一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK及其编码基因与应用制造技术

本申请公开了一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK及其编码基因与应用。本申请首先从亚洲小车蝗中克隆亚洲小车蝗胞外蛋白酶基因ERK，并对亚洲小车蝗胞外蛋白酶基因ERK设计引物，合成用于干扰亚洲小车蝗胞外蛋白酶基因ERK的dsRNA，且运用注射法将dsRNA导入亚洲小车蝗对亚洲小车蝗胞外蛋白酶基因ERK进行RNAi。结果表明：dsRNA注射亚洲小车蝗后，存活率、生长速率、体重及总体表现力均显著降低，说明亚洲小车蝗胞外蛋白酶基因ERK在昆虫生长发育过程中起着重要作用。本申请为害虫的分子调控提供新的方法，也为深入理解昆虫生长发育机制、创制新的生物农药制剂提供理论基础。

【技术实现步骤摘要】
一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK及其编码基因与应用
本申请涉及生物技术
，特别涉及一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK及其编码基因与应用。
技术介绍
近年来，草原害虫在草原上的危害程度呈明显的上升趋势，危及草场面积逐年上升，严重威胁农牧业生产，同时也为沙尘暴的发生埋下隐患。传统的虫害防治多以应急防控和化学防治为主，且防治手段过分依赖化学农药，这不仅危害环境，且农药残留等问题也是人民日益关注的重点话题，这都表现了现阶段农作物虫害防治存在相对滞后的弊端。因此虫害的防治是一个漫长的过程，需要在不断的探索、改进和总结中进行，引进新的虫害防治技术并不代表完全抛弃传统防治方式，只有做到新技术与传统防治方式相结合，才能在虫害防治上取得新的突破。
技术实现思路
本申请的目的在于提供一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK及其编码基因与应用，用以解决通过化学农药防治虫害带来的危害环境的问题。第一方面，根据本申请的实施例，提供了一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK，包括：氨基酸序列是SEQIDNo.2所示的蛋白质，或者，在SEQIDNo.2所示的蛋白质的N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质。第二方面，根据本申请的实施例，提供了一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK基因，由SEQIDNo.1所示的核苷酸编码所得。第三方面，根据本申请的实施例，提供了一种生物材料，包括：用于编码所述亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK的核酸分子，或者，含有所述核酸分子的表达盒；或者，含有所述核酸分子的重组载体；或者，含有所述表达盒的重组载体；或者，含有所述核酸分子的重组微生物；或者，含有所述表达盒的重组微生物；或者，含有所述核酸分子的重组载体的重组微生物；或者，含有所述表达盒的重组载体的重组微生物。进一步地，所述核酸分子为SEQIDNo.1所示的cDNA分子。第四方面，根据本申请的实施例，提供了所述的亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK或所述的生物材料在调控亚洲小车蝗生长发育，制备调控亚洲小车蝗生长发育的产品，防治亚洲小车蝗，制备防治亚洲小车蝗的产品，降低亚洲小车蝗存活率，制备降低亚洲小车蝗存活率的产品，降低亚洲小车蝗体重增加量，制备降低亚洲小车蝗体重增加量的产品，降低亚洲小车蝗生长速率，和/或制备降低亚洲小车蝗生长速率的产品上的应用。第五方面，根据本申请的实施例，提供了一种抑制亚洲小车蝗生长发育的方法，包括降低亚洲小车蝗中胞外蛋白酶的表达量和/或活性。进一步地，所述降低亚洲小车蝗中胞外蛋白酶的表达量和/或活性包括：将抑制亚洲小车蝗中胞外蛋白酶的编码基因表达的物质导入亚洲小车蝗。进一步地，所述抑制亚洲小车蝗中胞外蛋白酶的编码基因表达的物质包括抑制亚洲小车蝗中胞外蛋白酶的编码基因表达的dsRNA。进一步地，所述抑制亚洲小车蝗中胞外蛋白酶的编码基因表达的dsRNA为由SEQIDNo.1所示的核苷酸和其反向互补序列所示的核苷酸组成的双链RNA。进一步地，所述导入的方式为注射。由以上技术方案可知，本申请首先从亚洲小车蝗中克隆亚洲小车蝗胞外蛋白酶基因ERK，并对亚洲小车蝗胞外蛋白酶基因ERK设计引物，合成了用于干扰亚洲小车蝗胞外蛋白酶基因ERK的dsRNA，且运用注射法将dsRNA导入亚洲小车蝗对亚洲小车蝗胞外蛋白酶基因ERK进行RNAi。结果表明：dsRNA注射亚洲小车蝗后，存活率、生长速率、体重及总体表现力均显著降低，说明亚洲小车蝗胞外蛋白酶基因ERK在昆虫生长发育过程中起着重要作用。本专利技术为害虫的分子调控提供了新的方法，也为深入理解昆虫生长发育机制、创制新的生物农药制剂提供理论基础。