重组人乳头瘤病毒疫苗组合物及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种重组人乳头瘤病毒疫苗组合物及其用途。本发明专利技术提供的新型疫苗组合物，相较其他抗原及佐剂的组合，具有更有益的免疫效果。免疫效果。

【技术实现步骤摘要】
重组人乳头瘤病毒疫苗组合物及其用途


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体而言，本专利技术涉及一种重组人乳头瘤病毒疫苗组合物和用途。

技术介绍

[0002]乳头瘤病毒（Papillomavirus，PV）是一种能感染脊椎动物的病原体，目前发现已有300多种。可以感染人类的有200多种，称为人乳头状瘤病毒（Human Papillomavirus，HPV），其中有40多种可以导致人类疾病。HPV的衣壳是由主要衣壳蛋白L1和次要衣壳蛋白L2组成。HPV主要感染皮肤和粘膜组织，在大多数情况下HPV感染无明显临床症状。但某些HPV持续性感染可引发皮肤粘膜上皮增生，甚至癌变。临床上则表现为不同类型的上皮疣，宫颈癌、肛门癌和阴道癌等恶性肿瘤。根据与癌症发生的关系，这40多种HPV可以分为高危型和低危型，其中HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58及59为高危型，其他的为低危型，其中HPV 6和HPV 11感染引起生殖器疣与复发性呼吸道乳头瘤病的比率超过90%。
[0003]世界范围内，宫颈癌在女性高发恶性肿瘤中排名第三，而在15-44岁女性排名第二，据估计2018年全球约有56.9万女性新发宫颈癌，年龄调整发病率为13.1/10万，31.1万女性死于宫颈癌。国际癌症研究机构评估报告显示宫颈癌在中国年龄调整发病率为10.7/10万。据估计2018年中国宫颈癌新发约10.6万例，占全球18.7%，死亡约4.8万例，占全球15.3%。宫颈癌是中国女性第六大常见癌症，而在15～44岁女性中跃居为第三常见癌症，仅次于乳腺癌和甲状腺癌，中国宫颈癌防控形势仍然严峻和面临巨大挑战，宫颈癌患者的疾病经济负担十分严重，尤其是在农村地区。现已知几乎所有的宫颈癌和HPV感染相关，其中70%宫颈癌和HPV 16、18感染相关，20%左右宫颈癌与HPV 31、33、45、52及58感染相关。
[0004]接种预防性HPV疫苗是预防宫颈癌有效可行的预防手段，是宫颈癌的一级预防措施；宫颈癌的二级预防的主要措施包括对所有适龄妇女定期开展宫颈癌的筛查，对确定为宫颈癌前病变患者及早进行治疗；宫颈癌三级预防的主要措施是根据临床分期开展适宜的手术、放疗、化疗和姑息疗法。目前，全球已上市了3种预防性HPV疫苗，分别为葛兰素史克 2价HPV疫苗Cervarix、默沙东4价HPV疫苗Gardasil和9价HPV疫苗Gardasil 9。这三个已上市疫苗都是基于HPV 主要衣壳蛋白L1形成的病毒样颗粒（Virus-like particle，VLP）为抗原的疫苗，通过基因重组表达的L1蛋白可在一定条件下形成类似病毒的 VLP。Cervarix的佐剂为氢氧化铝佐剂加MPL，Gardasil和Gardasil 9的佐剂为磷酸铝佐剂。
[0005]多项严格随机临床研究证明了在9-14岁女性中接种2剂HPV疫苗免疫原性非劣于接种3剂HPV疫苗，2017年WHO立场文件中推荐在9-14岁人群中使用2剂免疫程序（0、6月），这对于在成人女性中减少免疫剂次（2剂）提供很好的借鉴和指导意义。此外，接种1剂Cervarix后产生的抗体滴度7年后仍然可达到自然感染水平的9倍以上，同样在一项印度的临床研究中观察到870名接种1剂Gardasil的10-18岁人群中平均随访4.7年未发生HPV16和18型持续性感染。尽管这两项研究都是非严格随机和评估单剂HPV疫苗的保护效力为主要目标的临床研究，这些研究结果为单剂HPV疫苗提供了概念的基础和未来实现的可能性。目
前WHO呼吁全球消灭宫颈癌，业界认为实现这个目标，需要高效、便利的9价HPV疫苗。目前已上市的三种HPV疫苗，只有Cervarix使用了复合佐剂（氢氧化铝和MPL），表现出较高的免疫原性，但这款疫苗是2价HPV疫苗。而目前在市场上的9价HPV疫苗在不同年龄阶段的接种程序均为3剂免疫（0、2、6月），因此开发一款使用简化免疫程序（1针或2针）的新型9价HPV疫苗，有助于实现全球消灭宫颈癌，同时将大大缓解因产能不足和接种完成率低而带来的压力，从而尽快减少全球尤其是发展中国家的宫颈癌的发病率和死亡率，从而助力全球消除宫颈癌的计划，也可产生良好的经济效益与社会效益。
[0006]有研究认为Cervarix相较于Gardasil能产出更高抗体滴度可能是由于Cervarix双佐剂中的TLR4激动剂MPL增强了免疫激活的结果，这也可能是Cervarix能够长期地维持在较高的抗体水平重要原因。因此，选择合适的复合佐剂来开发上述简化免疫程序的新型九价HPV疫苗至关重要。葛兰素史克的Cervarix的双佐剂包含MPL和氢氧化铝佐剂，但目前MPL为经化学处理“减毒”的沙门菌脂多糖，工艺复杂且成本高昂，产能容易受MPL的来源限制。另外，该产品在国内规模化生产条件不成熟，无法满足后续临床使用需求。我们选择铝佐剂联合CpG ODN的复合佐剂系统，首先是因为CpG ODN可通过化学合成大规模生产，易于质控；其次CpG ODN是Toll样受体9（toll-like receptor 9，TLR9）的激动剂，可以刺激表达TLR9的细胞并激活下游天然免疫反应通路，一方面诱导I型干扰素和炎症因子表达，另一方面使浆细胞样树突状细胞成熟，从而增强体液免疫和细胞免疫反应。铝佐剂是迄今为止使用最为广泛的人用疫苗佐剂，与其他佐剂组成的联合佐剂也有着广泛的应用。CpG ODN类佐剂是除铝佐剂外最新被批准在上市疫苗中使用的新型佐剂（Dynavax 的乙肝疫苗产品）。另外许多在开发中的疫苗，也在临床试验中均使用了铝佐剂和CpG ODN的复合佐剂如乙肝和疟疾预防性疫苗。我们希望通过加入CpG ODN佐剂使新型九价HPV疫苗比传统单独铝佐剂疫苗有更好的免疫原性和免疫持久性，从而提高免疫预防效果，比如可以减少免疫次数、缩短免疫间隔、减少抗原免疫剂量。
[0007]尽管世界现有技术中已经开发了一些HPV预防性疫苗，然而还存在因免疫针次较多而造成的接种完成率低等问题。因此，本领域还有必要开发改进的HPV疫苗产品。且从策略上来说，总是需要具有改进的免疫原性的新组合物疫苗，例如从佐剂或制剂组合方面进行尝试和改进以提高免疫应答、减少免疫次数、缩短免疫间隔、减少抗原免疫剂量。

