【技术实现步骤摘要】
化学发光传感器及检测细菌或人类甲基转移酶中的应用
本专利技术属于生物分析
,涉及化学发光传感器及检测细菌或人类甲基转移酶中的应用。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。DNA甲基化是人类基因组中高度表征的表观遗传修饰。通过从S-腺苷甲硫氨酸转移甲基(SAM)到特定DNA序列中的腺嘌呤/胞嘧啶残基,DNA甲基转移酶建立和维持某些基因组甲基化模式。最近的研究表明,DNA甲基转移酶活性的改变会导致异常的DNA甲基化模式。据专利技术人了解,迄今为止,已发展出多种方法来检测DNA甲基转移酶的活性。传统方法主要是放射性标记法、免疫印迹法、高效液相色谱法(HPLC)和凝胶电泳。然而,他们涉及不安全的同位素标记、漫长的测定程序、昂贵的抗体和仪器,极大的限制了他们的实际应用。最近,一些新方法,包括比色法、荧光法和电化学法,用于定量检测DNA甲基转移酶,但是,经专利技术人研究发现,这些方法仍然不够 ...
【技术保护点】
1.一种化学发光传感器,其特征是,包括哑铃探针、S-腺苷甲硫氨酸、引物、DNA聚合酶、血红素、鲁米诺、H
【技术特征摘要】
1.一种化学发光传感器,其特征是,包括哑铃探针、S-腺苷甲硫氨酸、引物、DNA聚合酶、血红素、鲁米诺、H2O2;
所述哑铃探针为闭合大环状DNA,哑铃探针的结构是中间为茎、两端均为小环的哑铃状结构,茎结构为双链DNA,茎结构含有两个半甲基化的识别位点,小环结构富含C序列,当半甲基化的识别位点在DNA甲基转移酶和S-腺苷甲硫氨酸的作用下转化为全甲基化位点时,哑铃探针在引物和DNA聚合酶能够进行滚环DNA扩增,在小环结构富含C序列作用下滚环DNA扩增能够产生富含G序列的产物,富含G序列的产物能够折叠成G-四链体二级结构,G-四链体二级结构能够与血红素形成血红素-G-四链体DNA酶,血红素-G-四链体DNA酶能够催化H2O2介导鲁米诺氧化产生增强的化学发光信号。
2.如权利要求1所述的化学发光传感器,其特征是,包括BssHII核酸内切酶;
或,包括核酸外切酶I和核酸外切酶III。
3.如权利要求1所述的化学发光传感器,其特征是,半甲基化的识别位点为5'-GmCGCGC-3'。
4.如权利要求1所述的化学发光传感器,其特征是,哑铃探针由两个发夹探针的突出端互补杂交后,经过DNA连接酶连接形成。
5.一种权利要求1~4任一所述的化学发光传感器在检测细菌或人类甲基转移酶中的应用。
6.一种细菌或人类甲基转移酶的检测方法,其特征是...
【专利技术属性】
技术研发人员:张春阳,王子月,李鹏,
申请(专利权)人:山东师范大学,
类型:发明
国别省市:山东;37
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