一种新的多肽——人过氧化物酶体装配因子-10和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人过氧化物酶体装配因子－１０，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如Ｚｅｌｌｗｅｇｅｒ综合征、新生儿肾上腺脑白质营养不良、婴幼儿多神经炎性遗传性运动失调、六氢吡啶羧酸过多酸血症、其它胚胎发育紊乱症、生长发育障碍性疾病、物质代谢紊乱症、各种肿瘤、炎症、免疫性疾病，ＨＩＶ感染等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人过氧化物酶体装配因子－１０的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人过氧化物酶体装配因子-10，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。过氧化物酶体又称微体，是由单层膜包围的内含一种或几种氧化酶类的细胞器。过氧化物酶体是一种异质性的细胞器，不同生物的细胞中，甚至单细胞生物的不同个体中所含酶的种类及其行使的功能都有所不同。动物细胞中过氧化物酶体在肝细胞或肾细胞中，它可氧化分解血液中的有毒成分，起到解毒作用，例如饮进的酒精几乎半数是在过氧化物酶体中氧化成乙醛的。过氧化物酶体中常含有两种酶一种是依赖于黄素(FAD)的氧化酶，起作用是将底物氧化形成H2O2；二是过氧化氢酶，其含量常占过氧化物酶体总蛋白量的40％，它的作用是将H2O2分解，形成水和氧气。由这两种酶催化的反应，紧密耦联，从而使细胞免受H2O2的毒害。过氧化物酶体可降解生物大分子，最终产生H2O2，而其中的多数反应在其他细胞器中也可进行，并不产生H2O2，因此它的另一种功能是分解脂肪酸等高能分子向细胞直接提供热能，而不必通过水解ATP的途径获得热能。过氧化物酶体装配因子-1(PAF-1)是一种过氧化物酶体的膜整合蛋白，在参与过氧化物酶体的装配过程中起着重要作用。哺乳动物的过氧化物酶体装配因子-1(PAF-1)高度同源，都含有两段极其保守的序列，即两个跨膜片段，在COOH-端区域还具有七个保守的半胱氨酸残基。PAF-1的两个跨膜域对PAF-1作为过氧化物酶体中的一种膜整合蛋白起到定位的作用(Nobuyuki Shimozawa et al.,Science 255,1132(1992))。过氧化物酶体装配因子-1(PAF-1)缺失或者发生变异会影响过氧化物酶体装配，而一旦缺少这种正常的含过氧化氢酶的颗粒，便会导致多种代谢紊乱，例如过氧化物酶的β-氧化及缩醛磷脂生物合成缺陷，从而引发各种疾病，例如Zellweger综合征，新生儿肾上腺脑白质营养不良，婴幼儿多神经炎性遗传性运动失调以及六氢吡啶羧酸过多酸血症这些基因需要过氧化物酶体装配的遗传疾病。其中Zellweger综合征是因PAF-1缺陷而引起的典型病症，这种病是致死的常染色体隐性疾病，临床症状为严重的神经异常，各种畸形特征，肝大以及多发性肾囊肿(E.A.C.Wiemer et a1.,Eur.J.Cell Biol.50,407(1989))。通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本专利技术的多肽的表达谱与人过氧化物酶体装配因子-1的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人过氧化物酶体装配因子-10。由于如上所述人过氧化物酶体装配因子-10蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人过氧化物酶体装配因子-10蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人过氧化物酶体装配因子-10蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人过氧化物酶体装配因子-10以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人过氧化物酶体装配因子-10的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人过氧化物酶体装配因子-10的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人过氧化物酶体装配因子-10的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人过氧化物酶体装配因子-10的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人过氧化物酶体装配因子-10的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人过氧化物酶体装配因子-10异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中119-397位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2567位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人过氧化物酶体装配因子-10蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人过氧化物酶体装配因子-10蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗Zellweger综合征、新生儿肾上腺脑白质营养不良、婴幼儿多神经炎性遗传性运动失调、六氢吡啶羧酸过多酸血症、其它胚胎发育紊乱症、生长发育障碍性疾病、物质代谢紊乱症、各种肿瘤、炎症、免疫性疾病，HIV感染或其它由于人过氧化物酶体装配因子-10表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人过氧化物酶体装配因子－１０，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]