一种用于动物组织直接PCR扩增的方法技术

本发明专利技术公开了一种用于动物组织直接PCR扩增的方法，涉及生物医学技术领域，方法包括如下步骤：先使用取样器取动物组织加入PCR管中，再在PCR管中加入酶预混液、上游引物和下游引物并充分混匀，然后将PCR管放入PCR仪中进行扩增；取样器包括手柄和取样头，取样头可拆卸地安装在所述手柄上；酶预混液包括Tris

【技术实现步骤摘要】
一种用于动物组织直接PCR扩增的方法


[0001]本专利技术涉及生物医学
，具体涉及一种用于动物组织直接PCR扩增的方法。

技术介绍

[0002]目前的动物组织直接PCR扩增方法虽然声称无需核酸提取步骤，但都需要配合具有组织裂解液功能的溶液等先对动物组织样本进行加热裂解处理之后将裂解液的上清(含粗制的DNA)作为模板进行PCR扩增，并不是真正的在反应体系中加入动物组织进行直接PCR扩增。这样的PCR扩增方法工序复杂，不便捷，也会增加扩增成本。另外，现有的PCR扩增方法中取样过程中经常出现组织加量大小不一致的情况，从而导致取样差异，进而会造成扩增实验的失败。

技术实现思路

[0003]为此，本专利技术提供一种用于动物组织直接PCR扩增的方法，以解决现有PCR扩增方法存在工序复杂、不便捷、扩增成本高、取样存在差异等问题。
[0004]为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0005]根据本专利技术的第一方面，一种用于动物组织直接PCR扩增的方法，所述方法包括如下步骤：
[0006]先使用取样器本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于动物组织直接PCR扩增的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：先使用取样器取动物组织加入PCR管中，再在PCR管中加入酶预混液、上游引物和下游引物并充分混匀，然后将装有动物组织、酶预混液、上游引物和下游引物的PCR管放入PCR仪中进行扩增；所述取样器包括手柄和取样头，所述取样头可拆卸地安装在所述手柄上；所述酶预混液包括Tris
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HCl缓冲液、DNA聚合酶、dNTPs、镁离子、单价阳离子、PCR增效剂、裂解剂、纯化水。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述Tris
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HCl缓冲液的体积浓度为20mmol/L；所述Tris
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HCl缓冲液的pH值为8.3～9.2；所述DNA聚合酶为HotStart Taq酶和pfu酶中的一种或两种；所述DNA聚合酶的质量浓度为0.5％～4％。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述dNTPs是dATP、dCTP、dGTP、dTTP按1：1：1：1比例混合；所述dNTPs的体积浓度为200～350μmol/L；所述镁离子为氯化镁或硫酸镁的一种或两种；所述镁离子的体积浓度为1.5～4mmol/L。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述单价阳离子为氯化钾或硫酸铵中的一种或两种；所述单价阳离子的终体积浓度为10～50mmol/L；所述PCR增效剂为去...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩典霖，陈瑾，贺翠婷，杨亮，
申请(专利权)人：济凡生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：