阳离子介导的三链体杂交分析制造技术

技术编号:2594709 阅读:219 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
三链体复合体含有与双链核酸靶结合的单链探针,其中该探针包括杂聚核酸或杂聚核酸类似物。所述复合体的所有碱基三联体选自A-T-A、T-A-T、U-A-T、T-A-U、A-U-A、U-A-U、G-C-G和C-G-C。阳离子促进的分析包括检测这些三链复合体的存在以确定探针和靶序列之间的互补性的程度。该分析优选检测标记的荧光强度的变化,作为探针和靶之间结合亲合力的函数。该标记可共价结合到探针或靶上,或可以是反应介质中的嵌入荧光团。(*该技术在2021年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
专利技术说明专利技术背景1.专利
本专利技术涉及核酸三链体,以及更具体地涉及利用荧光强度测定来准确地分析三链体核酸复合体的方法。2.相关领域说明几十年来,一直使用荧光染料来检测并量化核酸。基于荧光强度分析的最基本形式通常包含靶核酸与含有荧光团的探针接触,从结合探针中将未结合探针去除,检测洗涤样品中的荧光。均相分析在此基本分析上有了提高,前者并不需要洗涤的步骤,或不需要提供非液相的支持。例如,Livak等的美国专利5,538,848和Maggio的美国专利4,220,450公布了利用溶液中的寡核苷酸探针对核酸序列基于均相荧光的分析。然而,这些专利需要淬灭剂与报告剂组合使用,以区分杂交探针和未杂交探针所产生的信号。Livak等在其公布的方法中还要求使用酶。淬灭剂与酶增加了该方法的复杂性和花费。Kidwell的美国专利5,332,659公布了检测溶液中核酸序列的方法,其使用包含至少两个荧光基团部分的探针。这些荧光基团的选择要求是,当二者间距足以改变其光谱的波长依赖性时,互相之间有电性的干扰。未杂交的探针比杂交到靶序列上的探针更灵活,因此,未杂交探针上的两个荧光基团部分比杂交探针上的更可本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种三链体复合体,其包括与双链核酸靶结合的单链探针,其中所述探针包括杂聚核酸或杂聚核酸类似物,以及所述复合体的所有碱基三联体选自A-T-A、T-A-T、U-A-T、T-A-U、A-U-A、U-A-U、G-C-G和C-G-C。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:亚斯曼I戴克斯皮埃尔皮卡德格伦H埃里克森
申请(专利权)人:英詹尼斯公司
类型:发明
国别省市:BB[巴巴多斯]

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