用于眼科疾病的腺相关病毒载体介导的基因治疗制造技术

本发明专利技术提供用于治疗眼部病症和/或疾病的组合物和方法。尤其是，本发明专利技术的组合物和方法涉及用于治疗眼部病症和/或疾病的基因疗法。本发明专利技术的一个具体方面提供了重组DNA，其包含(i)治疗基因，与所述眼部病症或疾病表现相关的缺陷基因的功能对应物，或其组合；以及(ii)适用于将(i)所述基因递送至目标眼部区域的细胞以治疗所述眼部病症或疾病的递送载体，所述递送载体包括腺相关病毒(AAV)血清型。

【技术实现步骤摘要】
用于眼科疾病的腺相关病毒载体介导的基因治疗相关申请的交叉引用本申请要求2019年4月27日提交的美国临时申请No.62/839672的优先权，通过引用将其全文并入本文中。
本专利技术涉及一种治疗眼部病症和/或疾病的基因治疗的组合物和方法。尤其是，本专利技术涉及一种重组DNA，其包含(i)选自以下组成的组的基因：(a)能够改善所述受试者的眼部病症或疾病的治疗基因；(b)与所述病症或疾病症状相关缺陷基因的功能对应物(counterpart)，以及(c)其组合；和(ii)适于将所述基因递送到眼部区域的细胞以治疗所述眼部病症或疾病的递送载体，其中所述递送载体包括腺相关病毒(AAV)血清型。本专利技术还涉及包含该重组DNA的质粒和重组腺相关病毒(rAAV)载体，该重组腺相关病毒载体包含：选自以下组成的组的基因：(a)能够改善所述受试者的眼部病症或疾病的治疗基因；(b)与所述眼部病症或疾病表现相关缺陷基因的功能对应物，和(c)其组合。
技术介绍
腺相关病毒(AAV)作为基因转移载体具有重要的相关性。实际上，腺相关病毒载体是目前基因治疗最常用的病毒载体之一。由于对这种病毒缺乏广泛的了解，直到最近，AAV才引起了极大兴趣。特别是由于AAV是非致病性的，所以它在医学领域还没有得到广泛的研究。迄今为止，已鉴定出12种人类AAV的血清型(AAV血清型1[AAV-1]至AAV-12)和超过100种非人类灵长类血清型。有趣的是，这种病毒缺乏致病性使其成为基因治疗应用理想的候选递送载体。利用基因疗法治疗各种临床疾病已经引起了极大的兴趣。然而大多数基因治疗的目的是纠正由局限型疾病(如镰状细胞贫血和囊性纤维化)的缺陷基因导致的临床病症，而其他非基因诱导的临床疾病(例如癌症)也正在用基因治疗进行测试。最近，基因治疗产品LuxturnaTM获得FDA批准用于治疗RPE65突变相关的莱伯氏先天性黑朦症(Lebercongenitalamaurosis)(LCA)、LCA-2。这一突变是迄今为止发现的超过250个视网膜变性相关基因突变之一。尽管如此，还没有基因治疗被批准用于眼部病症或眼部疾病，例如其他类型的LCA、色素性视网膜炎、增强S锥体综合征(enhanceS-conesyndrome)、Goldmann-Favre综合征，视杆视锥细胞营养不良(rod-conedystrophy)、Bardet-Biedl综合征、色盲症、贝斯特氏症(BestDisease)(卵黄状黄斑变性)、Bardet-Biedl综合征、无脉络膜症、黄斑变性、斯特格氏病(StargardtDisease)、遗传性视网膜劈裂症(X-LinkedRetinoschisis)(XLRS)、视网膜色素变性(X-LinkedRetinitisPigmentosa)(XLRP)、先天性聋视网膜色素变性综合征(UsherSyndrome)、视锥视杆细胞营养不良(cone-roddystrophy)、萎缩性增龄性黄斑变性(Dry-Agerelatedmaculardegeneration)、湿性年龄相关性黄斑变性(wet-Agerelatedmaculardegeneration)等。即使是传统的药物治疗方法也不能用于治疗许多的那些眼部病症或疾病，而且它们需要开发新型治疗方法来解决这种尚未满足的医疗需求。因此，需要新的治疗方法和组合物来治疗各种视网膜变性相关的眼部疾病和/或病症。
技术实现思路
