呋喃唑酮代谢物快速检测试纸条和试纸卡制造技术

本实用新型专利技术公开了一种呋喃唑酮代谢物残留分析的快速检测试纸条和试纸卡。试纸条含有衬板、样品垫、金标结合垫、纤维素膜、吸水垫和保护膜，金标结合垫为吸附呋喃唑酮代谢物ＡＯＺ金标抗体或ＡＯＺ衍生物金标抗体的玻璃纤维棉，在纤维素膜上有用ＡＯＺ－载体蛋白偶联物或ＡＯＺ衍生物－载体蛋白偶联物印制的直线式隐形检测线，用羊抗或兔抗小鼠ＩｇＧ、或羊抗兔ＩｇＧ印制的直线式隐形对照线，两条线平行排列组合为“｜｜”。将不带保护膜的试纸芯放在特制的塑料卡中，即得到试纸卡，塑料卡的面板上设有加样孔和结果显示窗。本实用新型专利技术的试纸条和试纸卡具有特异性强、灵敏度高、简便、快速、直观、准确的特点，适用范围广，成本低，易推广应用。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及一种快速检测微量硝基呋喃类药物的器具， 特别是涉及一种呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)残留分析的快速检 测试纸条和试纸卡。二、 技术背景呋喃唑酮(Furazolidone, FZ)，又名痢特灵，是一种人工 合成的硝基呋喃类广谱抗菌药物，对多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌及某些 原虫和真菌具有抑制或杀灭效果，而且药效稳定，在畜禽和水产养殖中得到了 广泛的应用。但毒理学研究发现，呋喃唑酮及其代谢产物3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone， AOZ)均有很强的毒副作用，可致癌、致突变， 可引起溶血性贫血、血小板减少性紫癜、多发性神经炎等多种疾病。1995年 欧盟首先禁止呋喃唑酮在畜禽和水产养殖中使用，随后美国、日本、澳大利亚 等国将呋喃唑酮列为禁用药，我国农业部2002年3月颁布的《食品动物禁用 的兽药及其它化合物清单》(农牧发 1号)中将呋喃唑酮列为禁用药。呋' 喃唑酮是我国食品安全监控的主要药物之一。尽管我国严禁呋喃哇酮用于畜牧、水产养殖业，但由于其药效确切，价格 低廉，目前在畜牧和水产养殖中违禁使用现象仍较严重。呋喃唑酮在食品动物 中的残留不仅直接危害食用者的身体健康，同时还严重制约我国动物性食品出 口，造成了巨大的经济损失。由于呋喃唑酮在动物体内很快代谢为AOZ， AOZ与组织蛋白结合且在体 内滞留时间长，被视为呋喃唑酮残留的标示物。通过检测母体药物不能判定呋 喃唑酮的实际残留情况，因此检测呋喃唑酮残留的最佳方法是检测其代谢物(AOZ)而并非母体药物本身。目前，用于AOZ残留检测的方法主要有理化分析法和酶联免疫分析法.(ELISA)等。理化分析法主要是高压液相色谱(HPLC)、液相色谱-质谱联用(LC-MS)等。理化分析法灵敏度高，结果准确，但是样品需经一系列复杂的处理净化，繁琐费时，所需仪器设备价格昂贵，而且只有特定的专业技术人员才能操作，不能进行现场检测，时效性差，难以推广。ELISA法以竞争性酶联免 疫反应为检测原理，反应显色后用酶标仪测定OD值进行结果判定。縮短了检 测时间，可以定性定量检测。但ELISA方法需要配套的酶标仪和配套试剂，操 作过程仍较复杂，而且国内现处在研发阶段，进口国外产品价格昂贵，因而 ELISA方法的应用受到了较大限制。三、
技术实现思路
本技术的目的研制出特异、敏感、快速、简便的呋喃唑酮代谢物(AOZ) 残留快速检测试纸条和试纸卡。 本技术的技术方案是一种呋喃唑酮代谢物快速检测试纸条，含有衬板和在衬板上依次衔接的样 品垫、金标结合垫、包被膜、吸水垫，在试纸条的两端粘贴有保护膜，金标结合垫为吸附AOZ金标抗体的玻璃纤维棉，在包被膜上有用AOZ偶联的载体蛋 白溶液印制的直线式隐形检测线，用羊抗或兔抗小鼠IgG、或羊抗兔IgG溶液印 制的直线式隐形对照线，两条线平行排列组合为"I I "。一种呋喃唑酮代谢物快速检测试纸条，含有衬板和在衬板上依次衔接的样 品垫、金标结合垫、包被膜、吸水垫，.在试纸条两端粘贴有保护膜，金标结合 垫为吸附AOZ衍生物金标抗体的玻璃纤维棉，在包被膜上有用AOZ衍生物偶 联的载体蛋白溶液印制的直线式隐形检测线，用羊抗或兔抗小鼠IgG、或羊抗兔 IgG溶液印制的直线式隐形对照线，两条线平行排列组合为"I I "。