一种抗肿瘤的白桦酸衍生物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种抗肿瘤的白桦酸衍生物及其制备方法，制备方法包括：以白桦酸为原料，通过羧基还原、羟基与磺酰氯生成磺酸酯、硅胶柱洗脱纯化等步骤，得到结构新颖的白桦酸衍生物；病理实验表明，该化合物对人卵巢癌细胞(A2780)、人肺癌细胞(A‑549)、人宫颈癌细胞(Hela)具有显著的体外增殖抑制作用，可作为抗肿瘤药物开发的先导性化合物；本发明专利技术提供的制备白桦酸衍生物的方法具有制备工艺简单、成本低、适合于工业化大生产的特点。

The invention relates to an antitumor betulinic acid derivative and a preparation method thereof

【技术实现步骤摘要】
一种抗肿瘤的白桦酸衍生物及其制备方法
本专利技术属于化学药物合成
，涉及一种抗肿瘤的白桦酸衍生物及其制备方法。
技术介绍
白桦酸的天然含量很少，一般是由白桦醇制备而来，白桦酸具有广泛的生物活性，其中抗肿瘤活性是近年来研究的热点之一，但由于白桦酸的选择性低，生物利用度不高，溶解性达不到临床应用的需求。为使天然产物发挥理想的功效，人们尝试对其结构经行改性以完善其性质。为此，人们做了这方面的大量研究，例如，Urban(JournalofNaturalProducts,2004,67(7))等直接对A环进行了扩环和开环，但是结构改造后的白桦酸衍生物活性与白桦酸相比没有明显提高，并且少数化合物的活性反而有所下降；Mar等(Bioor-ganic&MedicinalChemistryLetters,2010,20(18))则通过氧化与还原反应合成了含有氨基的白桦酸衍生物，但是相比于白桦酸，这些衍生物对肿瘤细胞的增殖抑制活性并未显著提高。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种抗肿瘤的白桦酸衍生物，其衍生物具有式(I)分子结构：本专利技术的一个目的是提供抗肿瘤的白桦酸衍生物的制备方法，包括如下步骤：(1)以白桦酸为原料，在室温条件下加入有机溶剂充分溶解，于室温条件下加入硼氢化钠，搅拌1h，再加入路易斯酸，升温至50～80℃，回流反应5～10h，过滤，滤液用乙醚或二氯甲烷萃取，浓缩，用丙二醇乙醚萃取，合并有机相，浓缩、干燥，即可；(2)将步骤(1)的产物溶解于吡啶中，加入2-甲基-5-硝基苯磺酰氯，在室温下反应10～15h，加水淬灭反应，反应液依次用盐酸、碳酸氢钠溶液、水洗涤，过滤，滤液用无水硫酸镁干燥，得粗产物，粗产物经硅胶柱层析洗脱纯化，收集洗脱液，在真空条件下浓缩、干燥，即得目标产物；上述制备方法，步骤(1)中，所述有机溶剂选自四氢呋喃、丙酮、环己烷、乙酸乙酯或正丁醇；所述白桦酸与所述硼氢化钠的投料摩尔比为1:2.0～3.2；所述路易斯酸选自氯化锌、氯化锆、氯化铝或氯化铁；上述制备方法，步骤(2)中，所述硅胶柱层析洗脱中洗脱液为氯仿-丙酮混合液，氯仿-丙酮体积比100:0、70:1、50:1、30:1、10:1、5:1、1:1、0:100，利用薄层色谱检测，获取多个组分，收集氯仿-丙酮体积比5:1的组分。根据上述制备方法的一种优选，包括如下步骤：(1)以20g白桦酸为原料，在室温条件下加入四氢呋喃充分溶解，于室温条件下加入5.3g硼氢化钠，搅拌1h，再加入氯化锌，升温至50℃，回流反应10h，过滤，滤液用乙醚或二氯甲烷萃取，浓缩，用丙二醇乙醚萃取，合并有机相，浓缩、干燥，即可；(2)将步骤(1)的产物溶解于吡啶中，加入2-甲基-5-硝基苯磺酰氯，在室温下反应10～15h，加水淬灭反应，反应液依次用盐酸、碳酸氢钠溶液、水洗涤，过滤，滤液用无水硫酸镁干燥，得粗产物，粗产物经硅胶柱层析洗脱纯化，硅胶柱层析洗脱中洗脱液为氯仿-丙酮混合液，氯仿-丙酮体积比100:0、70:1、50:1、30:1、10:1、5:1、1:1、0:100，利用薄层色谱检测，获取多个组分，收集氯仿-丙酮体积比5:1的组分，在真空条件下浓缩、干燥，即得目标产物。本专利技术衍生物用于抑制人卵巢癌、人肺癌和人宫颈癌。本专利技术衍生物用于制备抗人卵巢癌细胞药物。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术的白桦酸衍生物结构简单，人工合成容易实现，对环境友好，溶剂可回收利用；对该化合物进行抗肿瘤活性筛选，发现对人卵巢癌细胞(A2780)、人肺癌细胞(A-549)、人宫颈癌细胞(Hela)具有显著的体外增殖抑制作用，半数抑制浓度(IC50)为18.69μmol/L、28.18μmol/L、22.38μmol/L，其中对人卵巢癌细胞的抑制效果略低于阳性药物顺铂(IC50＝14.21μmol/L)，说明本专利技术的衍生物可作为抗癌药物的先导化合物，对于开发抗肿瘤药物是十分有意义的。附图说明图1：实施例1为抗肿瘤白桦酸衍生物核磁共振氢谱图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合具体实施方式对本专利技术作进一步的详细描述，但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于下述实施例。实施例1(1)以20g白桦酸为原料，在室温条件下加入75mL四氢呋喃充分溶解，于室温条件下加入5.3g硼氢化钠，搅拌1h，再加入氯化锌，升温至50℃，回流反应10h，过滤，滤液用乙醚或二氯甲烷萃取，水相浓缩，用丙二醇乙醚萃取，合并有机相，浓缩、干燥，即可；(2)将步骤(1)的产物溶解于80mL吡啶中，加入2-甲基-5-硝基苯磺酰氯，在室温下反应10～15h，加100mL水淬灭反应，反应液依次用盐酸、碳酸氢钠溶液、水洗涤，过滤，滤液用无水硫酸镁干燥，得粗产物，粗产物经硅胶柱层析洗脱纯化，硅胶柱层析洗脱中洗脱液为氯仿-丙酮混合液，氯仿-丙酮体积比100:0、70:1、50:1、30:1、10:1、5:1、1:1、0:100，利用薄层色谱检测，获取多个组分，收集氯仿-丙酮体积比5:1的组分，在真空条件下浓缩、干燥，即得目标产物。产率80.38％。核磁共振氢谱检测：将样品放入样品管中，用注射器取0.5mLCDCL3(氘代氯仿)注入样品管，使样品充分溶解。要求样品与试剂充分混合，溶液澄清、透明、无悬浮物或其他杂质，经核磁共振鉴定，得到核磁共振氢谱图，结果见如图1。实验例2本专利技术化合物的抗肿瘤药学研究(1)体外试验：采用常规MTT法，测定了本专利技术化合物白桦酸衍生物对5种人癌细胞增殖的抑制作用。选取乳腺癌细胞(MCF-7)、人卵巢癌细胞(A2780)、人肺癌细胞(A-549)、人宫颈癌细胞(Hela)、人肝癌细胞(HepG2)作为测试细胞株。取对数生长期的肿瘤细胞，用胰酶消化后，离心后，用含10％小牛血清的RPMI1640配制成5000个/mL的细胞悬浮液，以每孔200μL接种于96孔板中，置于37℃,5％CO2培养箱中培养24h。每孔加入200μL新鲜配制的含0.2mg/mLMTT的无血清培养基，37℃培养4h，弃去上清液，加入200μLDMSO，振荡溶解后，经检测仪在570nm处测定吸光度A值，每组样品平行测定3次，取平均值，结果见表1。表1本专利技术化合物对癌细胞的半数抑制浓度(IC50)由表1的测试结果表明，本专利技术的白桦酸衍生物对乳腺癌细胞(MCF-7)、人卵巢癌细胞(A2780)、人肺癌细胞(A-549)、人宫颈癌细胞(Hela)具有显著的体外增殖抑制作用，其中，山楂酸衍生物对人卵巢癌细(A2780)的半数抑制浓度(IC50)为18.69μmol/L，其效果略低于阳性药物顺铂(IC50＝14.21μmol/L)，但也说明本专利技术白桦酸的衍生物在疗癌症方面显示了巨大的潜力。(2)体内试验：本专利技术衍生物对裸鼠人卵巢癌细胞影响选取处于生长旺盛期的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗肿瘤的白桦酸衍生物，其特征在于，所述衍生物具有式(I)分子结构：/n

