一种具有显著皮肤晒伤防护作用的海洋生物活性肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种具有显著皮肤晒伤防护作用的海洋生物活性肽及其制备方法和应用。所述海洋生物活性肽分子量小、皮肤相容性好，能显著减少紫外线照射细胞凋亡和坏死，降低真皮炎性渗出与弹性纤维降解。所述海洋生物活性肽制备方法为取鲜活海洋贝类软体部，经蛋白酶酶解、超滤、葡聚糖凝胶分离，弃去最后一个洗脱单峰后，分别收集或混合其它洗脱组分，冻干而成。该方法简单、成本低廉、绿色环保、生产周期短、适用于工业生产，制备的活性肽对皮肤晒伤既有预防又有修复功效，可应用于化妆品和生物医用材料中，化妆品剂型有膏霜、乳液、凝胶、啫喱、水剂和喷雾等，生物医用材料剂型有洗剂、溶液、敷料、软膏和针剂等。软膏和针剂等。软膏和针剂等。

【技术实现步骤摘要】
一种具有显著皮肤晒伤防护作用的海洋生物活性肽及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种具有显著皮肤晒伤防护作用的海洋生物活性肽及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]随着臭氧层遭到破坏，皮肤长期过量接触紫外线，导致光线性皮肤病、基底细胞癌、鳞状细胞癌等发病率逐年增加。紫外线诱导皮肤癌形成和发生是一个复杂而连续的生物学行为，其中波长为280
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320nm中波紫外线(UVB)正好位于DNA、蛋白质吸收峰附近，能引起DNA和蛋白质损伤，最具致癌性或突变性。紫外线对表皮角质形成细胞DNA损伤是诱发皮肤癌的基础，如果损伤后DNA发生错误无限制修复，则会引起原癌基因和抑癌基因突变，最终导致肿瘤形成。
[0003]而正常皮肤在日光中受紫外线过度照射后，也常会出现局部急性光毒性皮炎，还易激发多形性日光疹、单纯疱疹、日光性荨麻疹、多形红斑、迟发性皮肤卟啉病、红斑狼疮、白癜风、毛细血管扩张和日射病等。因此，寻觅多种措施以有效降低紫外线照射引起皮肤损伤及癌变发生已显得非常重要。
[0004]除内服超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽过氧化物酶、维生素C、维生素E、类胡萝卜素、谷胱甘肽、尿酸、辅酶Q和泛醌等内源性抗氧化物外，外涂防晒化妆品也可有效预防皮肤光损伤、减少皮肤癌发生。而防晒化妆品中的防晒剂多含有苯环与不饱和侧链，紫外线照射后也时有变应性接触性皮炎等不良反应发生，一定程度上限制了其广泛使用。
[0005]而临床上可使用的药物也多是用于预防治疗皮肤光老化，比如维A酸类药物、异维A酸、他扎罗汀、视黄醇、抗氧化药(维生素C、维生素E、β
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胡萝卜素、辅酶Q10、超氧化物歧化酶SOD等)、脱色剂(氢醌、熊果苷等)、角质剥落剂(α
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羟基酸、β
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羟基酸等)、细胞因子(表皮生长因子EGF、成纤维细胞生长因子FGF、血小板衍生化生长因子PDGF等)、天然生物提取成分(表没食子儿茶素没食子酸酯EGCG、花色苷等)、微量元素(硒)、性激素等，针对皮肤晒伤防护的制剂和药物相对较少。因此，寻找一种天然、安全、环保的皮肤晒伤防护功能物对保障人体皮肤健康具有十分重要的意义和应用前景。
[0006]海洋生境独特，蕴藏着丰富的生物资源，是寻找珍贵药物的资源宝库。尤其在海洋细菌、真菌及动植物中，含有诸如类胡萝卜素、维生素、多酚、黄酮、皂甙、萜、生物碱、多糖、功能肽等结构独特新颖、功能特殊高效的活性物。如在蓝藻(Gloeocapsa sp.CU2556)、藻青菌(Nostoc sp.R76DM)和藻类中，类菌孢素氨基酸可吸收大量紫外线进而修复皮肤晒伤。太平洋鳕鱼皮肤水解物可显著抑制紫外线照射后小鼠皮肤MMP
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1、MMP
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3、明胶酶上调，并下调MAPK信号通路p
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ERK、p
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p38、c
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Jun、c
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Fos水平，缓解皮肤光老化。鳕鱼皮胶原肽(GEIGPSGGRGKPGKDGDAGPK、GFSGLDGAKGD)对UVB照射小鼠成纤维细胞基质金属蛋白酶MMP
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1、pERK、p
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p38均有显著抑制作用，其中前者还可明显抑制MAPK信号通路中的p
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JNK，进而拮
抗皮肤光老化。
[0007]海洋贝类肽在抗氧化、修复皮肤晒伤方面表现也十分突出。太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)酶解物可有效提高抗氧化酶活性，调节MAPK/AP
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1信号通路和促炎细胞因子水平，抑制MMP表达，进而降低UVB照射小鼠皮肤皱纹长度、深度和表皮厚度。来源于马氏珠母贝(Pinctada fucata)蛋白的抗氧化肽可提高皮肤组织中抗氧化酶活性，并抑制脂质过氧化，延缓UVB照射小鼠皮肤皱纹形成及弹性下降。波纹巴非蛤(Paphia undulate)活性肽也可提高小鼠皮肤SOD、CAT、GPx等抗氧化酶活性，延缓皮肤光衰老。
[0008]从栉孔扇贝(Chlamys farreri)中制备获得的CFP肽(VPSIDDQEELM，DAQEKLE，EELDNALN，VPSIDDQEELM，DAQEKLE，EELDNALN，VPSIDDQEELM，VPSIDDQEELM)，可有效清除DPPH自由基。从扇贝裙边中制备获得两个肽(PVDKNAGVVGAPPKRG、RGGRGITDYLT)具有较高的抗氧化活性，来源于扇贝内脏多肽PCF(Pro
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Asn
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Thr
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Hyl
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Ser
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Cys
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Arg
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Gly，分子量879Da)在修复皮肤紫外线损伤方面也表现优异。该扇贝多肽PCF可调控Bcl
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2、NOS等基因表达，提高抗氧化酶活性及羟脯胺酸等含量，减少Ⅰ型胶原降解，减轻小鼠和豚鼠皮肤光损伤，并增强人成纤维细胞、角质形成细胞抗氧化能力，抑制凋亡发生。
[0009]然而，以上具有抗氧化或皮肤晒伤防护功效的活性物质多为组成成分简单或氨基酸序列较明确的活性肽，适用于实验室少量制备和科学研究。因为所涉及的制备方法较为复杂，加之受高效液相色谱等高精度分离技术样品处理量的限制，导致最终获得的活性肽产率低、制备成本高，难以进行大规模工业生产和应用。

