一种鲜艳乳菇菌种培养基及菌种培养方法技术

本发明专利技术属于食用菌培育技术领域，具体涉及一种鲜艳乳菇菌种培养基及菌种培养方法；通过对鲜艳乳菇菌种培养基中氮源与碳源比例进行优化，并在培养基中添加VB7和阿魏酸，显著促进了鲜艳乳菇菌丝的生长。同时，采用液体菌种分段式培养，所获得的固体菌种菌丝浓密粗壮，长势好；液体菌种菌丝生物量大，菌丝球分散均匀；且具有萌发快，生产周期短，工艺简单，污染率低、成本低的特点。成本低的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种鲜艳乳菇菌种培养基及菌种培养方法


[0001]本专利技术属于食用菌培育
，具体涉及一种鲜艳乳菇菌种培养基及菌种培养方法。

技术介绍

[0002]鲜艳乳菇(Lactarius vividus)是一种珍贵野生食用菌，是新发现的模式产地在中国的新物种，味道鲜美，营养丰富，市场价格高。鲜艳乳菇是一种外生菌根真菌，目前主要依靠野生资源，由于菌丝脱离共生树种的根系不能形成子实体，目前难以实现人工栽培。随着人类干扰及自然环境变化，鲜艳乳菇野生资源不断减少，采集分离及制备鲜艳乳菇菌种可以为鲜艳乳菇资源的开发利用提供种源支撑。
[0003]目前，国内外针对鲜艳乳菇的研究很少，主要是针对菌种培养基的筛选，如文献《3种松乳菇菌种在不同培养基中生长表现.徐彦军.种子,2020,39(11):107
‑
109.》和《鲜艳乳菇母种培养基筛选试验.赵辉,李彪,徐建俊,孙传齐,马洁,卫其巍..北方园艺,2017(11):145
‑
148.》，且液体菌种的制备研究几乎为空白。鲜艳乳菇菌种的分离培养污染率高，菌丝生长速度慢。
[0004]申请号为CN202010281748.9的专利文件公开了一种鲜艳乳菇液体菌种培养基配方及液体菌种制备的方法，其配方包括：松针、蔗糖、麦芽汁、蛋白胨、柠檬酸、硫酸镁和维生素B1，方法包括：培养基配制、分装、杀菌、接种培养。能有效缩短鲜艳乳菇原种培养周期，抗杂菌能力强，产量较对照提高了49.85％。但此方案中制备液体菌种的方法主要为静置培养，只通过静置培养无法得到有效的液体菌种，菌丝生长速度慢，需要40天左右，并且仅能形成菌丝，不形成菌丝球。
[0005]因此，研究如何制备生长速度快，生物量高，低污染的鲜艳乳菇菌种技术是关键。