【技术特征摘要】
1.一种抗肿瘤的白桦酸衍生物，其特征在于，所述衍生物具有式(I)分子结构：

。


2.一种抗肿瘤的白桦酸衍生物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)以白桦酸为原料，在室温条件下加入有机溶剂充分溶解，加入硼氢化钠，搅拌1h，再加入路易斯酸，升温至50～80℃，回流反应5～10h，过滤，滤液用乙醚或二氯甲烷萃取，浓缩，用丙二醇乙醚萃取，合并有机相，浓缩、干燥，即可；
(2)将步骤(1)的产物溶解于吡啶中，加入2-甲基-5-硝基苯磺酰氯，在室温下反应10～15h，加水淬灭反应，反应液依次用盐酸、碳酸氢钠溶液、水洗涤，过滤，滤液用无水硫酸镁干燥，得粗产物，粗产物经硅胶柱层析洗脱纯化，收集洗脱液，在真空条件下浓缩、干燥，即得目标产物；
步骤(1)中，所述有机溶剂选自四氢呋喃、丙酮、环己烷、乙酸乙酯或正丁醇；
所述白桦酸与所述硼氢化钠的投料摩尔比为1:2.0～3.2；
所述路易斯酸选自氯化锌、氯化锆、氯化铝或氯化铁；
步骤(2)中，所述硅胶柱层析洗脱中洗脱液为氯仿-丙酮混合液，氯仿-丙酮体积比100:0、70:1、50:1、30:1、10:1、5:1、1:1、...

【专利技术属性】
技术研发人员：籍建亚，
申请(专利权)人：籍建亚，
类型：发明
国别省市：广东;44