一种筛选特异BCR/TCR的方法及其系统技术方案

本发明专利技术公开了一种筛选特异BCR/TCR的方法及其系统。该方法包括以下步骤：筛选特异性BCR/TCR的方法，包括以下步骤：(1)提取免疫后的待测样本淋巴细胞中的mRNA；(2)逆转录处理步骤(1)所得mRNA后，再对其BCR/TCR可变区基因进行多重PCR扩增，然后进行高通量测序，并确定BCR/TCR可变区的核酸及氨基酸序列；(3)将测序得到的序列与未经抗原刺激样本的淋巴细胞BCR/TCR测序结果对比，获得相应的特异性免疫序列。本发明专利技术通过免疫图谱大数据进行对比，同时比较巨大数量的BCR/TCR序列，具有更高的特异性和准确性，可以极大提高抗体及T细胞受体筛选鉴定的效率，且筛选成本低。且筛选成本低。

A method and system for screening specific BCR / TCR

【技术实现步骤摘要】
一种筛选特异BCR/TCR的方法及其系统


[0001]本专利技术属于分子生物学和细胞免疫学
，具体涉及一种筛选特异性抗体(BCR)及T细胞受体(TCR)的方法及其系统。

技术介绍

[0002]单克隆抗体，是由单一B细胞产生的高度均一、识别特定抗原表位的抗体。单克隆抗体在医学与生物学基础研究，以及临床疾病的诊断、预防和治疗中都有广泛的应用前景。要得到针对特定抗原的单克隆抗体，需要进行抗体筛选。现有比较成熟的单克隆抗体筛选技术有：
[0003]1、杂交瘤技术。
[0004]将抗原免疫后的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，形成的杂交细胞既可产生抗体，又可无限增殖。将融合的杂交细胞分成单细胞接种培养，通过酶联免疫吸附测定(ELISA)等方法筛选鉴定增殖后细胞分泌的抗体，找到能产生针对抗原具有高滴度抗体的细胞株，再从其中克隆出该抗体的基因序列。
[0005]杂交瘤技术的主要缺点是，后期鉴定过程需要进行大量重复性的培养、分离、鉴定实验，带来的是高昂的时间和物质成本。
[0006]2、噬菌体展示筛选技术。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种筛选特异性BCR/TCR的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)分别提取N个免疫后的待测样本淋巴细胞中的mRNA；(2)逆转录处理步骤(1)所得mRNA后，再对其BCR/TCR可变区基因进行多重PCR扩增，然后进行高通量测序，并确定BCR/TCR可变区的核酸及氨基酸序列；(3)将测序得到的序列与未经抗原刺激样本的淋巴细胞BCR/TCR测序结果对比，获得相应的特异性免疫序列。2.根据权利要求1所述的筛选特异性BCR/TCR的方法，其特征在于，所述待测样本为包含淋巴细胞的外周血、脾脏组织、肿瘤组织或体外培养的淋巴细胞。3.根据权利要求1或2所述的筛选特异性BCR/TCR的方法，其特征在于，所述待测样本为人源样本或动物源样本。4.根据权利要求1所述的筛选特异性BCR/TCR的方法，其特征在于，所述步骤(3)还包括：将所有免疫后样本的BCR/TCR序列归总去重，再去除所有与未经抗原刺激样本的BCR/TCR测序结果序列集中所包含序列相重复的序列，建立特征性BCR/TCR序列集。5.根据权利要求1或4所述的筛选特异性BCR/TCR的方法，其特征在于，所述步骤(3)中特异性免疫序列的具体获得方式为：(1)从特征性BCR/TCR序列集中去除只在<N
×
10％个免疫后样本中出现的序列；(2)对特征性BCR/TCR序列集中所含有的共M种具有唯一性的BCR/TCR抗原决定簇3CDR3序列分别在N个免疫后样本...

【专利技术属性】
技术研发人员：张志新，卓越，杨鑫，
申请(专利权)人：成都益安博生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：