一种呋喃唑酮代谢物快速检测试纸卡，含有衬板、样品垫、金标结合垫、 包被膜和吸水垫组成试纸芯，试纸芯放在特制的塑料卡中，金标结合垫为吸附 AOZ金标抗体的玻璃纤维棉，在包被膜上有用AOZ偶联的载体蛋白溶液印制的 直线式隐形检测线，用羊抗或兔抗小鼠IgG、或羊抗兔IgG溶液印制的直缚式隐 形对照线，两条线平行排列组合为"I I "。一种呋喃唑酮代谢物快速检测试纸卡，含有衬板、样品垫、金标结合垫、 包被膜和吸水垫组成试纸芯，试纸芯放在特制的塑料卡中，金标结合垫为吸附 AOZ衍生物金标抗体的玻璃纤维棉，在包被膜上有用AOZ衍生物偶联的载体蛋白溶液印制的直线式隐形检测线，用羊抗或兔抗小鼠IgG、或羊抗兔IgG溶液印 制的直线式隐形对照线，两条线平行排列组合为"I I "。所述的衬板为不吸水的韧性材料；所述的样品垫为玻璃纤维棉，或尼龙膜， 或聚偏二氟乙烯膜，或聚酯膜；所述的吸水垫为吸水能力较强的吸水滤纸或滤 油纸；所述的韧性材料为硬质塑胶条，或不吸水硬纸条；所述的包被膜为硝酸 纤维素膜，或为纯纤维素膜，或为羧化纤维素膜；所述的保护膜为不透明的胶 膜。所述的AOZ金标抗体为胶体金标记的AOZ单克隆抗体或多克隆抗体,AOZ 衍生物金标抗体为胶体金标记的AOZ衍生物单克隆抗体或多克隆抗体，所述的 偶联AOZ或偶联AOZ衍生物的载体蛋白为牛血清白蛋白BSA，或为鸡卵清白 蛋白OVA，或为人血清白蛋白HSA。所述的试纸条在样品垫、金标结合垫及吸水垫上覆盖有保护膜，样品垫、 金标结合垫对应的保护膜上印制有待测样品标记线，该标记线偏向样品垫一侧 约0.5cm处。所述的塑料卡由底座和面盖嵌合在一起构成，底座上有放试纸芯的凹槽以 及与面盖相结合的卡齿，面盖有观察窗和加样孔以及与底座相结合的卡齿，观 察窗与试纸芯的包被膜相对应，加样孔与试纸芯的样品垫相对应，在观察窗旁 边分别印有T和C， T表示检测线，在靠近加样孔侧，C表示对照线，在远离加. 样孔侧。本技术的快速检测试纸条和试纸卡具有下列优点① 特异性强，敏感性高。该胶体金层析检测试纸条和试纸卡以胶体金标记 高亲和力的单克隆抗体为基础制备而成，金标抗体中金颗粒与抗体分子之间无 共价键形成，二者通过异性电荷间的范德华力相结合，胶体金标记对单克隆抗 体的特异性和亲和力影响很小，且具有较高的标记率。因此，试纸条和试纸卡 具有较强的特异性和较高的敏感性，检出最低限量可达到1 5ppb。② 简便、快速、时效性强。使用胶体金层析检测试纸条和试纸卡，无需任 何其它试剂和仪器，可现场操作，只要将试纸条插入被检样品10 20秒钟，在' 10分钟内即可判定检测结果。③ 结果显示形象、直观、准确。胶体金层析检测试纸条和试纸卡均以显示 棕红色线"I "和"I I"作为检测结果阳性和阴性标记，即在包被膜上显示. 一条棕红色线"I "时，表示在被检样品中含有被检物，显示两条棕红色线"II "时，表示在被检样品中不含被检物。结果判定形象、直观、准确，简单明 了，不易出现假阳性和假阴性等人为误判。④ 节省费用，适用范围广，便于推广。使用快速检测试纸条和试纸卡，比用仪器分析和进口ELISA试剂盒的费用大幅下降。另外，试纸条和试纸卡的适 用范围广，可满足不同层次人员需要，包括专业检验，海关检疫，卫生检疫， 质量监测，加工企业和养殖场户等，便于推广应用，具有广阔的市场前景和明 显的经济、社会效益。四、 附图说明图l、呋喃唑酮代谢物快速检测试纸条俯视结构示意图。 图2、呋喃唑酮代谢物快速检测试纸条剖面结构示意图。 图3、呋喃唑酮代谢物快速检测试纸卡俯视结构示意图。 图4、呋喃唑酮代谢物快速检测试纸卡剖面结构示意图。 图中，1:衬板，2:样品垫，3:金标物结合垫，4:包被膜，5:检测线， 6:对照线，7:吸水垫，8-1:样品浸入端保护膜，8-2:手柄端保护膜，9:标识线， 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种呋喃唑酮代谢物快速检测试纸条，含有衬板和在衬板上依次衔接的样品垫、金标结合垫、包被膜、吸水垫，在试纸条的两端粘贴有保护膜，其特征是：金标结合垫为吸附ＡＯＺ金标抗体的玻璃纤维棉，在包被膜上有用ＡＯＺ偶联的载体蛋白溶液印制的直线式隐形检测线，用羊抗或兔抗小鼠ＩｇＧ、或羊抗兔ＩｇＧ溶液印制的直线式隐形对照线，两条线平行排列组合为“｜｜”。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张改平，杨艳艳，邓瑞广，李学伍，王自良，赵东，杨继飞，范国英，
申请(专利权)人：河南省动物免疫学重点实验室，
类型：实用新型
国别省市：41[中国|河南]