本专利技术提供使用基因疗法治疗各种眼部疾病或病症的组合物和方法。本专利技术的一个具体方面提供了重组DNA，该重组DNA包含：(i)基因，该基因选自以下组成的组：(a)治疗基因，(b)与眼部病症或疾病表现相关缺陷基因的功能对应物，以及(c)其组合；和(ii)递送载体，该递送载体适用于将(i)的所述基因递送至目标眼部区域的细胞以治疗眼部病症或疾病，所述递送载体包括腺相关病毒(AAV)血清型。在一些实施方案中，基因(i)包装或封装在所述递送载体中。在其他实施方案中，递送载体包括AAV的末端反向重复序列(invertedterminalrepeat)(“AAVITR”)。然而在其他实施方案中，所述AAVITR为AAV2ITR。在其他实施方案中，治疗基因选自以下组成的组：(a)人类核激素受体(hNHR)基因或其片段，其中所述hNHR基因选自以下组成的组：NR2E3、NR1C3、NR1D1、RORA、NUPR1、NR2C1和LXRa；(b)生长因子或血管生成调节剂基因，其编码选自以下组成的组的肽：(i)抗-vegf；(ii)晶状体上皮衍生生长因子(lensepitheliumderivedgrowthfactor)；(iii)肿瘤抑素；(iv)转铁蛋白和肿瘤抑素融合蛋白；(v)成纤维细胞生长因子；(vi)血小板衍生生长因子家族；(vii)血管内皮生长因子亚家族；(viii)表皮生长因子家族；(ix)成纤维细胞生长因子家族；(x)转化生长因子-β超家族(例如，TGF-β1；激活素类；叶酸和骨形态发生蛋白)；(xi)血管生成素样家族；(xii)半乳凝素家族；(xiii)整合素超家族，以及色素上皮衍生因子；(xiv)肝细胞生长因子；(xv)血管生成素；(xvi)内皮素；(xvii)缺氧诱导因子；(xviii)胰岛素样生长因子；(xix)细胞因子；和(xx)基质金属蛋白酶基因或其片段；和(c)其组合。在其他实施方案中，缺陷基因的功能对应物包括与视网膜变性相关的基因，例如LCA(例如，CRX、AIPL1、TULP1、CABP4、RPE65、CEP290和本领域技术人员已知的其他基因)；RP(例如，CRX、NRL、NR2E3、PRPH2、RHO、ROM1、RPE65、ABCA4、MERTK、NRL、PDE6A、PDE6B、SAG、TULP1和本领域技术人员已知的其他基因；视锥视杆细胞营养不良(例如，AIPL1、CRX、PRPH2、ABCA4、CNGB3、RAB28、CACNA1F、RPGR和本领域技术人员已知的其他基因)；黄斑变性(例如，PRPH2、ELOV4、ANCA4、RPGR和本领域技术人员已知的其他基因)；先天性静止性夜盲(例如，GNAT1、PDE6B、RHO、CABP4、GRK1、SAG、CANA1F和本领域技术人员已知的其他基因)；突触疾病(例如，CACNA2D4、CACNA1F、XLRS和本领域技术人员已知的其他基因)；Bardet-Biedl综合征(例如，BBS2、BBS4、BBS6、CEP290和本领域技术人员已知的其他基因；Joubert综合征(例如，CEP290和本领域技术人员已知的其他基因)；Senior-Loken综合征(例如，CEP290和本领域技术人员已知的其他基因)；和先天性聋视网膜色素变性综合征(例如，MYO7A、USH2A和本领域技术人员已知的其他基因)。在其本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于改善受试者眼部病症或疾病的重组DNA，所述重组DNA包括：/n(i)基因，该基因选自以下组成的组：/n(a)能够改善所述受试者眼部病症或疾病的治疗基因，/n(b)与所述眼部病症或疾病表现相关的缺陷基因的功能对应物，以及/n(c)其组合；和/n(ii)递送载体，该递送载体适用于将所述基因递送至眼部区域的细胞以治疗所述眼部病症或疾病，其中所述递送载体包括腺相关病毒(AAV)血清型，/n其中，当将所述重组DNA转染至所述受试者的眼部区域时，该重组DNA改善所述受试者的眼部病症或疾病。/n

