一种HPLC法测定含羟苯甲酯类口服溶液降解产物的分析方法技术

本发明专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种HPLC法测定测定含羟苯甲酯类口服溶液降解产物的分析方法，选择十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以有机相与缓冲液混合溶剂作为流动相梯度洗脱。所述降解杂质为对羟基苯甲酸和对苯醌，采用该方法可以将含羟苯甲酯类口服溶液中羟苯甲酯及其降解产物进行快速分离,该检测方法专属性强、精密度高、准确性强、检测中溶剂不干扰测定，检测结果可靠准确，对于实现含羟苯甲酯类口服溶液的质量控制具有极其重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
一种HPLC法测定含羟苯甲酯类口服溶液降解产物的分析方法一、
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种HPLC法测定测定含羟苯甲酯类口服溶液降解产物的分析方法。二、
技术介绍
羟苯甲酯在化妆品、食品以及药物制剂中广泛用作抗菌防腐剂。它可单独使用，也可以和其他的抗菌防腐剂联合使用，在口服溶液中，羟苯甲酯是最常用的抗菌防腐剂。羟苯甲酯类在很宽的pH范围内均有效，而且，具有广谱抗菌性，羟苯酯类不致突变、不致畸变、不致癌，几乎无致敏作用。而且，不具有显著的光致敏作用和光毒性。目前羟苯甲酯防腐剂测定方法主要有高效液相色谱分析法，薄层色谱法，气相色谱法，毛细管电泳法，其中应用比较广泛的是高效液相色谱法。对羟基苯甲酸和对苯醌是羟苯甲酯的降解产物，其中对苯醌属于高毒类物质，接触后出现烧灼感、咳嗽、喘息、喉炎、气短、头痛、恶心和呕吐等症状，论文《苯醌细胞毒性及DNA损伤效应研究》表明苯醌类物质在体内可以通过与DNA共价键结合形成多种DNA加合物，诱导遗传突变的产生，目前未见有同时测定羟苯甲酯和羟苯甲酯降解产物的方法报道。因此，开发一种同时测定羟苯甲酯防腐剂含量和降解产物含量的方法，可以更好地监控防腐剂的变化情况，对于实现含羟苯甲酯类口服溶液的质量控制具有极其重要的意义。三、
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种HPLC法测定测定含羟苯甲酯类口服溶液降解产物的分析方法，即一种同时测定口服溶液制剂中羟苯甲酯及其降解产物对羟基苯甲酸和对苯醌的反高效液相色谱方法，该检测方法专属性强、精密度高、准确性强、检测中溶剂不干扰测定，检测结果可靠准确。为实现上述目的，本专利技术的技术方案为：HPLC法测定含羟苯甲酯类口服溶液中羟苯甲酯及其降解产物的方法，其特征在于，所述方法采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以有机相与缓冲液混合溶剂作为流动相梯度洗脱。所述降解杂质为对羟基苯甲酸，对苯醌，具体结构是如下式式Ⅰ、式Ⅱ所示：所述流动相A为磷酸盐离子对溶液，磷酸盐离子对溶液为磷酸二氢钾和庚烷磺酸钠混合水溶液，磷酸二氢钾浓度为3g/L-4g/L，优选3.4g/L，庚烷磺酸钠浓度为1.5g/L-2.5g/L，优选2.0g/L，磷酸或者氢氧化钠调节pH值为4.4-4.6，优选4.5g。所述流动相B为酸性乙腈溶液，所述酸性乙腈溶液为流动相A和乙腈等体积混合溶液。述梯度洗脱设置如下：作为一种优选，所述梯度洗脱设置如下：时间(min)流动相A(％)流动相B(％)05248305248352080452080505248605248所述检测条件：柱温35-45℃，优选40℃，流动相的流速为0.7-1.1ml/min，优选0.9ml/min，检测波长为210nm-230nm，优选220nm，样品溶液进样量30-70ul，优选50ul，注入高效液相色谱仪检测。本专利技术所述的分析方法，具体包括以下步骤：配置供试品溶液：取待测样品适量，用溶剂稀释配制成合适浓度，得供试品溶液配制对照品溶液：分别取对羟基苯甲酸、对苯醌和羟苯甲酯对照品，用溶剂溶解稀释成对照品溶液；分别取步骤1)所述供试品和步骤2)所述对照品溶液进样，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品溶液羟苯甲酯和降解产物的含量。所述对照品溶液浓度为2ug/ml步骤1)和步骤2)中的溶剂为0.77mg/ml的氯化钠水溶液。与现有技术相比，本专利技术的有有益效果在于：本专利技术提供了一种同时测定口服溶液制剂中羟苯甲酯及其降解产物对羟基苯甲酸和对苯醌的反高效液相色谱方法，该检测方法专属性强、精密度高、准确性强、检测中溶剂不干扰测定，检测结果可靠准确。四、附图说明图1为按照实施例1条件含羟苯甲酯口服溶液对照溶液品高效液相色谱图。图2为按照实施例1条件含羟苯甲酯口服溶液样品溶液高效液相色谱图。图3为按照实施例2条件含羟苯甲酯口服溶液样品溶液高效液相色谱图。图4为按照实施例3条件含羟苯甲酯口服溶液样品溶液高效液相色谱图。五、具体实施方式以下将参照附图，对本专利技术的优选实施例和其他条件进行详细描述。优选实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，所举实施例是为了更好地对本专利技术的内容进行说明，但并不是本专利技术的内容仅限于所举实施例，所以熟悉本领域的技术人员根据上述
技术实现思路
对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本专利技术的保护范围。实施例1仪器：戴安U3000高效液相色谱仪色谱柱：十八烷基鬼万件和硅胶为填充剂的色谱柱(250*4.6mm,3μm)或效能相当的色谱柱流动相A:3.4g/L磷酸二氢钾和2.0g/L庚烷磺酸钠在1L水中，用磷酸或者氢氧化钠调节pH值为4.50流动相B:乙腈-流动相A(50：50)流速：0.9mL/min检测器：UV检测波长：220nm进样体积：50μL柱温：40℃梯度洗脱见下表：时间(min)流动相A(％)流动相B(％)05248305248352080452080505248605248取含羟苯甲酯类口服溶液适量，用0.77mg/mL的氯化钠水溶液溶解并稀释成每1mL中含羟苯甲酯1.8mg，摇匀，作为供试品溶液，取对羟基苯甲酸对照品，对苯醌对照品，羟苯甲酯对照品适量，用0.77mg/mL的氯化钠水溶液溶解并稀释成每1mL中含对羟基苯甲酸0.018mg，对苯醌0.018mg和羟苯甲酯1.8mg，作为对照品溶液。取对照品溶液和供试品溶液，在上述色谱条件下进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图1和图2.实施例2仪器：戴安U3000高效液相色谱仪色谱柱：十八烷基鬼万件和硅胶为填充剂的色谱柱(250*4.6mm,3μm)或效能相当的色谱柱流动相A:3.4g/L磷酸二氢钾和2.0g/L庚烷磺酸钠在1L水中，用磷酸或者氢氧化钠调节pH值为4.50流动相B:乙腈-流动相A(50：50)流速：1.2mL/min检测器：UV检测波长：220nm进样体积：50μL柱温：40℃梯度洗脱见下表：时间(min)流动相A(％)流本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种HPLC法测定测定含羟苯甲酯类口服溶液降解产物的分析方法，其特征在于:/n所述方法采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱，进入检测器进行检测；所述降解杂质为对羟基苯甲酸和对苯醌，具体结构式分别如下式式Ⅰ、式Ⅱ所示：/n

