蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法及蛇莓药材质量控制方法技术

本发明专利技术公开了一种蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法及蛇莓药材质量控制方法，所述测定方法包括，首先采用盐酸溶液提取蛇莓药材中的没食子酸获得提取液，而后采用高效液相色谱法检测提取液中没食子酸的含量。该方法提取效果更加充分，同时，盐酸溶液提取物在后续的高效液相色谱检测过程中具有更好的溶解性，得到的流动相更加稳定，使得检测结果更加准确。本发明专利技术还将得到的没食子酸特征图谱用于蛇莓药材的质量控制，在稳定、准确地检测蛇莓药材中没食子酸含量的基础上，对蛇莓药材的质量作出准确的评估，保证了使用蛇莓药材生产制得药品的质量。

【技术实现步骤摘要】
蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法及蛇莓药材质量控制方法
本专利技术涉及中药分析
，具体而言，涉及蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法及蛇莓药材质量控制方法。
技术介绍
蛇莓药材始载于《名医别录》，后收载于《北京市中药材标准》(1994版)、《山东省中药材标准》(2002版)、《云南省中药材标准》(2005版)、《湖南省中药材标准》(2009版)等。蛇莓属蔷薇科，有着众多别名，如蛇泡草、龙吐珠、三爪凤等等，多年生草本，全株有柔毛；匍匐茎长。小叶片倒卵形至菱状长圆形，长2-3.5(-5)厘米，宽1-3厘米；花单生于叶腋；直径1.5-2.5厘米；瘦果卵形，长约1.5毫米，光滑或具不明显突起，鲜时有光泽。花期6-8月，果期8-10月。多野生于山坡、草地上、路旁、沟边或田埂杂草中；全国各地都有分布。全草供药用，有清热解毒、活血散瘀、收敛止血作用，又能治毒蛇咬伤，敷治疔疮等；并用于杀灭蝇蛆。全草含甲氧基去氢胆甾醇(methoxydehydrochlesterol)，低聚缩合鞣质(lowercondensedtannin)，并没食子鞣质(ellagitannin)，总蛋白，总非结构性碳水化合物(totalnonstructuralcarbonhydrate)，没食子酸(gallicacid)，已糖(hexose)，戊糖(pentose)，糖醛酸(uronicacid)，蛋白质(protein)，蛋白质鞣质多糖(proteintannicpolysaccharide)，酚性物质(phenolicsubstance)，又含熊果酸(ursolicacid)，委陵菜酸(tormenticacid)，野蔷薇葡萄糖酯(rosamultin)，刺梨甙(kajiichigoside)F，6-甲氧基柚皮素(6-methoxynaringenin)，杜鹃素(farrerol)，β-谷甾醇(β-sitosterol)，硬脂酸(stearicacid)，白桦甙(betuloside)，蛇莓并没食子甙(duchesellagiside)A、B，山柰酚-3-O-芸香糖甙(kaempferol-3-O-rutinoside)及山柰酚-3-O-刺槐二糖甙(kaempferol-3-O-robinobioside)的多种化学组分，但在目前可依据的质量标准中，如《天津市中药饮片炮制规范(2012年版)》，仅包括对性状和炮制方法进行描述，尚无对有效药用组分进行定性、定量等质量标准用以控制药材质量。鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法、蛇莓药材特征图谱的构建方法、构建方法得到的蛇莓药材特征图谱在蛇莓药材质量控制中的应用和蛇莓药材质量控制方法，以实现对蛇莓药材质量的综合评价。本专利技术是这样实现的：第一方面，本专利技术提供一种蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法，所述测定方法包括，采用高效液相色谱法检测蛇莓药材中没食子酸提取液中没食子酸的含量；其中，采用盐酸溶液提取蛇莓药材中的没食子酸获得蛇莓药材中没食子酸提取液。在可选的实施方式中，所述盐酸溶液体积百分为1％～5％。优选地，所述盐酸溶液浓度为3％。在可选的实施方式中，所述蛇莓药材包括蛇莓药材粉末。优选地，所述蛇莓药材粉末包括采用四号筛筛选得到的。在可选的实施方式中，所述蛇莓药材与盐酸溶液的质量体积比为1:100。第二方面，本专利技术提供一种蛇莓药材特征图谱的构建方法，所述构建方法包括，设定色谱条件，将包含没食子酸的对照品溶液与包含蛇莓药材的盐酸提取溶液的供试品溶液通过高效液相色谱检测，得到特征图谱。在可选的实施方式中，所述色谱条件为：色谱柱：AgelaVenusilMPC18(4.6*250mm，5um100A)；流动相：甲醇-1.7％冰醋酸(1：99)；波长：273nm；流速：1.0mL/min；柱温：30℃。第三方面，本专利技术提供根据前述实施方式所述的蛇莓药材特征图谱的构建方法在蛇莓药材质量控制中的应用。第四方面，本专利技术提供一种蛇莓药材质量控制方法，所述质量控制方法包括，应用前述实施方式所述的构建方法得到的特征图谱筛选没食子酸含量在1.09mg/g以上的蛇莓药材。在可选的实施方式中，所述的质量控制方法还包括，蛇莓药材的性状筛选、显微鉴别、薄层鉴别、水分测定、总灰分测定、酸不溶性灰分测定、重金属含量测定、砷盐含量测定中的至少两种或两种以上筛选方法。在可选的实施方案中，所述的性状筛选是指，通过观察蛇莓的外观，筛选出具有如下性状的蛇莓药材：根细小，棕色至棕褐色。茎长而纤细，直径约1mm，表面黄绿色或黄棕色，被白色毛茸。三出复叶，小叶黄绿色至暗绿色，多皱缩，完整的小叶展平后，呈菱状卵形或倒卵形，长1.5～4cm，宽1～3cm，基部楔形，边缘有钝锯齿，两面散生柔毛或上面近无毛。花单生于叶腋，具长柄。聚合果暗红色，球形，由多数小瘦果聚合而成。气微，味淡。在可选的实施方案中，所述的显微鉴别是指，将蛇莓叶置于显微镜下观察蛇莓叶片组织及细胞结构，并从中选出具有以下性状的蛇莓药材：上表皮细胞类多角形，垂周壁平直，排列紧密。下表皮细胞垂周壁波状弯曲。非腺毛单细胞，长短不一，长180～1300μm，直径20～45μm，壁平直或表面有螺状纹理。腺毛长60～125μm，头部2细胞，直径25～40μm；柄2～3细胞。下表皮气孔较多，不定式或不等式，叶肉细胞中含草酸钙簇晶众多，直径10～38μm。在可选的实施方式中，所述的薄层鉴别是指选择蛇莓中的有效药用组分作为对照品，对蛇莓的提取物进行薄层层析，判断蛇莓中有效药用组分的含量进行判断。蛇莓主要化学成分包括酚酸类、黄酮类和三萜类。其中酚酸类主要为没食子酸，三萜类包括熊果酸、齐墩果酸等。没食子酸具有抗炎、抗突变、抗氧化等生物学效应，且在药材中含量较高，因此，在可选的实施方式中，选择没食子酸作为对照品对蛇莓药材进行薄层鉴别。在可选的实施方式中，选择没食子酸作为对照品对蛇莓药材进行薄层鉴定，其薄层层析的条件为：吸附剂硅胶G；点样量样品8μL、对照品2μL；展开剂甲苯、醋酸乙酯和甲酸，所述甲苯、醋酸乙酯和甲酸的体积比为5:4:1；显色喷以2％铁氰化钾-2％三氯化铁溶液。在可选的实施方式中，所述的水分测定是指通过蛇莓药材干燥前后的重量变化，测定蛇莓中水分的含量。在可选的实施方式中，所述水分测定中干燥温度为100～105℃。在可选的实施方式中，所述总灰分测定是指使蛇莓药材在500～600℃下完全碳化后得到的残渣重量。由于不同蛇莓药材个体之间含有的无机物差异较大，尤其是含多量草酸钙结晶的生药，测定总灰分并不足以说明外来无机物的存在，还需要测定酸不溶性灰分，所述在可选的实施方式中，还采用稀盐酸处理总灰分，并计算总灰分中的酸不溶性灰分。在可选的实施方式中，所述处理总灰分的稀盐酸包括质量分数为10％的盐酸水溶液。在可本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法，其特征在于，所述测定方法包括，/n采用高效液相色谱法检测蛇莓药材中没食子酸提取液中没食子酸的含量；其中，采用盐酸溶液提取蛇莓药材中的没食子酸获得蛇莓药材中没食子酸提取液。/n

