一种改造基因BBD29_11265产L-谷氨酸的重组菌株及其构建方法与应用技术

本发明专利技术提供一种对棒杆菌中BBD29_11265基因编码序列引入点突变或改进其表达的方法，所述方法可以使带有所述突变的菌株提高谷氨酸的发酵产量。所述点突变是使BBD29_11265基因序列第70位碱基由鸟嘌呤(G)突变为腺嘌呤(A)，使编码的相应氨基酸序列第24位丙氨酸被苏氨酸。

【技术实现步骤摘要】
一种改造基因BBD29_11265产L-谷氨酸的重组菌株及其构建方法与应用
本专利技术属于基因工程和微生物
，具体涉及一种产L-谷氨酸的重组菌株及其构建方法与应用。
技术介绍
L-谷氨酸是一种重要的氨基酸，被应用于食品、临床药物及其它方面。传统上，L-谷氨酸主要是通过发酵，用属于短杆菌属、棒状杆菌属或微菌属等菌属的生产L-谷氨酸的细菌或其突变体进行生产。L-谷氨酸是由微生物细胞内柠檬酸循环的中间产物α-酮戊二酸通过生物合成而来的。由α-酮戊二酸通过铵离子的同化作用来形成L-谷氨酸的生物合成途径有两条。其中一条途径是在有高浓度的铵离子存在的情况下，通过谷氨酸脱氢酶(glutamatedehydrogenase，GDH)的催化来合成L-谷氨酸。另一条途径(GS/GOGAT途径)是由谷氨酰胺合成酶及谷氨酰胺-酮戊二酸氨基转移酶来合成L-谷氨酸。谷氨酰胺合成酶(glutaminesynthetase，GS)催化L-谷氨酸和铵离子转化为谷氨酰胺的反应；谷氨酰胺-酮戊二酸氨基转移酶(glutamine-oxoglutarica本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生成L-谷氨酸的细菌，其特征在于，具有编码SEQ ID NO:3的氨基酸序列或其同源序列的多核苷酸的改善的表达；/n优选，所述改善的表达是编码SEQ ID NO:3的氨基酸序列或其同源序列的多核苷酸的表达增强，或者编码SEQ ID NO:3的氨基酸序列或其同源序列的多核苷酸具有点突变，或者编码SEQ ID NO:3的氨基酸序列或其同源序列的多核苷酸具有点突变且表达是增强的。/n

【技术特征摘要】
1.一种生成L-谷氨酸的细菌，其特征在于，具有编码SEQIDNO:3的氨基酸序列或其同源序列的多核苷酸的改善的表达；
优选，所述改善的表达是编码SEQIDNO:3的氨基酸序列或其同源序列的多核苷酸的表达增强，或者编码SEQIDNO:3的氨基酸序列或其同源序列的多核苷酸具有点突变，或者编码SEQIDNO:3的氨基酸序列或其同源序列的多核苷酸具有点突变且表达是增强的。


2.如权利要求1所述的细菌，其特征在于，编码SEQIDNO:3的氨基酸序列的多核苷酸的点突变，使得SEQIDNO:3的氨基酸序列的第24位丙氨酸被不同的氨基酸所取代；优选第24位丙氨酸被苏氨酸所取代。


3.如权利要求1-2任一项所述的细菌，其特征在于，编码SEQIDNO:3的氨基酸序列的多核苷酸包含SEQIDNO:1的核苷酸序列。


4.如权利要求1-3任一项所述的细菌，其特征在于，所述具有点突变的多核苷酸序列是由SEQIDNO:1所示多核苷酸序列第70位碱基发生突变而形成的；
优选，所述突变包括SEQIDNO:1所示多核苷酸序列第70位碱基由鸟嘌呤(G)突变为腺嘌呤(A)；
优选，所述具有点突变的多核苷酸序列包括SEQIDNO:2所示的多核苷酸序列。


5.如权利要求1-4任一项所述的细菌，其特征在于，所述细菌是棒杆菌属细菌，优选嗜乙酰棒杆菌(Corynebacteriumacetoacidophilum)、醋谷棒杆菌(Corynebacteriumacetoglutamicum)、美棒杆菌(Corynebacteriumcallunae)、谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutami...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏爱英，孟刚，赵春光，贾慧萍，苏厚波，杨立鹏，郭小炜，田斌，马风勇，周晓群，
申请(专利权)人：宁夏伊品生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：宁夏;64