技术实现思路

[0008]本专利技术的一方面在于提供一种重组人乳头瘤病毒疫苗，该疫苗中包含针对人乳头瘤病毒（HPV）的抗原。更具体地，上述抗原可为HPV各型L1 VLP蛋白（HPV 16L1、18L1、6L1、11L1、31L1、33L1、45L1、52L1、58L1）。
[0009]本专利技术所述之HPV为双链DNA病毒，其基因组含有大约8000个碱基对，按照其相对的表达时间可以分为早期区（Early Region，编码早期基因E1、E2、E4、E5、E6和E7），晚期区（Late Region，编码晚期基因L1和L2）以及上游调控区（Upstream Regulatory Region， URR，不编码蛋白，调控基因的转录），HPV的衣壳是由主要衣壳蛋白L1和次要衣壳蛋白L2组本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组人乳头瘤病毒(HPV)疫苗制剂组合物，其特征在于，所述重组人乳头瘤病毒疫苗制剂组合物包含至少如下九个HPV型别的主要衣壳蛋白L1组装成的VLP：HPV 16L1、18L1、6L1、11L1、31L1、33L1、45L1、52L1、58L1，和药学上可接受的复合佐剂载体。2.如权利要求1所述的疫苗制剂组合物，其特征在于，所述药学上可接受的复合佐剂载体为铝佐剂加CpG类佐剂的复合佐剂。3.如权利要求1或2所述的疫苗制剂组合物，其特征在于，所述每个HPV型别的L1组装成的VLP的含量在2-60μg之间。4.如权利要求3所述的疫苗制剂组合物，其特征在于，HPV 16L1、18L1、6L1、11L1、31L1、33L1、45L1、52L1、58L1组装成的VLP的含量分别在6-60μg、4-40μg、3-30μg、4-40μg、2-20μg、2-20μg、2-20μg、2-20μg、2-20μg之间。5.如权利要求2所述的疫苗制剂组合物，其中所述铝佐剂选自氢氧化铝和磷酸铝类铝佐剂。6.如权利要求5所述的疫苗制剂组合物，其特征在于，所述铝佐剂为磷酸铝类铝佐剂。7.如权利要求5所述的疫苗制剂组合物，其中所述磷酸铝类铝佐剂具有在5-9.5之间的PI值。8.如权利要求2所述的疫苗制剂组合物，其特征在于，所述铝佐剂的含量约在225-1000μg之间。9.如权利要求8所述的疫苗制剂组合物，其特征在于，所述铝佐剂的含量约为500μg。10.如权利要求2所述的疫苗制剂组合物，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：周晨亮，李军瑞，宋玉娇，魏健，刘革，史力，莫呈钧，张智，
申请(专利权)人：怡道生物科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：