【技术特征摘要】
20190427 US 62/839,6721.用于改善受试者眼部病症或疾病的重组DNA，所述重组DNA包括：
(i)基因，该基因选自以下组成的组：
(a)能够改善所述受试者眼部病症或疾病的治疗基因，
(b)与所述眼部病症或疾病表现相关的缺陷基因的功能对应物，以及
(c)其组合；和
(ii)递送载体，该递送载体适用于将所述基因递送至眼部区域的细胞以治疗所述眼部病症或疾病，其中所述递送载体包括腺相关病毒(AAV)血清型，
其中，当将所述重组DNA转染至所述受试者的眼部区域时，该重组DNA改善所述受试者的眼部病症或疾病。


2.根据权利要求1所述的重组DNA，其中所述治疗基因选自以下组成的组：
(a)人类核激素受体(hNHR)基因或其片段，其中所述hNHR基因选自以下组成的组：NR2E3、NR1C3、NR1D1、RORA、NUPR1、NR2C1和LXRa；
(b)生长因子或血管生成调节剂基因，该生长因子或血管生成调节剂基因编码选自以下组成的组的肽：
(i)抗-vegf；
(ii)晶状体上皮衍生生长因子；
(iii)肿瘤抑素；
(iv)转铁蛋白和肿瘤抑素融合蛋白；
(v)成纤维细胞生长因子；
(vi)血小板衍生生长因子家族；
(vii)血管内皮生长因子亚家族；
(viii)表皮生长因子家族；
(ix)成纤维细胞生长因子家族；
(x)转化生长因子-β超家族；
(xi)血管生成素样家族；
(xii)半乳凝素家族；
(xiii)整合素超家族；
(xiv)肝细胞生长因子；
(xv)血管生成素；
(xvi)内皮素；
(xvii)缺氧诱导因子；
(xviii)胰岛素样生长因子；
(xix)细胞因子；和
(xx)基质金属蛋白酶基因或其片段；和
(c)其组合。


3.根据权利要求1所述的重组DNA，其中所述缺陷基因表现的所述眼部病症或疾病选自以下组成的组：
(i)莱伯氏先天性黑朦症(“LCA”)(CRX、AIPL1、TULP1、CABP4、RPE65、CEP290等)；
(ii)视网膜色素变性(RP)(CRX、NRL、NR2E3、PRPH2、RHO、ROM1、RPE65、ABCA4、MERTK、NRL、PDE6A、PDE6B、SAG、TULP1等)；
(iii)视锥视杆细胞营养不良(AIPL1、CRX、PRPH2、ABCA4、CNGB3、RAB28、CACNA1F、RPGR等)；
(iv)黄斑变性(PRPH2、ELOV4、ANCA4、RPGR等)；
(v)先天性静止性夜盲(GNAT1、PDE6B、RHO、CABP4、GRK1、SAG、CANA1F等)；
(vi)突触疾病(CACNA2D4、CACNA1F、XLRS等)；
(vii)Bardet-Biedl综合征(BBS2、BBS4、BBS6、CEP290等)；
(viii)Joubert综合征(CEP290)；
(ix)Senior-Loken综合征(CEP290)；和
(x)先天性聋视网膜色素变性综合征(MYO7A、USH2A等)。


4.根据权利要求1所述的重组DNA，其中所述递送载体包含腺相关病毒(AAV)末端反向重复序列(ITR)。


5.根据权利要求4所述的重组DNA，其中所述AAVITR包含AAV2ITR。


6.根据权利要求1所述的重组DNA，进一步包含(i)启动子，(ii)增强子，(iii)聚腺苷酸化部分，或(iv)其组合。


7.根据权利要求6所述的重组DNA，其中所述聚腺苷酸化部分包括猿猴病毒40(SV40)聚腺苷酸化(PolyA)区域、牛生长激素(bGH)PolyA区域，或其组合。


8.根据权利要求1所述的重组DNA，进一步包含巨细胞病毒(CMB)启动子或增强子、延伸因子1a(EF1a)、鸡β-肌动蛋白(CBA)启动子、CAG启动子，或其组合。


9.一种质粒，其包含权利要求1所述的重组DNA。


10.一种重组腺相关病毒(rAAV)载体，包含：
(i)治疗基因，其中所述治疗基因选自以下组成的组：
(a)人类核激素受体(hNHR)基因或其片段，其中所述hNHR基因选自以下组成的组：NR2E3、NR1C3、NR1D1、RORA、NUPR1、NR2C1和LXRa；
(b)生长因子或血管生成调节剂基因，该生长因子或血管生成调节剂基因编码选自以下组成的组的肽：(i)抗-vegf；(ii)晶状体上皮衍生生长因子；(iii)肿瘤抑素；(iv)转铁蛋白和肿瘤抑素融合蛋白；(v)成纤维细胞生长因子；(vi)血小板衍生生长因子家族；(vii)血管内皮生长因子亚家族；(viii)表皮生长因子家族；(ix)成纤维细胞生长因子家族；(x)转化生长因子-β超家族(TGF-β1；激活素类；卵泡抑素和骨形态发生蛋白)；(xi)血管生成素样家族；(xii)半乳凝素家族；(xiii)整合素超家族，以及色素上皮衍生因子；(xiv)肝细胞生长因子；(xv)血管生成素；
(xvi)内皮素；(xvii)缺氧诱导因子；(xviii)胰岛素样生长因子；(xix)细胞因子；
和(xx)基质金属蛋白酶基因或其片段；和
(c)其组合；
(ii)至少一种与眼部病症或疾病表现相关缺陷基因的功能对应物，其中由所述缺陷基因表现的所述眼...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·阿鲁姆翰，A·K·乌帕德亚伊，N·B·海德尔，
申请(专利权)人：奥古根有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US