修饰的Fc片段在免疫疗法中的应用制造技术

本发明专利技术涉及抗体Fc片段在治疗自身免疫疾病和/或炎性疾病中的用途，所述Fc片段是分离的重组Fc片段，其对至少一种Fc受体(FcR)具有修饰的亲和力，特别是对FcRn具有增加的亲和力。力。力。

【技术实现步骤摘要】
修饰的Fc片段在免疫疗法中的应用
[0001]本申请为2016年7月6日提交的、专利技术名称为“修饰的Fc片段在免疫疗法中的应用”的PCT申请PCT/FR2016/051708的分案申请，所述PCT申请进入中国国家阶段的日期为2018年3月5日，申请号为201680051282.5。

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[0002]本专利技术涉及自身免疫性疾病和/或炎性疾病的免疫疗法。

技术介绍
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[0003]免疫疗法包括向患者施用外源性抗体，其目前广泛用于治疗各种病理，特别是用于自身免疫性疾病和炎性疾病的病理。
[0004]典型地提出了两种基于免疫球蛋白的疗法用于治疗这些疾病：i)基于静脉内免疫球蛋白(IVIg)的疗法，其包括向患者静脉内施用源自人血浆库的免疫球蛋白(最常见的是IgG)和ii)基于使用重组抗体(即通过基因工程获得的抗体)的疗法。后者使得炎性疾病和自身免疫性疾病患者的处理得到了真正的进步，这主要是因为它们提供了避免与使用来自血浆的免疫球蛋白相关的缺点的可能性，特别是供应短缺的风险以及传播可能存在于血浆中的病原体的风险。
[0005]免疫球蛋白中Fab片段的存在可能是负责被治疗患者中的显著不良反应。为了避免这些副作用，专利申请WO 2004/099374公开了分离的重组Fc片段用于治疗患者，特别是用于患有自身免疫性疾病的患者的用途。
[0006]然而仍然需要优化这些Fc片段，特别是为了增加它们的半衰期和/或治疗功效。

