一种高F值低聚肽溶液及其制备方法、应用技术

本发明专利技术属于低聚肽制备技术领域，具体涉及一种高F值低聚肽溶液及其制备方法、应用。本发明专利技术采用四酶两步梯度pH法制备得到的高F值低聚肽达到50以上，在蛋白酶的种类选择上进行了创新，使得低聚肽的F值显著高于现有技术中小于40的F值。40的F值。

A high F value oligopeptide solution and its preparation method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种高F值低聚肽溶液及其制备方法、应用


[0001]本专利技术属于低聚肽制备
，具体涉及一种高F值低聚肽溶液及其制备方法、应用。

技术介绍

[0002]低聚肽是蛋白酶作用于食物（小麦或玉米）蛋白质后形成的一种低分子量生理活性肽，此肽由支链氨基酸含量高和芳香族氨基酸含量低的特殊氨基酸组成。F值（Fischer ratio），是支链氨基酸（BCAA：Val，Ile，Leu）与芳香族氨基酸（AAA: Trp，Tyr，Phe）含量的摩尔数比值。
[0003]低聚肽是一类富含支链氨基酸的小肽混合物，且亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸具有较强的疏水作用，所以低聚肽应具有多种生物活性。目前，所得到低聚肽的F值均在40以下，低聚肽的F值不断提高并接近40。实际上F值较高的低聚肽的应用已从最初的保肝护肝、辅助肝性脑病及苯丙酮尿症治疗延伸到抗疲劳、抗衰老性领域。所以，低聚肽研究将是活性肽热点研究领域之一，提高低聚肽的F值也一直是本领域技术人员不断研究的内容。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种高F值低聚肽溶液及其制备方法、应用，同时还提供一种高F值低聚肽粉体及应用。
[0005]本专利技术所采用的技术方案为：一种高F值低聚肽溶液的制备方法，包括以下步骤：1）向小麦谷朊粉中加入水调整蛋白质含量至8
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12%，调整pH为9
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10；2）添加碱性蛋白酶和胰蛋白酶，酶解至溶液pH为4
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6稳定至少1h不变；3）添加中性蛋白酶和菠萝蛋白酶，酶解至溶液pH稳定为6
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8；所得溶液中低聚肽的F值达到50以上。
[0006]以蛋白质量计，所述碱性蛋白酶的添加量为0.8
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1.2U/g，胰蛋白酶的添加量为8
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10U/g；中性蛋白酶的添加量为13
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16U/g，菠萝蛋白酶的添加量为9
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11U/g。
[0007]进一步优选，以蛋白质量计，所述碱性蛋白酶的添加量为1U/g，胰蛋白酶的添加量为9U/g；中性蛋白酶的添加量为15U/g，菠萝蛋白酶的添加量为10U/g。
[0008]所述碱性蛋白酶的酶活≥160万u/g，所述胰蛋白酶的酶活≥380万u/g，所述中性蛋白酶的酶活≥10万u/g，所述菠萝蛋白酶的酶活≥80万u/g。
[0009]采用上述制备方法制得的高F值低聚肽溶液。
[0010]高F值低聚肽溶液在制备保护DNA方面药物中的应用。
[0011]高F值低聚肽溶液在制备修复DNA损伤方面药物中的应用。
[0012]高F值低聚肽溶液经喷雾干燥得到高F值低聚肽粉体。
[0013]高F值低聚肽粉体在制备保护DNA方面药物中的应用。
[0014]高F值低聚肽粉体在制备修复DNA损伤方面药物中的应用。
[0015]与现有技术相比，本专利技术的有益技术效果是：1、本专利技术采用四酶两步梯度pH法制备得到的高F值低聚肽达到50以上，在蛋白酶的种类选择上进行了创新，使得低聚肽的F值显著高于现有技术中小于40的F值。
[0016]2、本专利技术第一次酶解开始在碱性环境中进行，主要对谷朊粉中的碱性蛋白质（又叫麦谷蛋白）进行酶解，此时选择的pH环境有利于谷朊粉的分散，更有利于进行酶解。麦谷蛋白在面筋网络中，是面筋网络的主要成分，是面筋网络的骨架，第一次酶解时，碱性蛋白酶与胰蛋白酶协同作用，碱性蛋白破坏半胱氨酸残基的交联从而使麦谷蛋白的骨架结构塌陷，胰蛋白酶进一步酶解，切开连接蛋白质分子质的各个基位点，达到使麦谷蛋白成为含有支链氨基酸低聚肽的目的。
