PAD4抑制剂在制备放射治疗增敏药物方面的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种PAD4抑制剂在制备放射治疗增敏药物方面的应用，优选的，所述PAD4抑制剂为GSK484。通过本发明专利技术的实验结果证实，通过使用PAD4抑制剂——GSK484作用于鼻咽癌肿瘤细胞，它能够抑制mTOR信号通路，从而抑制肿瘤细胞增殖，PAD4通过调控p21的活性，从而影响mTOR信号通路，最终增加鼻咽癌肿瘤细胞的对放射的敏感性。

【技术实现步骤摘要】
PAD4抑制剂在制备放射治疗增敏药物方面的应用
本专利技术涉及制药
，尤其是PAD4抑制剂在制备放射治疗增敏药物方面的应用。
技术介绍
鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)是一种好发于东南亚地区及我国南方各省的常见恶性肿瘤。放射治疗是目前鼻咽癌的主要治疗方法，而鼻咽癌放疗后局部残余病灶复发及远处转移是制约其疗效和预后的瓶颈，而其中放射抗拒是导致鼻咽癌常规放疗后局部复发、远处转移的重要原因，解决放射抗拒的常用方法为采用放射增敏剂，以增强肿瘤组织对放射治疗的放射敏感性，因此,寻找一种高效、快速、准确的放射增敏剂对改善放射疗效具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术提供了一种PAD4抑制剂在制备放射治疗增敏药物方面的应用。为实现上述目的，本专利技术的技术方案为：PAD4抑制剂在制备放射治疗增敏药物方面的应用。进一步的，所述PAD4抑制剂为GSK484。进一步的，所述放射治疗为鼻咽癌放射治疗。本专利技术还提供了一种放射治疗增敏药物，由PAD4抑制剂和药学上可接受的盐/药学上可接受的载体组成。在肿瘤细胞中有两个主要的表观遗传学改变，一个是组蛋白修饰，另一个是DNA甲基化，而精氨酸脱亚氨酶4(peptideargininedeiminase4，PAD4)正是组蛋白修饰过程中一个关键的酶，它在许多的人类肿瘤中都出现过表达。经过实验研究表明：在放射抗拒的鼻咽癌组织和细胞中，PAD4的表达较放射敏感的鼻咽癌组织和细胞明显增高，而在鼻咽癌细胞中PAD4的表达水平能够明显影响p21的表达水平，已有研究证实，p21的活性与肿瘤细胞的放射敏感性有非常密切的联系。雷帕霉素机能靶蛋白(targetofrapamycin，TOR)是一个调控细胞周期、生长和增殖的丝氨酸/苏氨酸激酶，同时也是控制细胞自噬的关键蛋白。mTOR可通过控制蛋白生物合成和核糖体的生物发生来调节细胞的生长和增殖。目前有研究表明，通过抑制mTOR信号通路，能够增加肿瘤细胞的放射敏感性。通过本专利技术的实验结果证实，通过使用PAD4抑制剂——GSK484作用于鼻咽癌肿瘤细胞，它能够抑制mTOR信号通路，从而抑制肿瘤细胞增殖，PAD4通过调控p21的活性，p21作为细胞周期素依赖性激酶抑制因子，它通过作用于周期蛋白-周期蛋白依赖性激酶复合物及增殖细胞核抗原引起肿瘤细胞生长抑制，从而影响mTOR信号通路，最终抑制mTORC1调控的靶蛋白的磷酸化及其蛋白质的合成。在这个过程中，我们可以通过下调PAD4的表达来激活mTOR信号通路，从而抑制相关蛋白质的合成和促进鼻咽癌细胞凋亡，最终达到增加细胞放射敏感性的目的。对于其他的PAD4的抑制剂，按照同样的原理，也能最终增加鼻咽癌肿瘤细胞的对放射的敏感性。附图说明图1是放射敏感组织和放射抗拒组织的westernblot测定图。图2是放射敏感组织和放射抗拒组织的PAD4表达水平示意图。图3是鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE2R和鼻咽癌放射敏感细胞株CNE2在不同照射剂量下的细胞存活率示意图。图4是CNE2细胞和CNE2R细胞在0-8Gy照射后的集落形成示意图。图5是CNE2细胞和CNE2R细胞在0-8Gy照射后的细胞存活率示意图。