【技术特征摘要】
1.一种蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法，其特征在于，所述测定方法包括，
采用高效液相色谱法检测蛇莓药材中没食子酸提取液中没食子酸的含量；其中，采用盐酸溶液提取蛇莓药材中的没食子酸获得蛇莓药材中没食子酸提取液。


2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述盐酸溶液的体积百分比为1％～5％；
优选地，所述盐酸溶液的浓度为3％。


3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述蛇莓药材包括蛇莓药材粉末，所述蛇莓药材粉末包括采用四号筛筛选得到的。


4.根据权利要求1～3任一项所述的测定方法，其特征在于，所述蛇莓药材与盐酸溶液的质量体积比为1:100。


5.一种蛇莓药材特征图谱的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括，设定色谱条件，将包含没食子酸的对照品溶液与包含蛇莓药材的盐酸提取溶液的供试品溶液通过高效液相色谱检测，得到特征图谱。


6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述色谱条件为：
色谱柱：AgelaVenusilMPC18；
流动相：甲醇-1.7％冰醋酸；
波长：273nm；
流速：1.0mL/min；
柱温：30℃。


7.权利要求5或6所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：周建宇，李萍，闫晓楠，韩志峰，刘稚菲，冯京，刘伟，谷翠丽，陈云霞，侯建松，
申请(专利权)人：天津中新药业集团股份有限公司隆顺榕制药厂，天津中新药业集团股份有限公司研究院分公司，
类型：发明
国别省市：天津;12