因子VII和抗-因子IX/X双特异性抗体的组合制造技术

本发明专利技术涉及包含转基因因子VII和针对因子IX和X的多特异性抗体的组合，其用于同时或分别施用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】因子VII和抗-因子IX/X双特异性抗体的组合本专利技术涉及药物组合物，其可用于治疗凝血障碍，例如A型血友病，特别是在产生因子VIII抑制性抗体的A型血友病的患者中。技术背景凝血涉及两个途径，一个是内在的，另一个是外在的，导致最终的共同途径。两种机制的组合确保形成固体且灵活的抗血压血凝块。通过凝血酶的作用，纤维蛋白原经过化学修饰，导致形成纤维蛋白。纤维蛋白对于形成凝块是必需的。内在途径包括存在于血流中的因子，并且凝血过程开始于血管本身内。外在途径涉及正常情况下不存在于血流中并且在血管损伤期间释放的组织因子。因子VII是一种糖蛋白，其参与外在凝血途径。为了启动凝血级联，必须将FVII活化为FVIIa。一旦被活化，则FVIIa与和两种磷脂相关的组织因子(TF)蛋白质复合，其在血管损伤期间释放。单独的FVIIa(不与组织因子复合)表现出低蛋白水解活性。然后，FVIIa-FT复合物在钙离子存在下将因子X转化为因子Xa。该复合物也对将因子FIX活化成FIXa起作用，由此催化内在途径。因子IXa和Xa依次活化活化的因子VII。因子IX和因子X参与内在凝血途径。活化的因子IX能够使因子X活化成因子Xa。与活化的因子FV和凝血酶原酶复合的因子Xa将凝血酶原转化为凝血酶。然后，凝血酶作用于纤维蛋白原，以将其转化为纤维蛋白，并且使FVIII和FV分别活化为FVIIIa和FVa。就其本身而言，凝血酶原在天然存在于血浆中的钙的存在下，能够将因子XIII活化为FXIIIa，其导致纤维蛋白凝块的固结作用。尽管如此，当凝血因子缺乏时，凝血级联被中断或缺乏，我们称之为凝血异常。活化的因子VII在引起出血的组织损伤后释放的组织因子的存在下局部起作用，即使在不存在因子VIII或IX的情况下。这就是为什么因子VII(优选以活化形式)用于治疗某些以出血形式出现的凝血障碍的原因。因此，因子VII用于治疗呈现因子VIII(A型血友病)或因子IX(B型血友病)缺乏的血友病的患者以及呈现其它凝血因子缺乏的患者，例如，FVII的遗传缺乏。在中风治疗中也推荐FVII。一些血友病患者产生抑制通常以浓缩形式施用的作为血友病治疗的因子VIII的抗体。这是目前血友病治疗最常见的并发症。靶向FIX或FIXa和FX或FXa的双特异性抗体例如艾美赛珠单抗(emicizumab)用于治疗具有抗-因子VIII抗体的A型血友病患者。这些抗体通过将这两个分子结合在一起来促进FIXa对FX的活化在功能上替代FVIII。这些抗体具有长效作用。已经测试了来自细胞培养物的重组FVIIa(例如BHK细胞中产生)与艾美赛珠单抗(例如ACE910或)的组合(R.HARTMANN等人，OR36|SynergisticEffectsofaProcoagulantBispecificAntibodyandFEIBAorFactorVIIAonThrombinGeneration(Haemophilia(2017),23(增刊2),11-27))。该组合仅显示对凝血障碍治疗的相加作用。因此，对于允许更好地管理A型血友病患者并且更特别是具有抗-因子VIII的患者的药物组合存在需求。专利技术概述本专利技术提出了将转基因因子VII与针对因子IX和X的多特异性抗体组合。根据本专利技术，通过转基因得到的因子VII和针对因子IX和因子X的抗体的本专利技术的组合在治疗凝血障碍中，并且特别是在治疗具有抗-FVIII抑制物的A型血友病的患者和FVII缺乏的患者中诱导协同作用。因此，本专利技术的一个方面是药物组合物，其包含：a.转基因因子VII，和b.多特异性抗体，优选针对因子IX和因子X的双特异性抗体，例如艾美赛珠单抗。优选的是，因子VII为活化的因子VII(FVIIa)的形式。在特别的实施方案中，因子IX为活化的因子IX(FIXa)的形式和/或因子X为活化的因子X(FXa)的形式。