技术实现思路

[0006]本专利技术为解决上述问题，提供了一种鲜艳乳菇菌种培养基及菌种培养方法。
[0007]具体是通过以下技术方案来实现的：
[0008]一种鲜艳乳菇菌种的培养方法，包括以下步骤：
[0009]1、按常规方法配制固体培养基
[0010]所述固体培养基组成为：牛肉浸粉1.5
‑
2.1g/L、酵母浸粉3.5
‑
4.9g/L、葡萄糖18
‑
20g/L、氯化钙0.15g/L、硫酸镁0.05
‑
0.1g/L、磷酸二氢钾0.1g/L、VB7 6
‑
8mg/L、阿魏酸4
‑
6mg/L、琼脂18
‑
20g/L、纯净水1000mL。
[0011]进一步，所述酵母浸粉与牛肉浸粉的质量比为7:3，总添加量为5
‑
7g/L。
[0012]2、按常规方法配制液体培养基
[0013]所述液体培养基组成为：大豆蛋白胨5
‑
7g/L、麦芽糖9
‑
11g/L、糊精9
‑
11g/L、氯化钙0.15g/L、硫酸镁0.1g/L、磷酸二氢钾0.05
‑
0.1g/L、VB7 6
‑
8mg/L、阿魏酸4
‑
6mg/L、纯净水1000mL。
[0014]进一步，所述麦芽糖与糊精的质量比为1:1，总添加量为18
‑
22g/L。
[0015]3、培养基灭菌：将所配制的培养基分装至三角瓶，121℃灭菌20min，固体培养基倒至培养皿中，液体培养基冷却至常温备用。
[0016]4、菌种活化：取保存的鲜艳乳菇试管种1
‑
2支，在无菌操作台上用接种针挑取蚕豆大小的菌种置于菌种活化培养基中，25℃避光培养15
‑
20d。
[0017]5、固体菌种培养：采集野生鲜艳乳菇子实体，采取组织分离方式，无菌环境下挑取菌肉至步骤1的固体培养基上，25
‑
27℃，黑暗培养。
[0018]6、液体菌种接种：取步骤5中培养的无污染，长势较好的菌种，接种至步骤2中的液体培养基中，菌块大小0.6cm2‑
1cm2，每个三角瓶接种3
‑
6块。
[0019]7、液体菌种分段式培养：
[0020](1)第一阶段菌丝萌发培养：在温度24℃
‑
26℃的条件下，静置培养3
‑
4天。
[0021](2)第二阶段菌丝球形成期培养：采用震荡培养，摇床转速140
‑
160r/min，温度24℃
‑
26℃的条件下，培养5
‑
6天。
[0022](3)第三阶段菌丝量增长培养：采用静置与震荡交替培养，温度26℃
‑
28℃，摇床震荡时转速120
‑
140r/min，每10
‑
12h交替一次，培养3
‑
4天。
[0023]进一步，所述液体菌种分段式培养累计培养11
‑
14天。
[0024]综上所述，本专利技术的有益效果在于：本专利技术通过对鲜艳乳菇菌种培养基中氮源与碳源比例进行优化，并在培养基中添加VB7和阿魏酸，显著促进了鲜艳乳菇菌丝的生长。同时，采用液体菌种分段式培养，所获得的固体菌种菌丝浓密粗壮，长势好；液体菌种菌丝生物量大，菌丝球分散均匀；且具有萌发快，生产周期短，工艺简单，污染率低、成本低的特点。
[0025]其中，采取“三段法”培养，设计出鲜艳乳菇液体菌种制备流程，具有高效，便捷，成本低，可操作性强的特点，生产的液体菌种生物量高，污染率低，菌丝活性高。通过分段式培养所获菌种较静置培养相比周期短11
‑
14天，菌丝球分散均匀，生物量大，可作为栽培菌种和进行菌根苗合成的有效液体菌种。从而解决了鲜艳乳菇菌种分离培养难度大，菌丝生长缓慢，液体菌种培养难等问题。
附图说明
[0026]图1为实施例1中固体菌种培养情况。
[0027]图2为实施例1中液体菌种培养情况。
具体实施方式
[0028]下面对本专利技术的具体实施方式作进一步详细的说明，但本专利技术并不局限于这些实施方式，任何在本实施例基本精神上的改进或代替，仍属于本专利技术权利要求所要求保护的范围。
[0029]实施例1
[0030]一种鲜艳乳菇菌种的培养方法，包括以下步骤：
[0031]一、固体培养基培养
[0032]1、按常规方法配制固体培养基
[0033]所述固体培养基组成为：牛肉浸粉1.8g/L、酵母浸粉4.2g/L、葡萄糖20g/L、氯化钙
0.15g/L、硫酸镁0.1g/L、磷酸二氢钾0.05g/L、VB7 8mg/L、阿魏酸6mg/L、琼脂20g/L、纯净水1000mL。
[0034]2、培养基灭菌：将所配制的培养基分装至三角瓶，121℃灭菌20min，培养基倒至培养皿中，冷却至常温备用。
[0035](3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鲜艳乳菇菌种的培养方法，包括：培养基配制、菌种培养，其特征在于，所述的菌种培养，包括固体菌种培养和液体菌种分段式培养。2.如权利要求1所述的一种鲜艳乳菇菌种的培养方法，其特征在于，所述的液体菌种分段式培养分为三个阶段进行，分别为：第一阶段菌丝萌发期、第二阶段菌丝球形成期和第三阶段菌丝量增长期，采用震荡与静置交替培养，累计培养11
‑
14天。3.如权利要求2所述的一种鲜艳乳菇菌种的培养方法，其特征在于，所述的第一阶段菌丝萌发期，是在温度24℃
‑
26℃的条件下，静置培养3
‑
4天。4.如权利要求2所述的一种鲜艳乳菇菌种的培养方法，其特征在于，所述的第二阶段菌丝球形成期，是采用震荡培养，摇床转速140
‑
160r/min，温度24℃
‑
26℃的条件下，培养5
‑
6天。5.如权利要求2所述的一种鲜艳乳菇菌种的培养方法，其特征在于，所述的第三阶段菌丝量增长期，是采用静置与震荡交替培养，温度26℃
‑
28℃，摇床震荡时转速120
‑
140r/min，每10
‑
12h交替一次，培养3
‑
4天。6.一种鲜艳乳菇菌种培养基，其特征在于，所述的培养基，包括固体培养基和液体培养基，并在固体培养基和液体培养基中添加了阿魏酸和VB7。7.如权利要求6所...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑旋，康超，杨玲，杨彝华，向准，李鹏，王晶，曾维军，刘忠玄，王万坤，
申请(专利权)人：贵州省生物研究所，
类型：发明
国别省市：