金纳米棒检测探针、制备方法、检测方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种金纳米棒检测探针、制备方法、检测方法及其应用。所述检测探针包括金纳米棒以及连接在所述金纳米棒两端的与目标分子互补的核酸探针。本发明专利技术通过巯基核酸探针对金纳米棒两端选择性修饰，与目标检测物miRNA分子通过碱基互补配对特异性结合，使得金纳米棒进行线性组装，该组装体通过纳米孔时，引起高信噪比的易位信号，从而实现了氮化硅纳米孔传感器对miRNA小分子的高灵敏检测。本发明专利技术克服了生物小分子在氮化硅纳米孔检测中速度快，信号分辨率低的缺点，同时提高了固体纳米孔的分辨率和检测通量，扩展了氮化硅纳米孔在单分子检测领域的应用。

【技术实现步骤摘要】
金纳米棒检测探针、制备方法、检测方法及其应用
本专利技术属于氮化硅纳米孔传感器检测领域，特别涉及一种金纳米棒检测探针、制备方法、检测方法及其应用。
技术介绍
miRNA是一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，参与各种新陈代谢和信号传导途径，如生长发育、病毒防御、以及细胞增殖和凋亡等，并且与肿瘤的发生、发展、预测、诊断、治疗和术后有关，因此，miRNA作为癌症诊断、预测和治疗的潜在标记物，具有广阔的临床应用前景。miRNA在非小细胞肺癌中扮演着多重角色，包括在肺癌发生过程中发挥促癌基因或抑癌基因的作用，调控肺癌细胞的增殖和分化，参与肺癌的侵袭和转移，影响肺癌对放、化疗的敏感性等。因此miRNA表达谱的差异已成为肺癌早期诊断和临床诊疗重要的生物标志物。但由于miRNAs的核苷酸序列较短，在细胞内含量低，且同源性较高，使得miRNAs的高灵敏检测面临挑战。迄今为止，已报道有多种检测miRNAs的方法和技术，主要有NorthernBlotting，微阵列芯片法，核酸扩增，荧光等，但这些方法需要标记，扩增等技术，过程繁琐，容易引入误差，难以实现miRN本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种金纳米棒检测探针，其特征在于，所述检测探针包括金纳米棒以及连接在所述金纳米棒两端的与目标分子互补的核酸探针；所述金纳米棒为线性结构。/n

【技术特征摘要】
1.一种金纳米棒检测探针，其特征在于，所述检测探针包括金纳米棒以及连接在所述金纳米棒两端的与目标分子互补的核酸探针；所述金纳米棒为线性结构。


2.根据权利要求1所述的金纳米棒检测探针，其特征在于，所述检测探针通过以下方法制备：金纳米棒加入CTAB溶液，混合均匀，加入巯基修饰的核酸探针，震荡均匀，室温反应，离心；将离心所得的加入SDS溶液，震荡均匀，加入巯基修饰的核酸探针，震荡均匀，室温反应，加盐老化，离心得到检测探针。


3.一种如权利要求1所述的用于检测miRNA的组合探针，其特征在于，所述组合探针包括第一检测探针和第二检测探针；所述第一检测探针包括金纳米棒以及在金纳米棒两端修饰的用于捕获目标分子上游片段的第一核酸探针；所述第二检测探针包括金纳米棒以及在金纳米棒两端修饰的用于捕获目标分子下游片段的第二核酸探针；所述目标分子为miRNA。


4.根据权利要求3所述的用于检测miRNA的组合探针，其特征在于，所述第一核酸探针或第二核酸探针的捕获链的长度为8-14nt。


5.根据权利要求3所述的用于检测miRNA的组合探针，其特征在于，所述第一核酸探针如SEQIDNO.1所示；所述第二核酸探针如SEQIDNO.2所示。


6.根据权利要求3-5任一所述的组合探针在制备检测miRNA试剂盒中的用途。


7.一种如权利要求1所述的金纳米棒检测探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：...

【专利技术属性】
技术研发人员：翁丽星，武灵芝，严馨，曾祥杰，
申请(专利权)人：南京邮电大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32