一种颐和春制剂的薄层色谱检测方法技术

本发明专利技术属于药品质量控制技术领域，具体涉及一种颐和春制剂的薄层色谱检测方法，包括以下步骤：(1)制备供试品溶液；(2)制备对照品溶液；(3)薄层检测，喷以显色剂，加热至斑点显色清晰，分别置于日光和紫外光灯下检视；得色谱检视图。与现有质量标准相比，本发明专利技术得到的人参皂苷Rg1的R

【技术实现步骤摘要】
一种颐和春制剂的薄层色谱检测方法
本专利技术属于药品质量控制
，具体涉及一种颐和春制剂的薄层色谱检测方法。
技术介绍
颐和春口服液由人参、川牛膝、狗肾、熟地黄、鹿茸、淫羊藿、韭菜子、蛇床子、锁阳、鹿鞭、北沙参等15味药材经提取制备而成，能够补肾壮阳，用于肾阳虚引起的阳痿、遗精、腰膝酸软，其疗效显著、副作用小、使用方便。其中人参为君药，为了保证产品质量，研究一种适合颐和春口服液中人参的鉴别方法尤为重要。传统高效液相色谱具有灵敏度高、准确度高等优点，已成为控制中药质量的重要手段之一，其基本模式为等度和梯度洗脱，将这两种模式组合应用，可将成分较好分离开。现有技术中常采用高效液相色谱法测定含人参中药制剂中人参皂苷Rg1，Re，Rb1的含量。中国专利申请CN102435697A公开了一种心舒胶囊中人参皂苷Rg1和Rb1含量的测定方法，检测方法为梯度洗脱方法，同时检测Rb1和Rg1。中国专利申请CN104807905A公开了一种心脑宁片中人参皂苷Rg1和Re含量的测定方法。采用梯度洗脱方法，同时检测Re和Rg1，线性关系良好、精密度高、稳定性好、回收率高，简便、快捷并且准确可行。以上现有技术中均公开了采用HPLC等度和梯度结合方式进行检测中药制剂中人参皂苷Rg1，Re，Rb1的含量检测。但由于颐和春制剂由15种中药组成，其组分比较复杂，多于其他中药制剂组分；同时等度和梯度洗脱的组合方式难以计数，且梯度洗脱的分离机理比较复杂，现有文献披露的实验方案无法满足颐和春制剂中人参皂苷Rg1，Re，Rb1的分离和含量检测，而且采用HPLC方法需要有价格昂贵的相应仪器，且分离时间长。薄层色谱又称薄层层析，可以快速的的进行药物成分的定性，它是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、检定和定量的一种层析分离技术。但颐和春口服液处方中药味较多，成分复杂，现行标准中人参皂苷Rg1、Re对照品斑点的Rf值均小于0.1，效果不佳。因此，提供一种适合颐和春口服液中人参的薄层色谱鉴别方法具有重要的意义。
技术实现思路
为克服以上技术问题，本专利技术提供了一种颐和春制剂中人参的薄层色谱检测方法，该方法简单易行，能够得到准确的鉴别结果。为实现以上目的，本专利技术提供的技术方案如下：一种颐和春制剂中人参的薄层色谱检测方法，包括以下步骤：取颐和春制剂供试品溶液、对照品溶液、对照药材溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-乙酸乙酯-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以显色剂，加热至斑点显色清晰，分别置于日光和紫外光灯(365nm)下检视；得色谱检视图。颐和春制剂中人参的薄层色谱检测方法，包括以下步骤：(1)制备供试品溶液：a)取颐和春制剂配置成水溶液，经乙醚萃取后的水相用正丁醇提取，正丁醇提取液经氨试液洗涤，浓缩干燥，得正丁醇提取物；b)正丁醇提取物经大孔树脂柱层析洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，以干燥物制备供试品溶液；(2)制备对照品溶液：以人参皂苷Rg1对照品制备对照品溶液；和/或以人参药材制备对照品溶液；(3)薄层检测：分别将供试品溶液和对照品溶液在薄层板上点样，以正丁醇-乙酸乙酯-水系统为展开剂展开，显色，检视，比对即可。优选地，所述柱层析的洗脱条件为依次用水、30-50％乙醇、60-80％乙醇洗脱，收集60-80％乙醇洗脱液；优选用水、40％乙醇、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液。优选地，所述柱层析的洗脱液为1.7-3.1个柱体积的水、1.0-2.0个柱体积的40％乙醇、1.7-2.5个柱体积的70％乙醇。优选地，所述柱层析的洗脱溶剂为2.4个柱体积的水、1.4个柱体积的40％乙醇、2.4个柱体积的70％乙醇洗脱。优选地，所述乙醚萃取次数为1-3次，正丁醇提取次数为1-4次，氨试液洗涤1-3次；所述浓缩干燥为蒸干干燥。优选地，所述薄层板为硅胶G薄层板。优选地，所述颐和春制剂供试品溶液的制备方法如下：(1)取颐和春制剂的水溶液30ml，加乙醚提取2次，每次20ml，得乙醚液和水相，弃去乙醚液，水相用水饱和正丁醇提取3次(30ml、30ml、20ml)，合并正丁醇提取液；(2)将正丁醇提取液用氨试液洗涤2次，每次40ml，置于水浴上蒸干后的残渣加水30ml溶解，得水溶液；(3)将水溶液通过D101大孔树脂柱(内径为1.5cm，柱高为12cm)，依次用水50ml、40％乙醇30ml和70％乙醇50ml洗脱，收集70％乙醇洗脱液，蒸干后的残渣加1ml甲醇溶解。优选地，供试品溶液的点样量为3-7μl，人参皂苷Rg1对照品溶液的点样量为1-4μl，人参药材对照品溶液的点样量为1-3μl。优选地，供试品溶液的点样量为3μl，人参皂苷Rg1对照品溶液的点样量为2μl，人参药材对照品溶液的点样量为2μl。优选地，所述展开剂为体积比为3-5:1-2:4-7的正丁醇-乙酸乙酯-水的上层溶液。优选地，所述展开剂为体积比为4:1:5的正丁醇-乙酸乙酯-水的上层溶液。优选地，所述显色的显色剂为5-20％硫酸乙醇溶液。优选地，所述显色的显色剂为10％硫酸乙醇溶液。优选地，所述显色的条件为加热；优选地，所述显色的加热温度为90-110℃。优选地，所述显色的加热温度为105℃。优选地，所述检视为置于日光和/或紫外光灯下观察。优选地，所述干燥物用甲醇溶解制备供试品溶液；所述人参皂苷Rg1对照品用甲醇溶解制备对照品溶液。优选地，所述以人参药材制备对照品溶液的步骤为：取人参对照药材，三氯甲烷加热回流，药渣加水饱和正丁醇，超声处理，吸取上清液加2-5倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇。优选地，所述以人参药材制备对照品溶液的步骤为：取人参对照药材1g，加三氯甲烷40ml，加热回流1小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加水0.5ml搅拌湿润，加水饱和正丁醇10ml，超声处理30分钟，吸取上清液加3倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解。本专利技术所述的颐和春制剂选自颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液以及其他药学上可接受的的剂型中的任一种。本专利技术所述的颐和春制剂，由人参、川牛膝、狗肾(制)、锁阳、鹿茸(去毛)、淫羊藿、鹿鞭(制)、沙参、冰片、蛇床子、熟地黄、韭菜子(炒)、复盆子、附子(制)、路路通为十五味原料制备而得。优选地，本专利技术所述的颐和春制剂，由人参60～90g、川牛膝40-60g、狗肾(制)80-120g、锁阳80-120g、鹿茸(去毛)10-15g、淫羊藿160-240g、鹿鞭(制)2.4-3.6g、沙参80-120g、冰片2-3g、蛇床子160-240g、熟地黄80-120g、韭菜子(炒)100-150g、复盆子60-90g、附子(制)40-60g、路路通60-90g十五味原料制备而得。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种颐和春制剂中人参的薄层色谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)制备供试品溶液：/na)取颐和春制剂配置成水溶液，经乙醚萃取后的水相用正丁醇提取，正丁醇提取液经氨试液洗涤，浓缩干燥，得正丁醇提取物；/nb)正丁醇提取物经大孔树脂柱层析洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，以干燥物制备供试品溶液；/n(2)制备对照品溶液：/n以人参皂苷Rg1对照品制备对照品溶液；和/或以人参药材制备对照品溶液；/n(3)薄层检测：/n分别将供试品溶液和对照品溶液在薄层板上点样，以正丁醇-乙酸乙酯-水系统为展开剂展开，显色，检视，比对即可。/n