技术实现思路

[0010]本专利技术的目的之一在于提供一种海洋生物活性肽，该活性肽能有效预防皮肤晒伤，还能有效促进晒伤皮肤修复。该海洋生物活性肽皮肤相容性好，能显著提高紫外线照射后表皮细胞的活力，减少细胞凋亡和坏死发生，并降低真皮炎性浸润与弹性纤维降解，减轻皮肤晒伤。
[0011]本专利技术的另一个目的在于提供一种通过酶解、超滤、葡聚糖凝胶G
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15分离制备海洋生物活性肽的方法。该方法简单、成本低廉、绿色环保、生产周期短，适用于大批量工业生产。
[0012]本专利技术还有一个目的在于提供一种海洋生物活性肽的应用。该活性肽可应用于化妆品中，化妆品剂型可包括膏霜、乳液、凝胶、啫喱、水剂、喷雾等；该活性肽还可应用于生物医用材料中，生物医用材料剂型可包括洗剂、溶液、敷料、软膏、针剂等，敷料类型可包括薄膜、水胶体、水凝胶、海绵、喷雾等。
[0013]本专利技术通过以下技术方案实现上述目的：
[0014]一方面，本专利技术提供了一种海洋生物活性肽，该活性肽水溶性和皮肤相容性好，分子量为300Da
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3000Da，含3
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30个氨基酸。
[0015]上述海洋生物活性肽是海洋贝类软体部经过蛋白酶酶解所得的产物。
[0016]这些海洋贝类可以包括但不限于牡蛎、波纹巴非蛤、海蚬、贻贝、马氏珠母贝、扇贝、文蛤中的一种或几种的组合。优选地，海洋贝类来源于扇贝。
[0017]而所使用的蛋白酶可以是能将蛋白进行酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种海洋生物活性肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将鲜活海洋贝类去壳，取软体部，经过胰蛋白酶酶解、超滤，再用葡聚糖凝胶分离，收集洗脱峰组分，浓缩、干燥，制得海洋生物活性肽；所述的洗脱峰组分是除了最后一个洗脱峰组分以外的一种或几种洗脱峰组分。2.如权利要求1所述的海洋生物活性肽的制备方法，其特征在于，所述的海洋贝类是指牡蛎、波纹巴非蛤、海蚬、贻贝、马氏珠母贝、扇贝、文蛤中的一种或几种的组合。3.如权利要求1所述的海洋生物活性肽的制备方法，其特征在于，所述的海洋贝类是指扇贝。4.如权利要求1、2或3所述的海洋生物活性肽的制备方法，其特征在于，所述胰蛋白酶的添加量为2000U/g贝肉
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4000U/g贝肉，所述酶解温度37℃
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50℃，酶解pH值7
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8，酶解时间4h
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6h。5.如权利要求1、2或3所述的海洋生物活性肽的制备方法，其特征在于，所述的超滤是指通过截留分子量10kDa和/或3kDa超滤膜过滤。6.如权利要求1、2或3所述的海洋生物活性肽的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：将鲜活扇贝去壳，取软体部匀浆，加入水或缓冲液稀释，按照2000U/g贝肉
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4000U/g贝肉的添加量加入胰蛋白酶，在温度37℃
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50℃，pH值7
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8，酶解4h
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6h，煮沸灭活，离心取上清液，上清液通过超滤膜超滤，再经葡聚糖凝胶分...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈华，孙恢礼，潘剑宇，万鹏，蔡冰娜，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：