本申请制备的神经保护剂，在尾静脉给予SS31
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HA
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RT 20μg，同时脑梗死体积较相同剂量、相同给药方式的HA
‑
RT组作用有极显著提高（平均梗死体积从17.8%降至4.2%），下降了76.4%；几乎与同剂量侧脑室注射组的产生保护效果相似。当加大剂量尾静脉给予100μg SS31
‑
HA
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脑靶向的神经保护剂SS31
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HA
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RT，其结构式如下：，式中，RT为，SS31为。2.权利要求1所述的神经保护剂SS31
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HA
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RT的制备方法，其特征在于，步骤如下：（1）向HA水溶液中加入活化剂Ⅰ活化2h，再加入RT溶液，在氩气保护下反应 12h，经透析、过滤得产物HA
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RT；（2）将步骤（1）的产物HA
‑
RT溶于双蒸水中配制HA
‑
RT溶液，加入活化剂Ⅱ活化2h，再加入多肽SS
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31溶液，在氩气保护下反应 12h，经透析、过滤得神经保护剂SS31
‑
HA
‑
RT。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中HA水溶液的摩尔浓度为0.25mmol/mL，RT溶液的溶剂为DMF、浓度为2 mmol/mL。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述HA、活化剂Ⅰ、RT的摩尔比为1:4:1.5，其中活化剂Ⅰ为E...

【专利技术属性】
技术研发人员：段少峰，岑娟，赵廷魁，代晓莹，张欣，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：