抗B7H3嵌合抗原受体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了抗B7H3嵌合抗原受体及其应用，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、铰链区、跨膜结构域和信号传导结构域；所述抗原结合结构域为抗人B7H3抗体。本发明专利技术的抗B7H3嵌合抗原受体对B7H3阳性肿瘤细胞具有特异性靶向作用，表达抗B7H3嵌合抗原受体的T细胞体内外杀伤作用显著，能够有效清除B7H3阳性肿瘤细胞，在肿瘤治疗领域具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
抗B7H3嵌合抗原受体及其应用
本专利技术属于生物医药
，涉及抗B7H3嵌合抗原受体及其应用。
技术介绍
B7H3是I型跨膜蛋白，属于B7免疫共刺激和共抑制家族，具有免疫抑制功能，可以减少T细胞释放的I型干扰素(IFN)、降低NK细胞的细胞毒性。B7H3蛋白在正常组织(例如前列腺、乳腺、胎盘、肝脏、结肠和淋巴器官)中表达有限，但是在大部分恶性肿瘤中异常高表达。在非小细胞肺癌细胞株和肿瘤组织中可以检测到B7H3的表达。在表达B7H3的肿瘤组织中，浸润性淋巴样细胞的数目显著降低，与淋巴结转移呈正相关(SunY,WangY,ZhaoJ,etal.B7-H3andB7-H4expressioninnon-small-celllungcancer[J].LungCancer,2006,53(2):143-151.；赵文建，陈春燕，眭文妍等.B7-H3及其与肿瘤关系的研究进展[J].医学综述,2009,15(22):3430-3433.)。B7H3在肿瘤细胞中的高表达通常与肿瘤浸润淋巴细胞减少、癌症进展加快以及恶性肿瘤(神经系统肿瘤、黑色素瘤、肺癌、头颈癌、结肠直肠癌、胰腺癌、前列腺癌、卵巢癌、肺癌和透明细胞肾癌)的临床结果密切相关。由于其在多种肿瘤中广泛表达，B7H3已成为癌症免疫疗法的潜在靶标。但目前鲜有靶向B7H3的免疫疗法报道。
技术实现思路
针对现有技术的不足和实际需求，本专利技术提供了抗B7H3嵌合抗原受体及其应用，所述抗B7H3嵌合抗原受体采用对人B7H3具有结合能力的抗B7H3抗体为抗原结合结构域，不仅可以结合游离的B7H3蛋白，还可以结合细胞表面的B7H3蛋白，在肿瘤治疗领域具有重要应用前景。为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：第一方面，本专利技术提供了抗B7H3嵌合抗原受体，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、铰链区、跨膜结构域和信号传导结构域；所述抗原结合结构域为抗B7H3抗体。本专利技术中，采用对B7H3具有结合能力的抗B7H3抗体作为嵌合抗原受体的抗原结合结构域，使得嵌合抗原受体可以特异性结合B7H3阳性肿瘤细胞，实现对B7H3阳性肿瘤的特异性靶向作用。优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示的氨基酸序列，SEQIDNO:1和SEQIDNO:2通过连接肽连接形成抗B7H3抗体H26B6；SEQIDNO:1：EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCSASSSVSYMQWYQQKPGLAPRLLIYDTSKLTSGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQWSSNPLTFGGGTKVEIKRTV；SEQIDNO:2：EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEYTMHWVRQAPGQGLEWIGGINPNTGGTTYNQKFNGRVTMTRDTSISTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRPYRDDGGFHWYFDVWGQGTLVTVSS。优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:3和SEQIDNO:4所示的氨基酸序列，SEQIDNO:3和SEQIDNO:4通过连接肽连接形成抗B7H3抗体H2B8；SEQIDNO:3：DIQLTQSPSFLSASVGDRVTINCRASKTISNYLAWYQQKPGKAPKLLIYSGSTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHHEYPLTFGGGTKVEIKRTV；SEQIDNO:4：QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTFTDGAMHWVRQAPGQGLEWIGIINTNSGNTNYNQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSEDTAVYYCARGVFYYGYGAWFAYWGQGTLVTVSS。优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:5和SEQIDNO:6所示的氨基酸序列，SEQIDNO:5和SEQIDNO:6通过连接肽连接形成抗B7H3抗体26B6；SEQIDNO:5：QIVLTQSPAVMSTSPGEKVTMTCSASSSVSYMQWYQQKSGTSPKRWIYDTSKLTSGVPARFSGSGSGTSYSLTISSMEAEDAATYYCQQWSSNPLTFGAGTKLELK；SEQIDNO:6：EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKTSGYAFTEYTMHWVKQSQGKSLEWIGGINPNTGGTTYNQKFNGKATLTVDRSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCTRPYRDDGGFHWYFDVWGAGTAVTVSS。优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:7和SEQIDNO:8所示的氨基酸序列，SEQIDNO:7和SEQIDNO:8通过连接肽连接形成抗B7H3抗体2B8；SEQIDNO:7：DVQITQSPSYLTASPGETIIINCRASKTISNYLAWYQEKPGKTNKLLIYSGSTLQSGIPSRFSGSGSDTDFTLTISSLEPEDFAMYYCQQHHEYPLTFGAGTKLELK；SEQIDNO:8：QVQLQQSGPELVRPGVSVKISCKVSGYTFTDGAMHWVKRSHAKSLEWIGIINTNSGNTNYNQKFQGKATMTVDKSSSTAYMELARLTSEDSAIYYCARGVFYYGYGAWFAYWGQGTLVTVSA。优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:9和SEQIDNO:10所示的氨基酸序列，SEQIDNO:9和SEQIDNO:10通过连接肽连接形成抗B7H3抗体23H1；SEQIDNO:9：DIVMTQSPSSLTVTAGENVTMSCKSSQTLLNNGNQKNFLTWYQQKPGQPPKLLIYLASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYTYPLTFGAGTKLELK；SEQIDNO:10：EVKLVESGGGLVQPGGSLRLSCATSGFTFTDYYMSWVRQPPGKALEWLGFIRNKVNDYTTEYSVSVKGRFTISRDNSQTILYLQMNTLRAEDSATYYCARDSPYRPFAYWGQGTLVTVSA。优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:11和SEQIDNO:12所示的氨基酸序列，SEQIDNO:11和SEQIDNO:12通过连接肽连接形成抗B7H3抗体6F7；SEQIDNO:11：DIQMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQNNYLTWYQQKPGQPPKLLIYLASTRDSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYTYPLTFGAGTKLELK；SEQIDNO:12：EVKLVESGGGLVQPGGSLRLSCATSG本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.抗B7H3嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、铰链区、跨膜结构域和信号传导结构域；/n所述抗原结合结构域为抗B7H3抗体。/n