附图说明为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为根据本申请实施例示出的亚洲小车蝗存活率的柱状图；图2为根据本申请实施例示出的雌性亚洲小车蝗体重增加量的柱状图；图3为根据本申请实施例示出的雄性亚洲小车蝗体重增加量的柱状图；图4为根据本申请实施例示出的雌性亚洲小车蝗生长速率的柱状图；图5为根据本申请实施例示出的雄性亚洲小车蝗生长速率的柱状图；图6为根据本申请实施例示出的雌性亚洲小车蝗总体表现力的柱状图；图7为根据本申请实施例示出的雄性亚洲小车蝗总体表现力的柱状图。具体实施方式本申请提供的胞外蛋白酶来源于亚洲小车蝗，结合基因命名法，将其命名为ERK。本申请实施例提供一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK，包括：a)或b)或c)或d)的蛋白质。a)氨基酸序列是SEQIDNo.2所示的蛋白质；或者，b)在SEQIDNo.2所示的蛋白质的N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质。为了使a)中的蛋白质便于纯化，可在序列表中SEQIDNo.2所示的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。表1c)亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK还包括将SEQIDNo.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；上述c)中的亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK，所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。上述c)中的亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述c)中的亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK的编码基因可通过将SEQIDNo.1所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。d)与SEQIDNo.2所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的蛋白质。本申请实施例提供了一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK基因，由SEQIDNo.1所示的核苷酸编码所得。本申请实施例提供了一种生物材料，包括下述A1)至A8)中的任一种：A1)编码亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK的核酸分子；A2)含有A1)所述核酸分子的表达盒；A3)含有A1)所述核酸分子的重组载体；A4)含有A2)所述表达盒的重组载体；A5)含有A1)所述核酸分子的重组微生物；A6)含有A2)所述表达盒的重组微生物；A7)含有A3)所述重组载体的重组微生物；A8)含有A4)所述重组载体的重组微生物。上述生物材料中，A1)所述核酸分子为如下1)或2)或3)所示的基因：1)其编码序列是SEQIDNo.1所示的cDNA分子或基因组DNA分子；2)与1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码ERK蛋白质的cDNA分子或基因组DNA分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK，其特征在于，包括：/n氨基酸序列是SEQ ID No.2所示的蛋白质，或者，在SEQ ID No.2所示的蛋白质的N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质。/n

【技术特征摘要】
1.一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK，其特征在于，包括：
氨基酸序列是SEQIDNo.2所示的蛋白质，或者，在SEQIDNo.2所示的蛋白质的N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质。


2.一种亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK基因，其特征在于，由SEQIDNo.1所示的核苷酸编码所得。


3.一种生物材料，其特征在于，包括：
用于编码权利要求1所述亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK的核酸分子，
或者，含有所述核酸分子的表达盒；
或者，含有所述核酸分子的重组载体；
或者，含有所述表达盒的重组载体；
或者，含有所述核酸分子的重组微生物；
或者，含有所述表达盒的重组微生物；
或者，含有所述核酸分子的重组载体的重组微生物；
或者，含有所述表达盒的重组载体的重组微生物。


4.根据权利要求3所述的生物材料，其特征在于，所述核酸分子为SEQIDNo.1所示的cDNA分子。


5.权利要求1所述的亚洲小车蝗胞外蛋白酶ERK或权利要求3或4所述的生物材料在调控亚洲小车蝗生长发育，制备调控亚洲小车蝗生...

【专利技术属性】
技术研发人员：涂雄兵，张泽华，李霜，徐超民，
申请(专利权)人：宁夏中微泰克生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：宁夏;64