【技术特征摘要】
1.一种HPLC法测定测定含羟苯甲酯类口服溶液降解产物的分析方法，其特征在于:
所述方法采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱，进入检测器进行检测；所述降解杂质为对羟基苯甲酸和对苯醌，具体结构式分别如下式式Ⅰ、式Ⅱ所示：



其中，所述流动相A为磷酸盐离子对溶液，所述流动相B为酸性乙腈溶液。


2.根据权利要求1所述的一种HPLC法测定测定含羟苯甲酯类口服溶液降解产物的分析方法，其特征在于，所述磷酸盐离子对溶液为3.4g/L磷酸二氢钾和2.0g/L庚烷磺酸钠在1L水中，用磷酸或者氢氧化钠调节pH值为4.40-4.60。


3.根据权利要求1所述的一种HPLC法测定测定含羟苯甲酯类口服溶液降解产物的分析方法，其特征在于，所述酸性乙腈溶液为所述流动相A和乙腈等体积混合溶液。


4.根据权利要求1所述的一种HPLC法测定测定含羟苯甲酯类口服溶液降解产物的分析方法，其特征在于，所述梯度洗脱设置如下：






所述流动相进行洗脱的流速为0.7-1.1ml/min。


5.根据权利要求1所述的一种HPLC...

【专利技术属性】
技术研发人员：倪晟，夏金强，李鑫，程芳生，张莉华，周亮，廖志雄，赵航，徐兵勇，陈鸿翔，姜维斌，屠芳芳，卜华荣，戴寿沣，汤丽玲，
申请(专利权)人：浙江和泽医药科技股份有限公司，杭州和泽坤元药业有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33