技术实现思路
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[0007]专利技术人现在提出使用与亲本Fc片段相比对至少一种Fc受体(FcR)具有修饰的亲和力的Fc片段。根据本专利技术，Fc片段是分离的，即它们不与Fab片段联合或不与任何其它蛋白质、多肽或肽缀合或融合。特别地，它们不是完整的免疫球蛋白。
[0008]本专利技术涉及用于治疗自身免疫性和/或炎性疾病的包含抗体Fc片段的组合物，所述Fc片段是与亲本Fc片段相比对Fc
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γ受体III(FcγRIII)具有改善的亲和力的分离的Fc片段。
[0009]在优选的方面，它们是
[0010]‑
与野生型IgG1的亲本Fc片段相比，具有突变315D/330V/361D/378V/434Y的组合的Fc片段，优选其中Fc片段由序列SEQ ID NO:11组成
[0011]‑
与野生型IgG1的亲本Fc片段相比，具有突变T260A和315D/330V/361D/378V/434Y的组合的Fc片段，优选其中Fc片段由序列SEQ ID NO:12组成
[0012]‑
与野生型IgG1的亲本Fc片段相比，具有突变E258I和315D/330V/361D/378V/434Y的组合的Fc片段，优选其中Fc片段由序列SEQ ID NO:13组成
[0013]‑
与野生型IgG1的亲本Fc片段相比，具有突变K290Y和315D/330V/361D/378V/434Y
的组合的Fc片段，优选其中Fc片段由序列SEQ ID NO:14组成
[0014]‑
与野生型IgG1的亲本Fc片段相比，具有突变E294A和315D/330V/361D/378V/434Y的组合的Fc片段，优选其中Fc片段由序列SEQ ID NO:15组成
[0015]‑
与野生型IgG1的亲本Fc片段相比，具有突变Y296W和315D/330V/361D/378V/434Y的组合的Fc片段，优选其中Fc片段由序列SEQ ID NO:16组成
[0016]‑
与野生型IgG1的亲本Fc片段相比，具有突变K334N/P352S/A378V/V397M组合的Fc片段，优选其中Fc片段由序列SEQ ID NO:19组成
[0017]‑
与野生型IgG1的亲本Fc片段相比，具有突变G316D/K326E/A378V的组合的Fc片段，优选其中Fc片段由序列SEQ ID NO:20组成
[0018]‑
与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变A378V/P396L/N421T的组合的Fc片段，优选其中Fc片段由序列SEQ ID NO:21组成
[0019]‑
与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变T260A的Fc片段，优选其中Fc片段由序列SEQ ID NO:17组成
[0020]‑
与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变K290Y的Fc片段，优选其中Fc片段由序列SEQ ID NO:18组成。
[0021]本专利技术还更一般地提供包含抗体Fc片段的组合物，其用于治疗自身免疫性和/或炎性疾病，所述Fc片段是与亲本Fc片段相比对至少一种Fc受体(FcR)具有修饰的亲和力的分离的Fc片段。
[0022]在一个具体的实施方案中，组合物包含具有一个或多个氨基酸的至少一个突变和/或在其糖基化位点(Asn 297)上具有N
‑
聚糖的抗体Fc片段，所述Fc片段的N
‑
聚糖具有低于65％的岩藻糖基化程度。
[0023]附图简要说明：
[0024]图1示出了天然人IgG1关于216位至447位(根据EU索引)与人IgG2(SEQ ID NO:7)，人IgG3(SEQ ID NO:8)和人IgG4(SEQ ID NO:9)的相应序列的序列比对。IgG1序列是指G1m1，17同种异型(SEQ ID NO:6)和G1m3同种异型(SEQ ID NO:10)。IgG1的“CH2
‑
CH3下部铰链”结构域从226位开始(参见箭头)。CH2结构域以灰色突出显示，并且CH3结构域以斜体显示。
[0025]图2示出了IgG1Fc(A)和scFc(B)的示意图。CH2以灰色表示，CH3以白色表示。二硫桥由细的灰色虚线表示。在scFc中，两个CH2
‑
CH3多肽通过粗虚线表示的肽接头连接。
[0026]图3示出了能够存在于本专利技术的Fc片段上的聚糖结构的G0，G0F，G1和G1F形式。
[0027]图4是呈现在加入不同量的多价免疫球蛋白(IVIg)或重组Fc片段(未突变或突变(含有突变315D/330V/361D/378V/434Y的Fc片段))之后观察到的，在单克隆抗恒河猴D(RhD)抗体存在下，恒河猴D+红血细胞的效应细胞介导的裂解百分比。
[0028]图5是呈现在加入不同量的多价免疫球蛋白(IVIg)或重组Fc片段(未突变或突变(含有根据表1的突变的Fc片段))之后观察到的，在单克隆抗恒河猴D(RhD)抗体存在下，恒河猴D+红血细胞的效应细胞介导的裂解百分比。“rFc WT”表示野生型重组Fc片段。阳性对照表示为：IVIG(即，从人血浆提取的血浆抗体的混合物——IVIG是特发性血小板减少性紫癜(ITP)的参考治疗)；和对应于赫赛汀Fc片段(在哺乳动物中转基因产生的抗体，然后进行木瓜蛋白酶消化以产生Fc片段)的“IgG Mabs starting”。
[0029]图本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种包含抗体Fc片段的组合物，用于治疗自身免疫和/或炎性疾病，所述Fc片段是与亲本Fc片段相比对FcγRIII受体具有改善的亲和力的分离的Fc片段。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述Fc片段与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变315D/330V/361D/378V/434Y的组合，优选其中所述Fc片段由序列SEQ ID NO:11组成。3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述Fc片段与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变T260A和315D/330V/361D/378V/434Y的组合，优选其中所述Fc片段由序列SEQ ID NO:12组成。4.根据权利要求1所述的组合物，其中所述Fc片段与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变E258I和315D/330V/361D/378V/434Y的组合，优选其中所述Fc片段由序列SEQ ID NO:13组成。5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述Fc片段与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变K290Y和315D/330V/361D/378V/434Y的组合，优选其中所述Fc片段由序列SEQ ID NO:14组成。6.根据权利要求1所述的组合物，其中所述Fc片段与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变E294A和315D/330V/361D/378V/434Y的组合，优选其中所述Fc片段由序列SEQ ID NO:15组成。7.根据权利要求1所述的组合物，其中所述Fc片段与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变Y296W和315D/330V/361D/378V/434Y的组合，优选其中所述Fc片段由序列SEQ ID NO:16组成。8.根据权利要求1所述的组合物，其中所述Fc片段与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变K334N/P352S/A378V/V397M的组合，优选其中所述Fc片段由序列SEQ ID NO:19组成。9.根据权利要求1所述的组合物，其中所述Fc片段与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变G316D/K326E/A378V的组合，优选其中所述Fc片段由序列SEQ ID NO:20组成。10.根据权利要求1所述的组合物，其中所述Fc片段与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变A378V/P396L/N421T的组合，优选其中所述Fc片段由序列SEQ ID NO:21组成。11.根据权利要求1所述的组合物，其中所述Fc片段与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变T260A，优选其中所述Fc片段由序列SEQ ID NO:17组成。12.根据权利要求1所述的组合物，其中所述Fc片段与野生型IgG1的亲本Fc片段相比具有突变K290Y，优选其中所述Fc片段由序列SEQ ID NO:18组成。13.一种包含抗体Fc片段的组合物，用于治疗自身免疫和/或炎性疾病的用途，所述Fc片段是与亲本Fc片段相比对至少一种Fc受体(FcR)具有修饰亲和力的分离的Fc片段。14.用于根据权利要求13所述的用途的包含Fc片段的组合物，其中所述Fc受体选自FcRn、Fcγ受体和补体C1q。15.用于根据权利要求1、13或14所述的用途的包含Fc片段的组合物，其中所述Fc片段具有一个或多个氨基酸的突变。16.用于根据权利要求15所述的用途的包含Fc片段的组合物，其中所述突变是一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入。17.用于根据权利要求1或13至15中任一项所述的用途的包含Fc片段的组合物，其中所
述Fc片段是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4免疫球蛋白的Fc片段，其与亲本Fc片段相比具有一个或多个氨基酸的至少一个突变。18.用于根据权利要求1至17中任一项所述的用途的包含Fc片段的组合物，其中所述Fc片段是重组获得的。19.用于根据权利要求15至18中任一项所述的用途的包含Fc片段的组合物，其中所述突变参与与所述亲本Fc片段相比增加半衰期。20.用于根据权利要求15至19中任一项所述的用途的包含Fc片段的组合物，其中所述突变选自氨基酸226、227、228、230、231、233、234、239、241、243、246、250、252、256、259、264、265、267、269、270、276、284、285、288、289、290、291、292、293、294、297、298、299、301、302、303、305、307、308、309、311、315、317、320、322、325、327、330、332、334、335、338、340、342、343、345、347、350、352、354、355、356、359、360、361、362、369、370、371、375、378、380、382、383、384、385、386、387、389、390、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、403、404、408、411、412、414、415、416、418、419、420、421、422、424、426、428、433、434、438、439、440、443、444、445、4...

【专利技术属性】
技术研发人员：P，
申请(专利权)人：法国血液分割暨生化制品实验室，
类型：发明
国别省市：