[0017]3、第二次酶解在中性环境下进行，主要对谷朊粉中的麦醇溶蛋白（又叫麦胶蛋白）进行酶解。菠萝蛋白酶首先是破坏分子间氢键、二硫键，减弱麦醇溶蛋白分子间的作用力，使其分散性更好，酶切各种低聚肽；中性蛋白酶（preScission蛋白酶）酶切位点是缬氨酸、亮氨酸（均为支链氨基酸），二者配合得到更多的富含支链氨基酸的低聚肽（即高F值低聚肽）。
[0018]4、本专利技术在对低聚肽溶液的研究过程中发现，基于DNA损伤疲劳模型发现本专利技术高F值低聚肽能够显著增强ATP 酶水解活性以及提高ATP 合成酶活性，提高骨骼肌能量；降低MDA产生，促使抗氧核应激蛋白NRF2 核内水平上升，提高线粒体融合蛋白Mfn2 的表达，降低裂解蛋白Drp1 的表达，使处于非最佳状态的线粒体通过互相融合提高质量，从而最终提高合成ATP 的能力。
具体实施方式
[0019]下面结合实施例来说明本专利技术的具体实施方式，但以下实施例只是用来详细说明本专利技术，并不以任何方式限制本专利技术的范围。
[0020]以下实施例中，碱性蛋白酶的酶活≥160万u/g，所述胰蛋白酶的酶活≥380万u/g，所述中性蛋白酶的酶活≥10万u/g，所述菠萝蛋白酶的酶活≥80万u/g。
[0021]实施例1：一种高F值低聚肽溶液的制备方法，包括以下步骤：1）以小麦谷朊粉1000克为原料（蛋白含量85%），加入水调整蛋白质含量至10%，调整pH为9；2）以蛋白质量计添加碱性蛋白酶和胰蛋白酶，碱性蛋白酶的添加量为1 U/g，胰蛋白酶的添加量为9 U/g，酶解至溶液pH为4
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6稳定至少1h不变；3）以蛋白质量计添加中性蛋白酶和菠萝蛋白酶，中性蛋白酶的添加量为15 U/g，菠萝蛋白酶的添加量为10 U/g，酶解至溶液pH稳定为6
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8，得到高F值低聚肽溶液（60mg/ml）。经检测该低聚肽溶液中低聚肽的F值为51.8。
[0022]实施例2：一种高F值低聚肽溶液的制备方法，包括以下步骤：1）以小麦谷朊粉1000克为原料（蛋白含量85%），加入水调整蛋白质含量至8%，调整pH为10；2）以蛋白质量计添加碱性蛋白酶和胰蛋白酶，碱性蛋白酶的添加量为0.8 U/g，胰
蛋白酶的添加量为10 U/g，酶解至溶液pH为4
‑
6稳定至少1h不变；3）以蛋白质量计添加中性蛋白酶和菠萝蛋白酶，中性蛋白酶的添加量为13 U/g，菠萝蛋白酶的添加量为11 U/g，酶解至溶液pH稳定为6
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8，得到高F值低聚肽溶液（48mg/ml）。经检测该低聚肽溶液中低聚肽的F值为54.6。
[0023]实施例3：一种高F值低聚肽溶液的制备方法，包括以下步骤：1）以小麦谷朊粉1000克为原料（蛋白含量85%），加入水调整蛋白质含量至12%，调整pH为9；2）以蛋白质量计添加碱性蛋白酶和胰蛋白酶，碱性蛋白酶的添加量为1.2 U/g，胰蛋白酶的添加量为8 U/g，酶解至溶液pH为4
‑
6稳定至少1h不变；3）以蛋白质量计添加中性蛋白酶和菠萝蛋白酶，中性蛋白酶的添加量为16 U/g，菠萝蛋白酶的添加量为9 U/g，酶解至溶液pH稳定为6
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8，得到高F值低聚肽溶液（55mg/ml）。经检测该低聚肽溶液中低聚肽的F值为57.1。
[0024本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高F值低聚肽溶液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）向小麦谷朊粉中加入水调整蛋白质含量至8
‑
12%，调整pH为9
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10；2）添加碱性蛋白酶和胰蛋白酶，酶解至溶液pH为4
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6稳定至少1h不变；3）添加中性蛋白酶和菠萝蛋白酶，酶解至溶液pH稳定为6
‑
8；所得溶液中低聚肽的F值达到50以上。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：以蛋白质量计，所述碱性蛋白酶的添加量为0.8
‑
1.2 U/g，胰蛋白酶的添加量为8
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10 U/g；中性蛋白酶的添加量为13
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16 U/g，菠萝蛋白酶的添加量为9
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11 U/g 。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄继红，侯银臣，郭卫芸，廖爱美，魏兆君，杜丽平，潘龙，杨铭乾，王永辉，卢作焜，舒朋华，魏泉增，
申请(专利权)人：许昌学院，
类型：发明
国别省市：