【技术实现步骤摘要】
一种具备石墨烯亲和能力的希瓦氏菌及其构建方法与应用
本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种具备石墨烯亲和能力的希瓦氏菌及其构建方法与应用。
技术介绍
希瓦氏菌MR-1（以下简称希瓦氏菌）是一种模式金属还原菌，它能够在厌氧条件下，将数十种无机或有机物质作为希瓦氏菌的电子受体还原代谢。希瓦氏菌具备独特的锚定于外膜的Mtr电子传递通路，能够将细胞质内或细胞内膜产生的电子传递至细菌细胞外环境中的电子受体，是一种极具创新应用潜力的模式产电菌株。近30年来，希瓦氏菌的创新应用快速发展，大量研究将其应用于微生物燃料电池、微生物电解池、微生物电化学传感器等方面，成功实现生物质能电能转化、高附加值产物产出及作为传感器的应用等。目前研究中，希瓦氏菌作为电子供体与外界电子受体（如电极、杂合体系材料等）结合均在细胞层面，如何精确的将材料与希瓦氏菌电子传递胞外终端蛋白结合，更直接高效利用希瓦氏菌代谢出的电子，一直是迫待解决的问题。希瓦氏菌胞外蛋白MtrC位于希瓦氏菌电子传递终端，是一种与胞外物质直接接触的终端电子受体蛋白，在希瓦氏菌胞外...
【技术保护点】
1.一种具备石墨烯亲和能力的希瓦氏菌，其特征在于，以敲除
【技术特征摘要】
1.一种具备石墨烯亲和能力的希瓦氏菌，其特征在于，以敲除mtrC基因的希瓦氏菌MR-1为宿主，导入质粒DNA中含有石墨烯亲和肽结构域及表达MtrC蛋白的基因片段mtrC-EPLQLKM。
2.一种具备石墨烯亲和能力的希瓦氏菌的构建方法，其特征在于，包括步骤：
（1）将肽结构域EPLQLKM翻译成核苷酸序列，通过柔性多肽GSGGSG与希瓦氏菌MR-1的胞外蛋白mtrC基因的C端连接，在终止子之前添加柔性多肽GS，构建表达MtrC蛋白的基因片段mtrC-EPLQLKM；
（2）将步骤（1）中所述的基因片段mtrC-EPLQLKM的N端及C端添加酶切位点及保护碱基，通过PCR扩增得到mtrC-EPLQLKM产物；
（3）将步骤（2）中所述的mtrC-EPLQLKM产物与表达载体pBBR-ParcA双酶切连接，构建重组质粒pBBR-ParcA-mtrC-EPLQLKM；
（4）将步骤（3）构建的重组质粒pBBR-ParcA-mtrC-EPLQLKM转化至宿主大肠杆菌WM3064中，再结合转移至敲除mtrC基因的希瓦氏菌MR-1中，构建成重组希瓦氏菌，既具备石墨烯亲和能力的希瓦氏菌。
3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，步骤（1）中所述基因片段mtrC-EPLQLKM的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示...
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