沙牛多肽的提取方法及沙牛多肽作为抗肿瘤药物的应用技术

本发明专利技术公开了一种沙牛多肽的提取方法，具体的工艺流程如下：药材粗粉

【技术实现步骤摘要】
沙牛多肽的提取方法及沙牛多肽作为抗肿瘤药物的应用


[0001]本专利技术涉及药物领域，特别是涉及一种沙牛多肽的提取方法及沙牛多肽作为抗肿瘤药物的应用。

技术介绍

[0002]体外实验观察沙牛多肽对多种人体肿瘤细胞具有一定的抑制作用，体内实验也发现沙牛多肽能够抑制3LL，Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞的生长。因此，从沙牛药材中提取、分离沙牛多肽具有重大的药用研究价值。

技术实现思路

[0003]为解决现有技术中存在的问题，本专利技术提供了一种沙牛多肽的提取方法及沙牛多肽作为抗肿瘤药物的应用，为传统药材经现代医药技术寻找安全有效的抗肿瘤药提供了新的思路，具有重大的研究价值和经济效益。
[0004]为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0005]一种沙牛多肽的提取方法，包括以下步骤：
[0006]取沙牛药材研磨成沙牛粗粉；
[0007]取沙牛粗粉加入10倍体积的0.6mol/L的KCl溶液，搅拌24h，离心15min，重复洗3次，收集沉淀；
[0008]上述沉淀加10倍体积的0.45mol/L的NaCl溶液，搅拌24h，离心15min，重复洗3次，收集沉淀；
[0009]上述沉淀加10倍体积的0.1mol/L的NaOH溶液，充分搅拌，用水洗至中性，收集沉淀，即得沙牛粗胶原纤维；
[0010]取沙牛粗胶原纤维加10倍体积的0.5mol/L的乙酸溶液，搅拌48h，除去酸溶性胶原蛋白，离心30min，收集沉淀；
[0011]上述沉淀于0.5mol/L的乙酸溶液中用胃蛋白酶和复合性蛋白酶双酶酶解72h；
[0012]酶解液离心30min，取上清液加入4mol/L的NaCl溶液调节浓度为0.8mol/L，冷冻离心，弃取上清液，收集沉淀；
[0013]取上述沉淀复溶于0.5mol/L的乙酸溶液，所得溶液先用0.02mol/L的Na2HPO4溶液透析，再用0.1mol/L的乙酸溶液透析，冻干即得冻干粉形态的沙牛多肽。
[0014]优选的，所述沙牛粗粉的细度为20目。
[0015]优选的，所述胃蛋白酶和复合性蛋白酶双酶与底物的质量比为1:10。
[0016]优选的，各所述离心步骤的速率均为4000r/min。
[0017]本专利技术还公开了一种应用上述提取方法提取的沙牛多肽作为抗肿瘤药物的应用。
[0018]本专利技术的有益效果是:本专利技术提供了一种从沙牛药材中提取、分离沙牛多肽的方法，并提出了沙牛多肽作为抗肿瘤药物的应用，具有重大的药用研究价值，为传统药材经现代医药技术寻找安全有效的抗肿瘤药提供了新的思路，具有重大的研究价值和经济效益。
具体实施方式
[0019]下面对本专利技术的实施例进行详细说明。
[0020]实施例1：
[0021]一种沙牛多肽的提取方法，包括以下步骤：
[0022]取沙牛药材研磨成沙牛粗粉；
[0023]取沙牛粗粉加入10倍体积的0.6mol/L的KCl溶液，搅拌24h，离心15min，重复洗3次，收集沉淀；
[0024]上述沉淀加10倍体积的0.45mol/L的NaCl溶液，搅拌24h，离心15min，重复洗3次，收集沉淀；
[0025]上述沉淀加10倍体积的0.1mol/L的NaOH溶液，充分搅拌，用水洗至中性，收集沉淀，即得沙牛粗胶原纤维；
[0026]取沙牛粗胶原纤维加10倍体积的0.5mol/L的乙酸溶液，搅拌48h，除去酸溶性胶原蛋白，离心30min，收集沉淀；
[0027]上述沉淀于0.5mol/L的乙酸溶液中用胃蛋白酶和复合性蛋白酶双酶酶解72h；
[0028]酶解液离心30min，取上清液加入4mol/L的NaCl溶液调节浓度为0.8mol/L，冷冻离心，弃取上清液，收集沉淀；
[0029]取上述沉淀复溶于0.5mol/L的乙酸溶液，所得溶液先用0.02mol/L的Na2HPO4溶液透析，再用0.1mol/L的乙酸溶液透析，冻干即得冻干粉形态的沙牛多肽。
[0030]实施例2：
[0031]本实施例在实施例1的基础上，所述沙牛粗粉的细度为20目。
[0032]实施例3：
[0033]本实施例在实施例2的基础上，所述胃蛋白酶和复合性蛋白酶双酶与底物的质量比为1:10。
[0034]实施例4：
[0035]本实施例在实施例3的基础上，各所述离心步骤的速率均为4000r/min。
[0036]实施例5：
[0037]一种应用上述提取方法提取的沙牛多肽作为抗肿瘤药物的应用。
[0038]以上所述实施例仅表达了本专利技术的具体实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本专利技术专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本专利技术的保护范围。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种沙牛多肽的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：取沙牛药材研磨成沙牛粗粉；取沙牛粗粉加入10倍体积的0.6mol/L的KCl溶液，搅拌24h，离心15min，重复洗3次，收集沉淀；上述沉淀加10倍体积的0.45mol/L的NaCl溶液，搅拌24h，离心15min，重复洗3次，收集沉淀；上述沉淀加10倍体积的0.1mol/L的NaOH溶液，充分搅拌，洗至中性，收集沉淀，即得沙牛粗胶原纤维；取沙牛粗胶原纤维加10倍体积的0.5mol/L的乙酸溶液，搅拌48h，除去酸溶性胶原蛋白，离心30min，收集沉淀；上述沉淀于0.5mol/L的乙酸溶液中用胃蛋白酶和复合性蛋白酶双酶酶解72h；酶解液离心30min，取上清液加入4mol/L的...

【专利技术属性】
技术研发人员：晏柳清，罗丹，田兴华，鲁晓萍，赵智程，
申请(专利权)人：四川森科制药有限公司，
类型：发明
国别省市：