【技术特征摘要】
1.一种颐和春制剂中人参的薄层色谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)制备供试品溶液：
a)取颐和春制剂配置成水溶液，经乙醚萃取后的水相用正丁醇提取，正丁醇提取液经氨试液洗涤，浓缩干燥，得正丁醇提取物；
b)正丁醇提取物经大孔树脂柱层析洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，以干燥物制备供试品溶液；
(2)制备对照品溶液：
以人参皂苷Rg1对照品制备对照品溶液；和/或以人参药材制备对照品溶液；
(3)薄层检测：
分别将供试品溶液和对照品溶液在薄层板上点样，以正丁醇-乙酸乙酯-水系统为展开剂展开，显色，检视，比对即可。


2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述柱层析的洗脱条件为依次用水、30-50％乙醇、60-80％乙醇洗脱，收集60-80％乙醇洗脱液；优选用水、40％乙醇、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液。


3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述展开剂为体积比为3-5:1-2:4-7的正丁醇-乙酸乙酯-水的上层溶液；优选为体积比为4:1:5的正丁醇-乙酸乙酯-水的上层溶液。


4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述显色的显色剂为5-20％硫酸乙醇溶液，优选为10％硫酸乙醇溶液，显色条件为加热。


5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述干燥物用甲醇溶解制备供试品溶液；所述人参皂苷Rg1对照品用甲醇溶解制备对照品溶液。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐海涛，王丹丹，葛海涛，王殿广，杨冰，
申请(专利权)人：江苏苏中药业集团股份有限公司，江苏苏中药业研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32