优选的是，所述转基因因子VII为来源于由非人-转基因哺乳动物、例如针对人因子VII的转基因的兔的乳腺上皮细胞产生的人因子VII。本专利技术还提供了组合产品，其包含：a.转基因因子VII，和b.针对因子IX和X的多特异性抗体，该组合产品用于预防或治疗凝血障碍，例如A型血友病，更特别的是具有因子VIII抑制物(FVIII)的A型血友病。优选的是，该组合产品为包含转基因因子VII和所述抗体的药物组合物的形式。可选择的是，转基因因子VII和抗体为分开的组合物形式，其适合于同时或分别(例如依次)施用于患者。此外，本专利技术的另一个目的涉及药盒，其包含：-包含转基因因子FVII的容器；和-包含针对因子IX和因子X的抗体的另一个容器。附图说明图1：在用TF/PL诱导后，组合对第1批次的A型血友病血浆的协同血栓形成作用的评价。(A)在PTE方面的协同血栓形成作用的评价，(B)在凝血酶生成峰方面的协同血栓形成作用的评价，(C)在速度方面的协同血栓形成作用的评价。图2：在用TF/PL诱导后，组合对第2批次的A型血友病血浆的协同血栓形成作用的评价。(A)在PTE方面的协同血栓形成作用的评价，(B)在凝血酶生成峰方面的协同血栓形成作用的评价，(C)在速度方面的协同血栓形成作用的评价。专利技术详述通用定义凝血现象由涉及凝血因子的酶促反应级联组成，其中凝血因子以酶原的形式存在，在某些辅因子存在下，它们通过蛋白水解裂解转化为其“活化”形式。以无活性前体形式存在的每种因子的活化形式由字母a表示。因此，FVIIa在体内是由多种蛋白酶(FIXa、FXa、FVIIa)将酶原裂解成两条通过二硫桥连接的链而产生。术语“治疗”通常表示疾病或障碍或至少是症状的改善、预防或逆转，例如减缓疾病的进程或稳定症状。还包括延迟疾病或障碍或至少是症状的发作。术语“预防”表示发生或获得特定疾病或障碍的风险下降。在本专利技术中，“患者”或“个体”是指任意哺乳动物，并且更特别是任何年龄的人，男性或女性，包括儿童。术语“药物组合物”是指允许活性成分具有生物活性并且不含对组合物所施用的个体具有毒性的任何其它组分的制剂。转基因因子VII术语“因子VII”或“FVII”包括包含野生型人因子VII的序列1-406的多肽(如美国专利4,784,950中所述)或来源于另外物种(例如牛、猪、犬、鼠)的FVII。还包括因子VII的天然等位基因变化形式，其可以以糖基化或其它翻译后修饰的任何形式或程度存在。因此，术语“因子VII”还包括FVII变体，其相对于野生型的活性具有相同或更好的生物活性，这些变体特别包括通过一个或多个氨基酸的插入、缺失或取代而不同于野生型FVII的多肽。除非另有指示，否则在本说明书中，术语“因子VII”是指未裂解的FVII(酶原)或活化的因子VII(FVIIa)。因此，FVIIa由通过单一二硫桥(Cys135-Cys262)连接在一起本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.药物组合物，其包含：/na.转基因因子VII，和/nb.针对因子IX和因子X的多特异性抗体。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180614 FR 18552391.药物组合物，其包含：
a.转基因因子VII，和
b.针对因子IX和因子X的多特异性抗体。


2.根据权利要求1的药物组合物，其中所述转基因因子VII为来源于转基因非人哺乳动物乳腺的上皮细胞产生的人因子VII。


3.根据权利要求2的药物组合物，其中所述转基因哺乳动物为兔。


4.根据权利要求1-3任一项的药物组合物，其中抗体为艾美赛珠单抗。


5.组合产品，其包含：
a.转基因因子VII，和
b.针对因子IX和因子X的多特异性抗体，
其用于预防或治疗患者的凝血障碍。


6.根据权利要求5的组合产品，其用于治疗A型血友病。


7.根据权利要求5或6之一的组合产品，其用于治疗具有因子VIII抑制物的...

【专利技术属性】
技术研发人员：JL·普兰迪尔，
申请(专利权)人：法国血液分割暨生化制品实验室，
类型：发明
国别省市：法国;FR