秀珍菇多糖在制备免疫增强药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了秀珍菇多糖在制备免疫增强药物中的应用。本发明专利技术使用环磷酰胺建立小鼠免疫力低下模型，测定小鼠体重和免疫器官指数；一氧化氮试剂盒测定NO含量，ELISA试剂盒测定IL

【技术实现步骤摘要】
秀珍菇多糖在制备免疫增强药物中的应用
[0001]
：本专利技术属于多糖药物
，具体涉及一种具有免疫调节作用的秀珍菇多糖在制备免疫增强药物中的应用。
[0002]
技术介绍
：免疫系统（Immune system）是机体执行免疫应答和免疫功能最重要的系统，具有识别和清除机体抗原，与机体其他系统协调，共同维持机体内环境的稳定和生理平衡的功能。免疫抑制是指抑制免疫反应，由于先天性缺乏或后天营养不良等原因，许多人对各种慢性病的免疫功能不断减弱，导致各种疾病的发生，如上呼吸道感染，尿路感染，败血症和脑膜炎等。因此，维持免疫系统的正常状态，减少免疫抑制，对预防各种疾病的发生具有重要意义。
[0003]环磷酰胺（Cyclophosphamide，CTX）作为目前世界范围内应用最为广泛的抗肿瘤药物及免疫抑制剂，在杀伤肿瘤细胞的同时也会破坏机体正常的免疫细胞，导致免疫抑制。此外，CTX能在机体中生成自由基，从而导致氧化应激。
[0004]秀珍菇（Pleurotus geesteranus），又名袖珍菇、肺形侧耳等，营养成分丰富，富含多糖、脂肪、蛋白质、维生素和多种微量元素，且含人体必需的8种氨基酸。关于秀珍菇的研究主要集中在菌种的培育、保鲜和生物学特性上，对多糖生物活性的研究报道却很少，主要在于抗肿瘤、降血脂、抗衰老和保肝功效等，目前尚未发现有关于秀珍菇多糖的免疫活性研究与报道。因此，探究秀珍菇多糖的免疫调节能力对进一步了解其生物活性具有重要意义。
[0005]
技术实现思路
：本专利技术目的在于克服现有技术缺陷，提供一种具有免疫调节作用的秀珍菇多糖在制备免疫增强药物中的应用，其治疗效果显著，且无毒副作用。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了秀珍菇多糖在制备免疫增强药物中的应用，所述秀珍菇多糖经下述步骤制备获得：将粉碎过的秀珍菇子实体依次用石油醚、75
±
5%乙醇进行室温浸提，所得残渣再用水于90
±5°
C进行热煎煮，过滤，滤液加95%乙醇至终浓度为75
±
5%进行醇沉，取沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、石油醚洗涤，Sevage法除蛋白后经冷冻干燥即得。
[0007]进一步优选的，室温浸提2次，每次浸提时间为3天。
[0008]进一步优选的，热煎煮3次，每次煎煮时间为4 h。
[0009]具体的，Sevage试剂由体积4：1的氯仿和正丁醇组成。
[0010]上述秀珍菇多糖在制备免疫增强药物方面的应用，具体的，秀珍菇多糖用量为75
‑
300 mg/kg/d。
[0011]上述秀珍菇多糖在制备免疫增强药物方面的应用，进一步的，秀珍菇多糖能改善小鼠体重和免疫器官指数，显著提高小鼠IL
‑
2、IL
‑
4、IL
‑
6和TNF
‑
α 等细胞因子含量，并有效增强抗氧化能力，同时可显著缓解小鼠免疫器官的损伤，与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：本专利技术利用秀珍菇多糖给予小鼠灌胃300 mg/kg/d、150 mg/kg/d、75 mg/kg/d，注
射环磷酰胺70 mg/kg/d，建立小鼠免疫抑制模型，了解小鼠免疫情况，基于此发现了秀珍菇多糖PGp的一种新用途。本专利技术研究结果表明：与空白对照组相比， PGp能改善小鼠体重和免疫器官指数，显著提高小鼠IL
‑
2、IL
‑
4、IL
‑
6和TNF
‑
α 等细胞因子含量，并能有效增强抗氧化能力，同时可显著缓解小鼠免疫器官的损伤，起到免疫调节的功效。因此，本专利技术秀珍菇多糖可被用于制作免疫增强剂，对免疫类新药具有一定的开发价值。
[0012]附图说明：图1为PGp对小鼠体重（A）、胸腺指数（B）、脾脏指数（C）和NO含量（D）的影响。图中，与空白组相比：
#
P<0.05，
##
P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；图2为PGp对细胞因子细胞因子IL
‑
2（A）、IL
‑
4（B）、IL
‑
6（C）、IL
‑
1β（D）、TNF
‑
α（E）、IFN
‑
γ（F）含量的影响。图中，与空白组相比：
#
P<0.05，
##
P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；图3为PGp对小鼠LDH（A）、ACP（B）、MDA（C）、SOD（D）、CAT（E）、T
‑
AOC（F）活性的影响。图中，与空白组相比：
#
P<0.05，
##
P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；图4为PGp对小鼠脾组织形态学的影响。图中，与空白组相比：
#
P<0.05，
##
P<0.01；与模型组比较，
*
P<0.05，
**
P<0.01。
[0013]具体实施方式：以下结合实施例对本专利技术的技术方案作进一步地详细介绍，但本专利技术的保护范围并不局限于此。
[0014]实施例1下述应用试验中，所用秀珍菇多糖PGp经下述步骤制备获得：取秀珍菇子实体粉末930 g，用石油醚于室温下进行两次浸提脱脂，两次加入的石油醚量分别为2000 mL和1500 mL，每次浸提时间均为3天。浸提结束后过滤，滤渣阴干，得900 g秀珍菇粉渣。然后将秀珍菇粉渣在室温下用75%乙醇进行两次浸提以脱除小分子，两次加入的75%乙醇量分别为2000 mL和1500 mL，每次浸提时间均为3天。浸提结束后，过滤、挥干乙醇得干燥菇粉820 g。按料液比1 g：30 mL向残渣中加入直饮水，于85
°
C热煎煮三次，每次煎煮4 h。煎煮结束后过滤，合并滤液，蒸发浓缩，加95%乙醇至终浓度为70%，4
°
C静置24 h以醇沉，收集沉淀，分别用无水乙醇、丙酮、石油醚各淋洗3次，再经冷冻干燥（冷冻干燥机中进行，冻干工艺为
‑
50
°
C下首先预冻3 h，之后进入升华过程，
‑
40
°
C、
‑
30
°
C、
‑
20
°
C、
‑
10
°
C下时间分别为4 h、6 h、6 h、1 h，最后二次干燥，0
°
C、10
°
C、20
°
C、30
°
C和40
°
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.秀珍菇多糖在制备免疫增强药物中的应用，其特征在于，所述秀珍菇多糖经下述步骤制备获得：将粉碎过的秀珍菇子实体依次用石油醚、75
±
5%乙醇进行室温浸提，所得残渣再用水于90
±5°
C进行热煎煮，过滤，滤液加95%乙醇至终浓度为75
±
5%进行醇沉，取沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、石油醚洗涤，Sevag...

【专利技术属性】
技术研发人员：康文艺，张岩，马常阳，梁振华，王莉，李昌勤，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：