图6a是CNE2R和CNE2在X线不同照射时间处理后的westernblot测定图；图6b是CNE2R和CNE2在X线不同照射强度处理后的westernblot测定图。图7a表示QPCR检测不同X射线照射下CNE2和CNE2R中PAD4mRNA表达变化示意图。图7b表示QPCR检测4Gy的X射线照射后不同时间CNE2和CNE2R中PAD4mRNA表达变化示意图。图8是QPCR检测过表达和敲低PAD4后CNE2和CNE2R的PAD4mRNA表达变化示意图。图9a为敲低CNE2R中PAD4后蛋白表达的westernblot检测图，图9b是过表达CNE2R中PAD4后蛋白表达的westernblot检测图，图9c是过表达CNE2中PAD4后蛋白表达的westernblot检测图。图10a是CNE2和CNE2-PAD4-OE(过表达CNE2)细胞0-8Gy照射后的细胞存活率示意图。图10b是CNE2R和CNE2R-PAD4-OE(过表达CNE2R)细胞0-8Gy照射后的细胞存活率示意图。图10c是CNE2R和CNE2R-PAD4-KD(敲低CNE2R)细胞0-8Gy照射后的细胞存活率示意图。图10d是CNE2R、CNE2R-PAD4-KD、CNE2R-PAD4-OE细胞在4GyX射线照射下的细胞存活率示意图。图11a是CNE2R和CNE2R-PAD4-KD的细胞凋亡示意图，图11b是CNE2和CNE2R-PAD4-OE的细胞凋亡示意图。图12a是CNE2和CNE2R-PAD4-OE的细胞周期示意图；图12b是CNE2R和CNE2R-PAD4-KD的细胞周期示意图。图13是4Gy放射线分别照射CNE2R、CNE2R-PAD4-KD、CNE2R-PAD4-OE细胞后的克隆细胞示意图。图14是裸鼠成瘤接受照射后第14天各组裸鼠肿瘤的示意图。图15是CNE2和CNE2R中PAD4的蛋白表达X线不同照射时间处理后的westernblot测定图。图16是CNE2和CNE2R中PAD4的蛋白表达在X线不同照射时间处理后的p21表达量示意图。图17是CNE2R、CNE2R-PAD4(-)和CNE2R-PAD4(+)细胞中PAD4和P21的WB测定图。图18是CNE2R、CNE2R-PAD4(-)和CNE2R-PAD4(+)细胞中5Gy的X线照射前后P21的westernblot测定图。图19是CNE2R、CNE2R-PAD4(-)和CNE2R-PAD4(+)细胞中5Gy的X线照射前后P21的蛋白表达示意图。图20是CNE2-CK组、CNE2-NC组、CNE2-PAD4组、CNE2-PAD4+P21组在5Gy的X线照射前后的细胞凋亡示意图。图21是CNE2-CK组、CNE2-NC组、CNE2-PAD4组、CNE2-PAD4+P21组在5Gy的X线照射前后的细胞凋亡率示意图(*p<0.05，**p<0.01)。图22是CNE2-CK组、CNE2-NC组、CNE2-PAD4组、CNE2-PAD4+P21组的细胞周期示意图。图23是CNE2-CK组、CNE2-NC组、CNE2-PAD4组、CNE2-PAD4+P21组的细胞周期数据结果分析图(*p<0.05，**p<0.01)。图24是CNE2和CNE2R中的mTOR、pS65-4EBP1、AKT及磷酸化表达，以及抗凋亡蛋白(Mcl-1、Bcl-2)，凋亡抑制基因Bcl-XL，p-stat3的westernblot测定图。图25是CNE-2R细胞中干扰和过表达PAD4后再PAD4、p21、p-AKT、AKT、p-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.PAD4抑制剂在制备放射治疗增敏药物方面的应用。/n

【技术特征摘要】
1.PAD4抑制剂在制备放射治疗增敏药物方面的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述PAD4抑制剂为GSK484。


3.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈昊，
申请(专利权)人：陈昊，
类型：发明
国别省市：广西;45