【技术特征摘要】
1.抗B7H3嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、铰链区、跨膜结构域和信号传导结构域；
所述抗原结合结构域为抗B7H3抗体。


2.根据权利要求1所述的抗B7H3嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:3和SEQIDNO:4所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:5和SEQIDNO:6所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:7和SEQIDNO:8所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:9和SEQIDNO:10所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:11和SEQIDNO:12所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:13和SEQIDNO:14所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗原结合结构域包括SEQIDNO:15和SEQIDNO:16所示的氨基酸序列。


3.根据权利要求1或2所述的抗B7H3嵌合抗原受体，其特征在于，所述铰链区包括CD8α铰链区；
优选地，所述跨膜结构域包括CD8α跨膜区和/或CD28跨膜区；
优选地，所述信号传导结构域包括CD3ζ；
优选地，所述信号传导结构域还包括4-1BB、CD28胞内区、DAP10或OX40中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述抗B7H3嵌合抗原受体还包括信号肽；
优选地，所述信号肽包括IgGκ轻链信号肽、CD8α信号肽、GM-CSF信号肽、HSA信号肽、IgG重链信号肽、IgG轻链信号肽、CD33信号肽、IL-2信号肽或胰岛素信号肽中的任意一种。


4.根据权利要求1-3任一项所述的抗B7H3嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括信号肽、抗B7H3抗体、CD8α铰链区、CD8α跨膜区、4-1BB和CD3ζ；
优选地，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括SEQIDNO:17所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括SEQIDNO:18所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括SEQIDNO:19所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括SEQIDNO:20所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括SEQIDNO:21所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括SEQIDNO:22所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括SEQIDNO:23所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括SEQIDNO:24所示的氨基酸序列；
优选地，所述抗B7H3嵌合抗原受体包括SEQIDNO:2...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗敏，李光超，周兆，王学俊，
申请(专利权)人：广州百暨基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44